甲醛对豚鼠肺巨噬细胞DNA的损伤作用

为探讨甲醛对呼吸道的遗传性损伤和致肺癌机理，本研究以豚鼠的肺巨噬细胞为研究材料，采用碱洗脱膜过滤荧光分析方法，检测了甲醛对ＤＮＡ的损伤作用。结果表明，甲醛的急性细胞毒性较小，但能引起豚鼠肺巨噬细胞ＤＮＡ－蛋白质交链和ＤＮＡ单链断裂，并且交链和断裂的程度与甲醛浓度呈线性关系。说明甲醛对呼吸系统深部的细胞具有遗传性损伤，并进一步证实了甲醛具有遗传毒性。

创业心理品质开发的理论资源与实践模式

文章运用创业动机理论、创业认知理论、心理资本理论等,解释创业现象与创业过程,提炼出创业心理品质构成的核心要素,构建了基于创业过程的创业心理品质开发因子模型,在此基础上探讨了高校创业心理品质开发的实践模式。

缺氧、复氧条件下低氧反应元件(HRE)对心肌细胞转染hVEGF_(165)基因表达的调控作用

目的:探讨缺氧、复氧条件下,低氧反应元件(HRE)作为氧条件基因表达控制开关,对心肌细胞转染rAAV-HRE9-hVEGF165基因表达的调控作用。方法:分离新生SD大鼠心肌细胞,采用无血清培养,将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。实验共分为8组:Ⅰ组(空白对照组):常氧培养24h(氧浓度21%);Ⅱ组(缺氧对照组):常氧培养16h,缺氧8h(氧浓度1%);Ⅲ组(转基因对照组):常氧培养24h;Ⅳ组(转基因缺氧1组):转基因后缺氧8h;Ⅴ组(复氧1组):常氧培养16h,缺氧8h、复氧4h;Ⅵ组(复氧2组):常氧培养16h,缺氧8h、复氧8h;Ⅶ组(复氧3组):常氧培养16h,缺氧8h、复氧12h;Ⅷ组(转基因缺氧2组):转基因后常氧培养16h,缺氧20h。ELISA法测定培养液VEGF蛋白含量;细胞免疫荧光染色及RT-PCR分别检测细胞内VEGF蛋白及VEGF165mRNA的表达。结果:95%的培养心肌细胞可见自律搏动,cTn-I染色阳性率为86%;病毒转染率约为87%。Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ组培养液中VEGF蛋白含量显著高于其它各组(P<0·01),细胞免疫荧光VEGF蛋白染色呈阳性;RT-PCR测定显示,Ⅳ、Ⅴ及Ⅷ组可见484bp目的条带。结论:rAAV-HRE9-hVEGF165可成功地转染原代培养心肌细胞,在缺氧环境下,受HRE的调控,VEGF165mRNA及VEGF165蛋白可有效表达,而在常氧状态下,目的基因的表达及蛋白合成即行中止。

内皮素-1促进兔骨髓间质干细胞诱导分化为心肌样细胞

目的研究ET-1对兔骨髓间质干细胞(BMSCs)定向心肌样细胞分化的影响。方法取成年兔股骨干BMSCs培养。实验分为6组Ⅰ组,未诱导组;Ⅱ组,单纯ET-1组(30nmol/L);Ⅲ组,5-aza诱导组(10μmol/L);Ⅳ组,5-aza+ET-1联合诱导组。5-aza诱导3周后,加入ET-1。其中又分为Ⅳ1组、Ⅳ2组、Ⅳ3组,分别为加入10、30和50nmol/LET-1。诱导培养4周后,测定心肌样细胞转化率和细胞直径、cTroponin-I免疫组化染色、Western-blot方法,测定GATA-4蛋白表达及蛋白磷酸化水平、RT-PCR方法测定β-MHC的表达、透射电镜观察心肌样细胞超微结构特征。结果Ⅳ2组心肌样细胞直径显著增大(P<001vsⅢ组),Ⅲ、Ⅳ2组心肌样细胞转化率无显著差异(P>005)。Ⅲ、Ⅳ2组cTroponin-I染色阳性细胞数显著增多,β-MHC表达显著增高(P<001vsⅠ组),GATA-4蛋白表达及磷酸化水平均亦显著增高(P<005vsgroupⅠ、Ⅱ)。ET-1浓度为30nmol/L时,GATA-4蛋白磷酸化程度最高(P<005)。超微结构显示,Ⅲ、Ⅳ组分化的心肌样细胞可见原始肌节形成,其中,Ⅳ2组更为明显。结论5-aza及5-aza联合ET-1所诱导BMSCs分化的心肌样细胞,具有心肌细胞的生物学特征;单独采用ET-1,不能诱导BMSCs向心肌样细胞分化;ET-1在诱导BMSCs分化中,可提高GATA-4蛋白磷酸化水平,发挥促进心肌样细胞成熟的生物?

