马齿苋总黄酮抗小鼠缺氧作用及其机制研究

目的:筛选马齿苋抗缺氧作用有效成分,并对筛选出的有效成分进行作用机制的研究。方法:马齿苋抗缺氧作用有效成分筛选:将70只小鼠随机分为总黄酮组、总生物碱组、多糖组、酸性成分组、碱性成分组、人参总皂苷组(阳性对照)和生理盐水组(阴性对照),每组10只。各组小鼠予以相应药物灌胃1周后,进行常压缺氧暴露生存时间实验,筛选出马齿苋抗缺氧作用的有效成分。马齿苋总黄酮抗缺氧机制研究:将90只小鼠随机分为总黄酮组、人参总皂苷组和生理盐水组,各组再分成3个亚组,即缺氧暴露12、24和36 h组,每组10只。将小鼠置于氮氧混合气(10%O2+90%N2)舱内分别缺氧暴露12、24和36h后,测定血红细胞计数、血红蛋白含量、血细胞压积、血浆红细胞生成素(erythropoietin,EPO)以及肾脏与大脑皮质EPO mRNA的表达水平。结果:与生理盐水组比较,马齿苋总黄酮组小鼠缺氧暴露生存时间明显延长;马齿苋总黄酮组小鼠不同缺氧时段肾脏和大脑皮质EPO mRNA的表达水平明显增加,血浆EPO、红细胞计数和血红蛋白含量亦明显升高。结论:总黄酮是马齿苋抗缺氧作用的有效成分,其延长小鼠缺氧生存时间的机制可能是促进EPO的表达以及红细胞和血红蛋白的生成。

马齿苋的抗低氧作用及其机制研究

目的观察不同浓度马齿苋水提液对低氧小鼠的保护作用及其机制。方法以生理盐水和人参总皂苷为对照,观察不同浓度马齿苋水提液对密闭低氧条件下小鼠存活时间的影响,采用生物化学方法测定丙酮酸激酶(PK)和磷酸果糖激酶(PEK)活性,荧光素酶法测定ATP含量,定磷法测定Na+,K+-ATP酶活性,分光光度法测定乳酸含量,2,4二硝基苯肼比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果(1)0.5,1.0,2.0 g/ml 3种浓度的马齿苋水提液分别延长密闭低氧小鼠的生存时间24%,36.5%和27.4%;(2)1 g/ml马齿苋水提液可明显增强低氧小鼠心、脑细胞PK、PEK活性,缓解细胞内ATP含量下降幅度,提高Na+,K+-ATP、Ca2+,Mg2+-ATP和LDH等酶的活性。结论马齿苋水提液可提高小鼠耐低氧能力,机制之一可能是其促进低氧小鼠无氧酵解关键酶的活性,进而缓解因低氧引起能量代谢障碍所致的细胞损伤。

人类第10号染色体缺失的编码与磷酸酶和张力蛋白同源的基因分子的功能研究进展

人类第10号染色体缺失的编码与磷酸酶和张力蛋白同源的基因（phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN）是继p53后第二重要的与多种肿瘤发生发展有密切关系的抑癌基因。该基因能转录一段5.5kb的mRNA,其编码的蛋白在结构上与蛋白磷酸酶的催化结构域以及细胞骨架蛋白、张力蛋白和辅助蛋白具有高度同源性。

