SUMO修饰IFNγ信号转导域偶联截短型TGF-β II型受体的融合蛋白可溶性表达条件优化

目的优化小分子泛素相关修饰物(SUMO)修饰IFNγ信号转导域偶联截短型TGF-βII型受体的融合蛋白SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达的条件。方法将已转化重组质粒pET28a/SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ的大肠杆菌Rosetta(DE3)在不同异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度(0.1、0.3、0.6和1 mmol/L IPTG)、不同诱导温度(37℃、16℃和20℃)和时间(6 h、16 h和20 h)条件下进行诱导,SDS-PAGE分析SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ的表达情况。结果在20℃、IPTG为0.6 mmol/L诱导20 h时,重组蛋白SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达量最高,约占上清中总蛋白的20.24%。结论获得SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达最佳条件,为进一步制备生物活性的蛋白和后续功能研究奠定基础。