一种快速测定发酵液中丙酮酸含量的简易方法

建立快速测定发酵液中丙酮酸含量的方法。利用酶固定化技术,将丙酮酸氧化酶(POD)及其辅酶(FAD)固定于核微孔膜,制备丙酮酸酶膜,并组装成丙酮酸酶电极,分析丙酮酸的含量。pH 7. 4,反应温度32℃,测定时间30 s。在酶电极最佳条件下,丙酮酸质量浓度在5～1200 mg/L范围内线性关系良好,检测限为3 mg/L;方法加标回收率为97. 1%～101. 8%,RSD为0. 68%。除高浓度NH+4外,不受丙酮酸发酵液中其他物质干扰物影响。丙酮酸发酵的实际应用中与HPLC法比较,测定结果无明显差异(P> 0. 05)。方法适用于实际发酵生产中丙酮酸含量的实时测定。