胆管癌中PTEN表达与其对雷公藤红素敏感性的研究

目的探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)差异表达与胆管癌预后及胆管癌细胞对雷公藤红素敏感性的影响。方法通过免疫组织化学法、Western blot检测临床胆管癌组织样本和不同胆管癌细胞系(HCCC-9810、TFK1、RBE)中PTEN的表达;CellTiter检测PTEN差异表达的胆管癌细胞系及原代培养人胆管癌细胞(patient-derived tumor cells,PDCs)经雷公藤红素处理后的细胞活力,并观察光镜下细胞形态变化。结果对65例胆管癌组织样本的检测发现PTEN缺失/低表达组患者的总体生存期与无病生存期均显著低于PTEN高表达组,差异有统计学意义(均P<0.01);胆管癌细胞系中存在PTEN差异性表达,HCCC-9810细胞系(PTEN缺失)对雷公藤红素最敏感,RBE细胞系(PTEN高表达)最不敏感;过表达PTEN则会降低HCCC-9810细胞系对雷公藤红素的敏感性。PTEN表达缺失的原代培养PDCs对雷公藤红素更为敏感。结论胆管癌组织中PTEN缺失/低表达与患者不良预后相关,PTEN表达缺失的胆管癌细胞系对雷公藤红素更为敏感。

氨基酸转运体组分SLC3A2在肿瘤发生发展中的作用

SLC3A2(solute carrier family 3 member 2)是来自SLC3家族的一种Ⅱ型跨膜糖蛋白,是氨基酸转运体(heteromericamino acid transports,HATs)的重链组成部分。HATs在细胞中广泛表达并介导了几乎所有必需氨基酸的跨膜转运,保证细胞内氨基酸水平的稳定,对维持细胞正常的生物学功能具有重要作用。越来越多的研究报道,SLC3A2在多种肿瘤中高表达并参与细胞的恶性转化,然而其具体作用机制仅有初步报道尚未阐明。现就SLC3A2的结构、功能及其在肿瘤发生发展过程中的作用机制等综述如下。

Musashi-1在肝细胞肝癌中的表达及其与临床预后的关系

目的研究Musashi-1在肝细胞肝癌患者癌组织及癌旁组织中的表达,探讨其与临床预后的关系及对肝癌细胞转移侵袭的影响。方法收集我院2000年6月至2010年6月间138例行根治性肝细胞肝癌切除术患者的术中肝癌以及癌旁样本,利用免疫组织化学方法检验癌组织与癌旁组织中Musashi-1的表达水平;通过Pearsonχ2检验和Fisher精确检验分析Musashi-1与患者临床特征以及预后之间的关系。利用qPCR检测癌组织和癌旁组织中CD133的表达并对癌组织中Musashi-1与CD133的表达水平进行相关性分析。构建稳定过表达Musashi-1的人肝癌细胞系SMMC-7721细胞,利用Sphere成球实验检测Musashi-1对肿瘤细胞成球能力的影响,利用肿瘤侵袭实验探究Musashi-1对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果 138例肝细胞肝癌患者中有105例(76.1%)癌组织中Musashi-1的表达高于癌旁组织(P<0.05)。Musashi-1的表达与甲胎蛋白(AFP)水平、腹水、远处转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、乙肝病史、肿瘤大小、子灶、门静脉癌栓、镜下癌栓等无关。Musashi-1的表达水平对患者总体生存率和无瘤生存率有显著影响(P<0.05)。肝癌组织中CD133mRNA的表达高于癌旁组织(P<0.05),且CD133的表达与Musashi-1的表达呈正相关(R2=0.78,P<0.001)。体外实验证实过表达Musashi-1的SMMC-7721细胞的成球能力和侵袭能力增强。结论 Musashi-1在肝细胞肝癌中表达增加,对肝细胞肝癌的进展可能具有促进作用,其表达水平可以为判断预后提供参考。