介绍一种改良的检测终细胞DNA损伤的方法

介绍一种改良的检测终细胞ＤＮＡ损伤的方法董红燕，刘君卓，陈冠英研究化学物质对离体细胞ＤＮＡ的损伤，一般都需要经过细胞培养，使细胞进入分裂周期，再进行正式实验。碱洗脱荧光分析法自发明以来，不但已广泛应用于可分裂细胞ＤＮＡ损伤的检测，而且已有人用此方法对...

大学生创业心理品质探究

大学生创业已经成为社会共同关注的话题,大学生要在创业过程中实现自己的人生价值,离不开良好的自身综合素质,而创业的心理品质显然是影响大学生的创业能力和创业成败最重要素质之一,对此,需要我们给与更多的关注和思考。本文对目前大学生创业心理品质的主要特征进行分析,强调良好的心理要素对成功创业的作用,探索大学生良好的创业心理品质培养的有效途径。

内皮素-1在兔骨髓间质干细胞体外诱导为心肌样细胞中的作用

目的 探讨外源性内皮素 - 1(ET - 1)在 5 -氮胞苷 (5 -aza)诱导兔骨髓间质干细胞 (BMSCs)向心肌样细胞转化过程中的生物学作用。方法 获取日本大耳白兔股骨干BMSCs进行培养及传代。实验分组 :①对照组 ;②ET - 1组 (ET - 1,30nmol/L) ;③ 5 -aza诱导组 (5 -aza ,10 μmol/L) ;④ 5 -aza +ET - 1联合诱导组 (5 -aza 10μmol/L +ET - 130nmol/L)。诱导期间 ,观察BMSCs生长状态 ,诱导 4周后 ,计算心肌样细胞转化率 ;心肌特异性肌钙蛋白 -Ⅰ免疫细胞化学染色 ,测定心肌样细胞直径 ;透射电镜观察心肌样细胞形态学特征。结果 5 -aza +ET - 1联合诱导组分化细胞的体积明显增大 ,细胞直径显著大于 5 -aza诱导组 (P <0 .0 0 1) ,诱导 4周后 ,心肌样细胞出现自发收缩 ,肌钙蛋白 -Ⅰ免疫细胞化学染色阳性 ,对照组及ET - 1组极少见染色阳性细胞。 5 -aza诱导组与 5 -aza +ET - 1联合诱导组的心肌样细胞转化率无显著差别 (P >0 .0 5 )。超微结构观察显示 ,5 -aza +ET -1联合诱导组心肌样细胞原始肌节形成明显增多。结论 在诱导兔BMSCs向心肌样细胞分化的过程中 ,ET - 1发挥了促心肌样细胞肥大及成熟的生物学效应。

低氧反应元件调控缺血心肌转染hVEGF_(165)基因表达对新生血管的影响

目的探讨动物整体水平下低氧反应元件（HRE）调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对促生血管的影响。方法建立兔心肌缺血动物模型,实验分为转基因组、缺血对照组、载体对照组和假手术组。取缺血区心肌组织,检测心肌组织HIF-1α和hVEGF165表达,应用CD31及α-SMA免疫组化染色测定缺血心肌新生血管密度变化。结果心肌缺血早期,伴随内源性HIF-1α表达增加,hVEGF165mRNA及蛋白表达相继升高,缺血4～6周至高峰（P〈0.01）,缺血12周,hVEGF165表达下调至缺血前水平。缺血12周,转基因组CD31（＋）血管密度显著高于缺血对照组（P〈0.01）;但是,与缺血前相比,缺血12周,转基因组α-SMA（＋）血管密度显著低于缺血前水平（P〈0.01）。结论HIF-1α-HRE对缺血心肌转染hVEGF165表达发挥了有效的正相调控作用,有效地促进缺血心肌毛细血管生成。但hVEGF165作为促血管生成早期调节因子,其促生血管的结构尚不完整。

