大豆转化体E8A7027外源T-DNA分析及特异性检测体系建立

为进一步分析转AgGlpF基因耐盐转基因大豆E8A7027转化体的分子特征信息并对其进行特异性检测,本研究分离该转化体的旁侧序列并建立其特异性PCR检测体系。基于基因组重测序技术并结合Sanger测序技术,将基因组重测序分析获得的序列信息与参考大豆基因组进行对比,确定E8A7027转化体的T-DNA区在大豆基因组上的插入位点及其5′端和3′端的旁侧序列。根据旁侧序列设计PCR检测引物,并对检测体系的特异性、灵敏度进行实验室内验证。结果显示:转基因大豆E8A7027的整合位点为Chr09染色体的33886331位点,整合方式为单拷贝插入,受体基因组DNA在插入位点缺失了1段58 bp序列,分别获得E8A7027大豆的5′端旁侧序列910 bp和3′端旁侧序列802 bp。根据这两个旁侧序列设计引物建立的PCR检测方法,能够特异性地将E8A7027大豆转化体与其他转基因作物和非转基因大豆区分开,方法的检测灵敏度为0.05%。研究结果可为E8A7027转化体的安全评价和监管检测提供技术支撑。

糖尿病合并耐药结核患者外周血T细胞亚群分析

目的 分析糖尿病合并耐药结核患者外周血T细胞亚群特点。方法 选取太原市第四人民医院2020年11月至2022年3月糖尿病合并肺结核患者60例(合并组),单纯肺结核患者60例(未合并组),和同期60名健康体检者(健康对照组),同时依据药敏结果将合并组患者分为敏感组(32例)和耐药组(28例),分析比较各组患者外周血T细胞亚群特点。结果 与健康对照组相比,未合并组、合并组CD4^(+)%、CD4/CD8比值依次降低,CD8^(+)%依次升高,差异均有统计学意义(P<0.01);合并组中耐药组与敏感组相比,CD4^(+)%、CD4^(+)/CD8^(+)比值进一步降低,CD8^(+)%升高(P<0.01)。结论 T细胞亚群介导的细胞免疫功能紊乱是糖尿病合并耐药结核发生的关键因素。针对该方向所制定的治疗策略,有望成为有效地改善患者病情及预后的新途径。

膝关节骨关节炎动物模型评价方法的研究进展

膝关节骨关节炎(KOA)是常见的慢性关节疾病之一,发病机制尚不明确。动物模型是研究KOA发病机制和探寻其治疗措施的重要方法,而设计合适的评价方法是进行动物模型研究的前提。目前,KOA动物模型的评价方法包括组织病理学评价、影像学评价、症状评价、关节镜评价及生物标志物评价,其中以组织病理学评价为主,多种评价方式联合应用。该文对近年KOA动物模型评价方法的研究进展进行综述,为构建理想的KOA动物模型提供参考。

利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系

转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。

一种5重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立

以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。

应用多重PCR技术快速筛查食品中的转基因成分

以转基因植物中常见的3种筛选调控元件、2种标记基因和1种目的基因为检测靶标,建立了能在一次PCR扩增中同时检测6种转基因成分的多重PCR检测方法。结果表明,当多重PCR体系中Ca MV35S启动子、Fa MV35S启动子、NOS终止子、bar基因、NPTII基因、CP4-EPSPS基因的检测引物浓度分别为0.2、0.2、0.3、0.3、0.2、0.2μmol/L,退火温度为60℃时扩增效果最佳,利用优化后的六重PCR方法可从转基因玉米、大豆、棉花、油菜等各类样品中精准检测出相应的转基因成分,方法的检测灵敏度可达到0.1%。该方法为食品中常见转基因成分的筛查提供了一种高效的手段,在转基因产品的检测工作中具有较高的应用价值。

新疆大豆疫霉菌毒力及大豆品种抗病性

对34株大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)新疆分离物进行了毒力鉴定,发现新疆疫区大豆疫霉菌毒力结构复杂,不同地块之间、同一地块不同大豆疫霉菌分离物间都存在毒力差异。用7个不同毒力的分离物接种鉴定了19个新疆地区栽培大豆品种(系)的抗病性,其中10个品种(系)表现较好的抗性。

填精健脾逐水法联合足量激素治疗原发性肾病综合征临床疗效观察

目的:观察填精健脾逐水法联合足量激素治疗原发性肾病综合征的临床疗效。方法:将62例患者随机分为两组,每组31例。对照组使用足量激素治疗,观察组使用填精健脾逐水法联合足量激素治疗,两组均连续治疗3个月。对比两组临床治疗效果及肾功能。结果:临床疗效观察组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组血浆白蛋白、胆固醇、血脂水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,皆有所改善(P<0.05),且观察组明显优于对照组(P<0.05)。观察组副作用发生率低于对照组(P<0.05)。观察组肾功能明显优于对照组(P<0.05)。结论:采用填精健脾逐水法联合足量激素治疗原发性肾病综合征,临床疗效显著,不良反应少。