醛固酮抑制肾小球系膜细胞的自噬激活加速其在氧化应激状态下的凋亡

目的探讨醛固酮对肾小球系膜细胞自噬激活的影响。方法通过3种经典的自噬活性检测方法检测醛固酮对体外培养的系膜细胞自噬的影响:(1)蛋白质印迹法检测不同浓度的醛固酮干预肾小球系膜细胞系(HMCL)后自噬相关的蛋白标记物LC3、SQSTM1/P62的表达水平变化;(2)向系膜细胞系转入GFP-LC3的真核表达质粒,用激光共聚焦显微镜观察醛固酮干预下系膜细胞荧光自噬点数量的变化并进行统计学分析;(3)通过电子显微镜观察醛固酮干预下系膜细胞自噬泡数量的变化并进行统计学分析。通过光镜下形态学观察及蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)剪切体的表达情况,分析醛固酮干预下系膜细胞在过氧化氢刺激后凋亡水平的变化。结果 3种方法均证实高生理剂量醛固酮可以抑制系膜细胞自噬激活:(1)10-7 mol/L醛固酮干预12h后自噬标记蛋白LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化减少约40%;(2)10-7 mol/L醛固酮干预12h能够降低饥饿及雷帕霉素诱导的系膜细胞自噬点数量,降低的比率分别为60%和47%;(3)醛固酮干预后可减少饥饿和雷帕霉素诱导的系膜细胞自噬泡的增加。10-7 mol/L醛固酮干预系膜细胞12h后接受过氧化氢2.5×10-6 mol/L刺激较对照组细胞凋亡的比率明显增加(P<0.05)。结论高生理浓度的醛固酮能够抑制系膜细胞的基础自噬激活并促进系膜细胞在氧化应激条件下的凋亡。

嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤治疗中的应用

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别能力,靶向发挥T细胞的效应功能。目前CAR-T细胞在临床治疗白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的效果。但由于实体肿瘤的某些特点,CAR-T细胞在临床治疗实体肿瘤的实践中存在部分障碍。随着研究的深入,三代CAR-T细胞、双重特异性CAR-T细胞等的应用将为CAR-T细胞临床治疗实体肿瘤开拓道路。本文就近年来CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用作一综述。

圣雄黑山煤矿高陡边坡稳定性数值模拟分析

为保障矿山安全生产,实现安全风险预控管理,针对黑山露天煤矿南帮边坡,通过现场工程地质勘察和岩石力学试验,建立FLAC^(3D)数值模拟计算模型,从应力、位移、塑性区变化等方面进行边坡稳定性分析。结果表明,该矿南帮边坡竖直和水平应力符合地应力分布规律,由于受到开挖卸荷及上部覆岩挤压作用,在坡脚煤台阶处出现应力集中现象。边坡整体位移较小,基本处于稳定状态,在+2 420～+2 430 m煤台阶坡脚处出现局部塑性集中区,后期可能产生局部变形滑坡现象,需加强监测。分析结果为矿山边坡防护和安全生产提供重要技术依据。

风蚀区露天矿水土流失综合防治措施探讨

本文以新疆圣雄能源股份有限公司黑山露天煤矿为研究对象,结合该矿在建设和生产过程中水土流失的源头及影响因素分析,通过对开采过程水土流失量预测,提出合理的水土流失防治措施,为该露天矿的安全生产和水土保持提供技术依据。