改良方法处理的生物瓣膜组织宿主内皮化的实验研究

目的 探讨L -谷氨酸 (L -G)改良方法处理的异种生物瓣膜组织宿主内皮化的可行性。方法 将戊二醛或戊二醛和L -谷氨酸处理的 2组牛心包进行体外内皮细胞种植培养 ,并同时将此 2组牛心包植入猪的右心房 ,观察心包片宿主内皮细胞生长的形态学特征。结果 组织学及扫描电镜分析显示 ,改良L -谷氨酸组牛心包体外内皮细胞种植培养及动物心脏内移植后 ,心包组织无钙化 ,心包表面内皮细胞生长良好 ,而戊二醛组牛心包钙化及胶原纤维断裂明显 ,未见内皮细胞生长。结论 采用改良L -谷氨酸处理方法可有效地抑制常规戊二醛处理生物瓣膜组织所残留的细胞毒性 ,有助于宿主内皮细胞在生物瓣膜上的生长 ,优化生物瓣膜的生化处理 ,减少生物瓣膜的钙化。

新生儿溶血症心肌细胞超微结构特征及线粒体内元素分析

应用电镜及电镜X射线显微分析技术,对一例新生儿溶血症心肌细胞进行了超微结构形态观察并对其线粒体作了元素分析。结果表明,该例心肌细胞病理形态改变明显。线粒体内可见绒球样电子致密体,X射线元素分析证明,该结构中含有大量的氯,而仅含极少量的钙。作者对该异常结构的形成机理及氯沉积的原因进行了讨论。

高校廉政文化建设和廉洁教育的聚合效应与同构路径——以生态管理理论为视角

高校廉政文化建设与廉洁教育在源头预防腐败发生、推动高校德育体系创新、实现高校人才培养三个方面具有目标认同性。在生态管理理论视阈下,把廉洁教育置于廉政文化生态系统之中,通过耦合同构发生聚合,发挥层次效应、内化效应、传播效应,以识别、规划、实施、评价构建联动的运行机制,达到知、情、意、行一体化,形成立体化、多层次的高校廉政文化建设与廉洁教育体系,确保二者均取得实效。

晶体停搏液中Ca^(2+)浓度对未成熟心肌细胞超微结构的影响

目的采用离体心脏灌注模型探讨了不同Ｃａ２＋浓度的Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ停搏液对未成熟心肌细胞超微结构的影响。方法采用日本长耳幼兔，根据停搏液中Ｃａ２＋浓度的不同，实验分为４组：无Ｃａ２＋组，［Ｃａ２＋］０ｍｍｏｌ／Ｌ；低Ｃａ２＋组，［Ｃａ２＋］０．６ｍｍｏｌ／Ｌ；中Ｃａ２＋组，［Ｃａ２＋］１．２ｍｍｏｌ／Ｌ；高Ｃａ２＋组，［Ｃａ２＋］２．４ｍｍｏｌ／Ｌ．；另设对照组。离体灌注心脏经２０℃、９０ｍｉｎ缺血后，３７℃再灌注３０ｍｉｎ。结果各实验组心肌细胞超微结构呈现为轻度可逆性损伤。高Ｃａ２＋组细胞内糖元颗粒极少见，肌原纤维张力较高，线粒体损伤较其他组显著。结论高Ｃａ２＋浓度的Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ停搏液对未成熟心肌不能提供满意的心肌保护作用。