椎间植骨并椎弓根螺钉固定治疗腰椎滑脱症(附39例报告)

采用椎间植骨并椎弓根螺钉固定治疗腰椎滑脱症39例。术后随访8-24个月,优30例,良4例,可5例,优良率87%。35例达到骨性融合,平均融合时间4个月。认为椎弓根螺钉复位固定加椎间植骨融合术是治疗腰椎滑脱症的有效方法。

椎弓根螺钉内固定并后路减压椎间植骨治疗腰椎滑脱症

目的观察椎弓根螺钉复位固定并椎间植骨融合术治疗腰椎滑脱症的临床效果。方法采用椎弓根螺钉对腰椎滑脱提拉复位及固定，椎间植骨融合治疗腰椎滑脱症39例。其中退变型21例，峡部断裂型18例。L4滑脱30例，L5滑脱9例。结果术后随访8～24个月，根据Nakana标准，优30例，良4例，可5例，优良率为87．2％。35例达到骨性融合，总体融合率为89．7％，平均融合时间为4个月（3～6个月）。结论椎弓根螺钉复位固定加椎间植骨融合术是治疗腰椎滑脱症的一种有效方法。

临床应用人工颈椎间盘治疗颈椎间盘退行性变

目的：初步评价人工颈椎间盘置换用于治疗颈椎间盘退行性变疾病的早期临床效果。方法：自2004年8月起，对9例单节或多节颈椎间盘病变为主的退行性变患者进行人工颈椎间盘置换术，术后随访6个月～14个月。术后首先对神经系统功能恢复情况进行评价，其次随访中对患者颈椎的生理弯曲、人工颈椎关节的活动度以及人工颈椎间盘与椎间隙终板界面间的稳定性进行评价，了解治疗效果。结果：所有患者术前神经系统症状均获得满意改善。术后影像学随访与术前比较生理弯曲排列满意，原有病变形成的后凸生理弯曲消失，均获得满意纠正，人工间盘与上下终板间紧密贴合，无透光区、无位移，随访中无失稳及脱位发生。结论：颈椎人工椎间盘手术操作简单，出血量少，神经系统功能恢复良好，在减压的同时重建了满意的椎间隙高度及生理弯曲，并且更重要的是恢复了椎间关节的活动度。

TLIF并椎弓根螺钉内固定治疗椎间盘源性腰痛(附19例报告)

采用经椎间孔椎间融合并椎弓根螺钉内固定治疗椎间盘源性腰痛19例。术后疼痛改善率平均72%,椎骨放射学融合18例,术后无1例出现神经根症状及马尾神经受损表现。认为经椎间孔椎间融合并椎弓根螺钉内固定是治疗椎间盘源性腰痛安全、有效的方法。

肩锁关节脱位及锁骨外端骨折66例治疗体会

[目的]探讨锁骨钩钢板在骨科创伤中应用的方法及治疗体会。[方法]应用锁骨钩钢板急诊或择期治疗肩锁关节脱位及锁骨外端骨折66例。[结果]63例患者得到随访，随访时间6—36个月，平均10个月。骨折全部愈合，肩锁关节无再脱位。[结论]锁骨钩钢板治疗锁骨外端骨折和肩锁关节脱位具有固定牢靠，不损伤关节面、关节功能恢复快等优点。

浮膝骨折治疗中运用伤害控制学原则的临床体会

目的总结浮膝骨折治疗中运用伤害控制学原则的体会。方法回顾性分析2003年6月-2005年6月因浮膝骨折住院治疗的22例患者的临床资料。运用伤害控制学原则全面评价其外伤程度，对病情稳定患者行急诊手术，对临界和危重患者先行临时固定，在ICU内复苏使患者的各项生理指标达到理想状态，限期在条件允许情况下行骨折内固定术并植骨。结果20例患者获得超过8个月的随访，平均随访（16±2）个月，平均愈合时间（4．0±0．5）个月，完全正常负重及行走活动时间平均（6±1）个月。膝关节功能优良率为85％。结论治疗浮膝骨折需要应用伤害控制原则，兼顾患者全面情况，同时治疗其他并存疾病。早期手术内固定有利于严重多发伤的治疗和骨与关节功能的恢复，限期手术内固定可减少切口感染、脂肪栓塞等并发症。手术固定以髓内钉为终束同京．并沣雷阜期功能锻炼。

骨外固定的主要并发症分析

目的总结外固定治疗骨科疾患的经验教训，提高该项技术治疗骨疾患的效果。方法通过对不同类型骨疾患应用骨外固定治疗发生的79例并发症进行分析，找出其发生的原因。结果骨外固定并发症发生的原因主要与用外固定器方法不当，适应症的选择有关。结论严格掌握使用骨外固定的适应症，熟练的技术操作等可提高治疗效果。