DJ-1蛋白调节核因子κB和MAPKs通路影响肝癌细胞存活的研究

目的研究DJ-1蛋白在肝细胞癌(HCC)组织中表达,并初步探索DJ-1蛋白在HCC细胞系中的生物学作用。方法应用组织芯片技术、免疫组织化学(IHC)、实时定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印记(Western Blotting)检测DJ-1蛋白在HCC癌组织及相应癌旁肝组织中的表达情况;通过HCC细胞系培养、慢病毒介导RNA干扰技术平板克隆、CC8细胞增殖检测实验进一步明确DJ-1蛋白在HCC细胞中功能。结果癌组织中的mRNA显著高于癌旁组织和正常肝组织,差异有显著性。对手术标本建立组织芯片进行DJ-1蛋白染色发现,DJ-1蛋白在癌组织中表达较高,DJ-1蛋白主要定位在细胞浆里;而在对应的癌旁组织中,也有一定水平的阳性染色区域。75%癌组织中呈高表达(90/120),而癌旁组织中DJ-1蛋白高低表达差异无显著性。应用慢病毒介导的shRNA感染癌细胞,显著抑制了DJ-1蛋白的表达。在正常培养的条件下DJ-1蛋白的干扰对LM3和SMMC7721细胞的生长无显著影响;剥夺培养基中的糖则对干扰细胞和对照细胞均有抑制细胞增殖作用。将培养基中的血清降低至3%时,干扰DJ-1蛋白的细胞增殖能力显著高于对照细胞。干扰DJ-1蛋白的细胞在低血清环境下具有较强的增殖和存活能力。采用肿瘤坏死因子α(TNFα)联合放线菌酮(CHX)刺激的对照细胞和干扰DJ-1蛋白的肝癌细胞,经单独TNFα处理的细胞未发生形态学变化,TNFα+CHX处理的细胞发生了形态学改变。取经TNFα+CHX处理的细胞裂解液,检测聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)水平,在对照细胞中剪切的PARP显著高于shDJ-1蛋白细胞。检测NF-κB和MAPKs信号通路中关键蛋白的磷酸化水平,p-p65、p-JNK、p-p38和p-ERK水平在干扰细胞显著高于对照细胞。结论 DJ-1蛋白在HCC癌组织中呈现高表达状态,DJ-1蛋白影响HCC细胞的增殖和对抗凋亡等生物学行为,影响HCC的进程。提示DJ-1蛋白的缺失引起细胞核因子κB和MAPKs信号通路的激活,特别是感受氧化应激的p38的活化更为显著,可以解释干扰DJ-1蛋白细胞在不良环境下更有存活优势的原因。

同源异形框蛋白Six4在肝细胞癌中的表达及生物学功能研究

目的研究Six4在肝细胞癌(HCC)组织中表达与预后的关系,探索Six4在HCC细胞系中的生物学作用。方法应用组织芯片技术、免疫组织化学(IHC)、实时定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印记(WB)检测Six4在HCC癌组织及相应癌旁、正常肝组织中的表达情况,分析Six4蛋白表达与HCC患者预后的关系;通过HCC细胞系培养、慢病毒介导RNA干扰技术(Lv-shRNA)、Transwell迁移实验、平板克隆、低黏附培养、CC8细胞增殖检测和裸鼠皮下荷瘤实验进一步明确Six4在HCC细胞中功能。结果 Six4蛋白在癌组织中表达较高。癌组织中,Six4蛋白主要定位在细胞核里;而在对应的癌旁组织中,很少有阳性的染色区域。对263例配对HCC组织染色状况进行统计,癌组织中呈现高表达183例,两者接近52例,低于癌旁染色28例。通过RT-PCR检测发现,癌组织中Six4的mRNA显著高于各自的癌旁组织和远端正常组织,且正常肝组织、癌旁组织和癌组织间差异有显著性。WB检测提示Six4蛋白在癌组织匀浆中表达更高。对263例HCC肿瘤样本进行评分和分级,0~1分113例;2~3分150例。高表达Six4的患者平均总生存期为25.7个月,低表达Six4患者为40.5个月;高表达Six4的患者平均无进展生存期为12.7个月,低表达Six4患者为21.3个月;与低表达Six4患者相比,高表达Six4患者生存时间更短,预后更差,差异有显著性。Six4在男性样本中表达水平高于女性;Six4表达越高,肿瘤越大,患者门静脉侵犯比例越高,BCLC分期和TNM分期也越差,提示患者的不良预后。IHC染色显示Six4蛋白在PVTT中表达高于原发癌组织,核阳性率也显著升高;PVTT中Six4的mRNA显著高于各自的原发肿瘤、癌旁和正常肝组织,且远端正常肝组织、癌旁组织、癌组织、癌栓组织间差异有显著性;WB检测也提示Six4蛋白在PVTT组织匀浆中表达更高。结论 Six4蛋白在HCC原发癌组织和癌栓组织中呈现高表达,其表达水平与HCC患者预后密切相关,可作为临床预测食管鳞癌患者预后的指标。