异种生物瓣膜组织宿主内皮细胞生长形态特征观察

目的 观察血流切应力对植入的异种生物瓣膜组织宿主内皮细胞的生长形态和排列的影响。方法 将戊二醛和L -谷氨酸 (L -G)处理的牛心包片进行体外内皮细胞种植培养 ,并同时将同样处理的牛心包片置入猪的右心房近三尖瓣处 ,扫描电子电镜观察心包片宿主内皮细胞生长的形态学特征。结果 牛心包片体外内皮细胞种植培养及猪右心房三尖瓣处移植后 ,心包片表面内皮细胞生长良好。体内移植牛心包片内皮细胞从缝合端向游离端生长 15天的过程中 ,细胞形态和排列随着血流机械应力的影响 ,细胞从近似圆形铺路石状逐渐向长梭形变化。缝合端内皮细胞呈一致的长梭形 ,内皮细胞生长区中部细胞呈梭形、卵圆形、圆形混杂 ,内皮细胞生长端细胞呈铺路石状 ,与培养板孔中培养的心包片表面连续单层内皮细胞 (来源于人脐静脉内皮细胞 )形态一致。结论 在在体状态下 ,处于三尖瓣处的异种生物瓣膜上的内皮细胞经血流作用 ,变形为长梭形 ,排列方向趋向于血流切应力作用的方向 。

张謇实业教育理念与创业教育本质内涵的价值契合

张謇倡导的"父教育,母实业"、"实业教育,富强之大本也"等教育与实业迭相为用的诸多实践,蕴含着丰富的创业教育理念,对于解决当今中国创业教育领域的一些问题仍具有重要的现实启示和研究价值。探讨张謇优秀实业家和教育家特质,分析张謇实业与教育思想的历史文化渊源及思想蕴涵,发现张謇实业与教育观在一定程度和范围上与创业教育育人兴国的本质具有高度契合性。他在文化价值认知和社会环境因素的影响下,通过教育和实践的有机结合来培养"创造性"和"创造力"以及兼济天下的社会责任感,实现"学必期于用,用必适于地"创业教育的现实要求,并将创业教育作为一项系统过程,促进个体自我全面发展的基础上实现自我价值。

5-氮胞苷与内皮素-1联合诱导大鼠骨髓间质干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

目的 将单纯 5 -氮胞苷 (5 -aza)诱导、5 -aza与内皮素 - 1(ET - 1)联合诱导的骨髓间质干细胞 (BM SCs)所分化的心肌样细胞移植于大鼠心肌梗死区 ,探讨其对缺血心肌的病理学及功能的影响。方法 SD大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 :组Ⅰ为对照组 ,组Ⅱ为单纯 5 -aza诱导组 (5 μmol/L) ,组Ⅲ为 5 -aza及ET - 1联合诱导组 (5 -aza 5 μmol/L +ET - 110 -10 mol/L)。组Ⅱ、组Ⅲ动物取胫骨BMSCs进行培养 ,体外诱导后行自体细胞移植。采用冷冻法建立心肌梗死模型 ,采用直接注射法将标记BrdU的待移植BMSCs移植入心肌梗死区 ,对照组注射等量无血清培养基。移植 4周后 ,测定左室血流动力学改变 ,大鼠梗死区免疫组化染色观察移植细胞存活、分化和新生血管形成特征。结果 BMSCs移植 4周后 ,梗死区内可见部分心肌样移植细胞 ,其中 ,组Ⅱ移植细胞胞质内TroponinⅠ染色较浅 ,而组Ⅲ移植细胞胞质内TroponinⅠ染色较深。血流动力学测定结果显示 ,组Ⅱ、组Ⅲ左心室舒张末压 (LVEDP)均显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;左心室压力变化速率 (+dp/dtmax、-dp/dtmax)则明显高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。与组Ⅱ相比 ,组Ⅲ +dp/dtmax显著增高 (P <0 .0 5 )。形态学观察显示 ,移植实验组梗死区内新生血管增多。组Ⅱ、组Ⅲ微血?

缺血预处理及复合浅低温晶体停搏液保护下未成熟心肌细胞内Ca^(2+)的分布

目的 观察缺血预处理 (IP)复合 32℃浅低温及晶体停搏液保护对缺血再灌注损伤未成熟心肌细胞内Ca2 + 分布的影响。方法 应用Langendorff离体心脏灌注模型 ,IP采用 2次 5min缺血、5min再灌注 ,实验分为IP+32℃浅低温组和单纯 32℃浅低温组。心脏灌注St.ThomasⅡ停搏液 ,缺血 30min ,37℃再灌注 30min。进行血流动力学测定、焦锑酸钾沉淀Ca2 + 染色及心肌细胞体积密度 (Vvi)测定。结果 再灌注 30min ,IP组左心室发展压 (LVDP)、左心室压力最大上升及下降速率 (+dp dtmax、-dp dtmax)恢复率明显高于单纯 32℃浅低温组 (P <0 .0 5 ) ,IP组受损严重心肌细胞Vvi显著小于对照组 (P <0 .0 5 )再灌注后 ,细胞核Ca2 + 沉积随细胞损伤程度加重而增加 ,其中 32℃浅低温组细胞核Ca2 + 沉积较为明显。结论 缺血再灌注期间 ,未成熟心肌细胞内Ca2 + 分布异常与超微结构的改变有密切关系。IP

氧自由基在缺血预处理对未成熟心肌延迟性保护机制中的作用

目的 探讨氧自由基 (OFRs)在缺血预处理 (IP)对未成熟心肌延迟性保护 (第二窗 )机制中的作用。方法 3～ 4周龄的幼兔 30只 ,随机分为 5组 (n =6 ) :Ⅰ组 ,正常对照组 ;Ⅱ组 ,缺血 再灌注损伤组 ;Ⅲ组 ,单纯IP组 ;Ⅳ组 ,IP +L -精氨酸 (L -arginine ,30 0mg kg)组 ;Ⅴ组 ,IP +L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME ,10mg kg)组。建立幼兔活体心脏缺血预处理及缺血 再灌注损伤模型 ,监测左心室血流动力学变化 ,化学比色法检测心肌一氧化氮合酶 (NOS) (iNOS eNOS)活性 ,同时测定SOD活性及MDA含量。结果 缺血预处理 2 4h后 ,各组间的LVDP、±dp dtmax无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;缺血 再灌注 6 0min ,Ⅱ组和Ⅳ组的LVDP、+dp dtmax、-dp dtmax恢复率低于Ⅲ组和Ⅴ组 (P <0 .0 1)。缺血前 ,Ⅲ组和Ⅴ组的iNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 ) ;再灌注 6 0min ,Ⅲ组和Ⅴ组的eNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。缺血前和再灌注末 ,Ⅲ组和Ⅴ组的SOD活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。结论 OFRs对IP延迟性心肌保护起到了“触发物”的作用 ,而iNOS的升高可能仅是炎性反应标记物 ,eNOS活性的升高可能是形成第二保护窗 (SWOP)的原因之一 ,外源性NO取消了SWOP的形成 ,可能与其清除了OFRs有关。

甲醛和苯并(a)芘联合作用对DNA损伤的体外研究

以豚鼠肺巨噬细胞为研究对象，研究了甲醛和苯并（ａ）芘（ＢａＰ）在ＬＤ５０、ＤＮＡ－蛋白质交链（ＤＰＣ）、ＤＮＡ单链断裂（ＳＳＢ）等３项指标上的联合作用。结果表明，甲醛和苯并（ａ）芘对豚鼠肺巨噬细胞的ＬＤ５０分别为２４０．４ｍｇ／Ｌ和１３．８ｍｇ／Ｌ，联合使用的ＬＤ５０为６１．７ｍｇ／Ｌ（其中甲醛为５５．８ｍｇ／Ｌ，ＢａＰ为５．８８ｍｇ／Ｌ），呈增强作用。甲醛能引起ＤＰＣ，ＢａＰ不能引起ＤＰＣ，联合作用时甲醛引起的交链程度降低；甲醛和ＢａＰ都能引起ＳＳＢ，联合作用时ＳＳＢ的程度增强。由此可见，甲醛和ＢａＰ对细胞杀伤和ＳＳＢ具有增毒作用。

一种胶体金标记超薄切片电子染色失败的补救方法

介绍一种胶体金标记超薄切片电子染色失败的补救方法。此方法操作简单,效果可靠,无需特殊技术和试剂,也可用于一般超薄切片的制样中。

创造性人格理论在创业教育中的应用

创造性人格是创造主体顺利进行创造活动的内在动力要素和动机发生的基础,对创业心理品质培养具有重要的理论支撑和实践参考价值。文章基于创造力研究的视角,以创造性人格为切入点和研究对象,分析创造性人格与优秀创业心理品质特征的关联性,并就创业教育中如何培育创造性人格作多层面的策略探讨。