中下段胆管癌的预后影响因素分析

目的:探讨中下段胆管癌的预后影响因素。方法:对79例中下段胆管癌患者的临床资料进行回顾性分析,采用Kaplan-Meier分析对确定的单因素进行生存率的描述,用Cox回归进行多因素分析,采用log-rank法对单因素进行生存分析评价。结果:79例患者1、3、5年生存率分别为70.2%,36.2%,19.1%,中位生存时间为19.8个月。行根治性手术患者1年、3年、5年生存率分别为87.9%、45.5%和24.2%,分别显著高于姑息性手术患者1年、3年、5年生存率(28.9%、14.3%和7.1%);行根治性手术患者的中位生存时间为34.5个月,较姑息性手术患者显著延长(8个月),根治术与姑息性手术1、3、5年生存率及中位生存时间比较四项均P<0.01,差异具有统计学意义。单因素分析显示肿瘤病理分化,慢性病史,淋巴结转移为影响中下段胆管癌预后的因素。多因素分析显示慢性病史、手术切缘、肿瘤病理分化程度是影响中下段胆管癌预后的独立危险因素。结论:慢性病史、手术切缘、肿瘤病理分化程度为中、下段胆管癌行切除术后预后的独立危险因素,根治性手术可提高中、下段胆管癌患者的生存率和延长其生存时间。

5-羟色胺可促进肝细胞癌的发生与发展

目的 ：研究5-羟色胺（即血清素）在肝细胞癌发生和发展过程中的作用。方法 ：采用二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱导法建立SpragueDawley大鼠肝细胞癌模型,应用HE染色法确定模型建立过程中DEN诱发大鼠癌变的病程分期。收集大鼠肝细胞癌模型各阶段的血清和肝脏标本,以及临床上慢性肝炎、肝硬化和肝癌患者的血清标本,应用ELISA法检测这些血清标本中5-羟色胺的含量,并用实时荧光定量PCR法检测肝脏标本中5-羟色胺受体（5-hydroxytryptamine receptor,5-HTR）的m RNA表达水平。应用CCK-8法检测5-羟色胺对人肝癌Huh7细胞体外增殖能力的影响;建立Huh7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,然后腹腔注射5-羟色胺,观察移植瘤的体内生长情况以及荷瘤裸鼠的存活情况。结果 ：DEN诱导大鼠肝癌模型有3个病程：炎性反应期（第1-8周）、肝硬化期（第9-15周）及肝癌期（第16-20周）。大鼠DEN诱癌模型和临床患者血清中5-羟色胺的含量均随着肝炎-肝硬化-肝癌的进展不断升高（P值均〈0.001）,而且大鼠模型的肝脏组织中HTR2A和HTR1B的表达水平均随着病程进展不断升高（P值均〈0.001）。5-羟色胺可以逆转血清剥夺对人肝癌Huh7细胞体外增殖的抑制作用（P〈0.01）,并可促进Huh7细胞裸鼠移植瘤的体内生长（P〈0.001）,缩短荷瘤裸鼠的生存期（P=0.002）。结论 ：5-羟色胺可能通过与其受体相结合,对肝细胞癌的发生和发展起到促进作用。

谈概括式导语写作

同新闻是客观地叙述事实的基本要求相适应,在多数情况下,新闻导语采用的是叙述的方式,即:直截了当地用客观事实说话,以凝炼的语言,用提要、归纳、概括的方法,开门见山地反映出新闻中最主要的、最新鲜的事实。揭示出主题思想,吸引读者阅读新闻。

论目击新闻的时差处置

记者及时赶到新闻发生的现场,采写一则现场短新闻,因报道中的故障或编辑部在安排中的疏忽,致使这则新闻变成"明日黄花"。

重视“危机管理”

岁末年初谈“危机”,是不是有点“煞风景”?否也!因为生活原本就是阴晴冷暖各有、顺境逆境同在的。尤其是今年来,一个既陌生又熟悉的话题常在人们面前晃动:如何对待危机,怎样实施危机管理,就更有议一议的必要。