1株与鲍氏志贺菌1～6型交叉凝集的阴沟肠杆菌分析

1临床资料与方法 1．1背景资料①临床资料：腹泻患儿，男，出生9日，无发热、呕吐、腹泻，大便黄绿色、稀黏、量少，次数多，日排便5～10次；诊断：菌痢？坏死性结肠炎。

幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagX基因的克隆及生物信息学特征预测

目的：构建表达幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，H.pylori）NCTC11637IV型分泌系统cagX（HP0528）全长编码基因的原核表达载体。方法：用PCR方法从H．pylori基因组DNA中扩增cagX编码基因片段，将cagX克隆至pGEM-T载体，转化大肠杆菌DH5ct，再将其定向插入pET32a（＋）载体中，经IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果，并进行序列测定和生物信息学预测。结果：克隆幽门螺杆菌NCTC11637cagX基因全长1569bp（基因库登录号为EF608160），编码522个氨基酸，融合蛋白的相对分子质量约为80．5kD。与基因库公布的其他H．pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为96％～99％。预测结果显示H．pylori 11637，26695，J99间二级结构有一定差异，但抗原性相同。结论：成功克隆并表达了H．pyloriNCTC 11637 cagX基因，并对其生物学特征进行了预测，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

泰州地区结核分枝杆菌一线抗结核药耐药基因检测结果分析

目的探讨泰州地区结核分枝杆菌耐药基因突变特点。方法选取涂阳结核病人痰标本121份,进行结核分枝杆菌耐药基因检测。结果 121例临床痰标本,共检出结核分支杆菌78例,检出阳性率为64.5%。共检出28例存在耐药基因位点突变,总耐药率为35.9%。其中单耐药9例;多耐药7例;耐多药12例。耐药基因突变位点以embB基因306位点、inhA基因-15位点、katG基因315位点、rpsL基因43位点突变最为常见。结论泰州地区耐药结核分枝杆菌的基因突变有其自身特点。

血清和胸水中MCP-1、MSP、LEP在肺癌及肺结核鉴别中的应用价值

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)、血清瘦素(LEP)在鉴别肺癌及肺结核中的价值及意义。方法 2015年1—12月江苏省泰州市人民医院感染科选取经痰涂片确诊为肺结核患者50例(肺结核组)及经病理组织学确诊为肺癌患者50例(肺癌组),另选取同期健康体检者45例为健康对照组。应用ELISA法测定血清及胸水中MCP-1、MSP、LEP水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)确定MCP-1、MSP、LEP在肺癌及肺结核鉴别中的应用价值。结果与健康对照组比较,肺结核组、肺癌组血清中MCP-1、MSP、LEP均升高(P<0.05);与肺结核组比较,肺癌组血清LEP升高、MCP-1降低(P<0.05),而MSP无显著变化(P>0.05)。肺癌组胸水MSP、LEP高于肺结核组(P<0.05),而MCP-1低于肺结核组(P<0.05)。经ROC分析显示,诊断肺癌时,胸水中MSP在470 pg/ml时灵敏度最高(91.1%),MSP在1 200pg/ml时,特异度最高(94.2%);诊断肺结核时,胸水中MCP-1在500 Pg/ml时灵敏度最高(94.5%),MCP-1在1 100 pg/ml时,特异度最高(93.2%)。结论血清及胸水中MCP-1、MSP、LEP联合检测能有效鉴别肺结核与肺癌,灵敏度高,值得临床应用推广。

WBC，CRP和ESR联合检测在肺炎支原体肺炎中的意义

目的：探讨白细胞（WBC）计数、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）与肺炎支原体（MP）肺炎的关系，为激素的使用提供实验室依据。方法回顾性分析2008年1月-2012年12月住院确诊的 MP肺炎患儿的 WBC计数、CRP及 ESR检测结果。结果 MP肺炎发生肺外并发症或胸部 X线片表现为大片状致密阴影以及使用糖皮质激素者，WBC，CRP，ESR升高较无肺外并发症、胸部 X线片表现为斑片状或云絮状阴影以及未使用糖皮质激素者明显（P＜0.05）。结论当 MP肺炎患儿 WBC，CRP和 ESR明显升高时，在排除细菌感染后，可以及早使用糖皮质激素治疗。

幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagT基因的克隆表达及其重组蛋白对SGC-7901细胞增殖和分泌细胞因子功能的影响

【目的】初步研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）NCTC 11637 cagT（HP0532）基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8（IL-8）分泌的影响。【方法】应用PCR技术从H．pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段，将其定向插入pQE30载体中，双酶切鉴定筛选阳性克隆。测序分析确认后，IPTG诱导表达，表达蛋白以Ni^2＋-NTA柱进行纯化，并经Western blot鉴定，纯化的蛋白作用于SGC-7901细胞，提取细胞总RNA，RT-PCR扩增IL-8，并用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响。【结果】成功克隆了cagT基因，全长843bp（GenBank登录号为EF114758），编码280个氨基酸，与GenBank公布的其他H．pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97％-99％。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带，相对分子质量约为32kDa，经Ni^2＋-NTA柱纯化后可获得纯度为98％重组蛋白。经透析复性后的蛋白（终浓度10μg／mL）作用于SGC-7901细胞后，可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达。不同浓度CagT蛋白与SGC-7901细胞作用，细胞增殖的程度随着蛋白浓度的增加逐渐降低，细胞的增殖受到抑制。【结论】CagT蛋白可刺激SGC-7901细胞IL-8的表达，并抑制细胞增殖，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

90例小儿败血症细菌培养与药敏结果分析

目的 探讨小儿败血症病原菌的构成及药物敏感性.方法 回顾性分析2007年2月～2012年2月收治的90例小儿败血症的病原学及抗生素敏感试验结果.按照〈全国临床检验操作规程〉进行细菌培养、分离及鉴定.使用VITEK-32全自动细菌鉴定及药敏分析仪进行药敏测定,手工药敏试验采用世界卫生组织推荐的纸片扩散（K-B）法进行.结果 小儿败血症致病菌中,革兰阳性菌有58株（占64.4%）,其中以表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为主;革兰阴性菌共32株（占35.6%）,其中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主.表皮葡萄球菌对青霉素G的耐药率高达100.0%.肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁100%敏感,对红霉素和阿奇霉素的耐药率分别为84.2%和73.7%.金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁高度敏感（敏感率87.5%～100%）,对青霉素G、第一代头孢几乎全部耐药.大肠埃希菌对氨苄西林部分敏感,对头孢菌素类抗生素具有较高的敏感性.肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率已达88.9%,对广谱头孢菌素头孢吡肟耐药率已达44.4%.结论 小儿败血症病原菌以革兰阳性菌为主,表皮葡萄球菌是重要病原菌.临床医生应主要留取病原学标本,结合抗菌药物敏感试验结果合理使用抗生素,以减少耐菌株的产生.

幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统HP0527-C基因的克隆表达及其生物学功能的初步研究

为克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 hp0527-c基因,探讨其生物学功能。设计引物扩增,T-A克隆,测序正确后构建表达载体pET-28a-hp0527-c,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后以Ni2+-NTA柱获得纯度为98%重组蛋白。经Western blot鉴定正确后,免疫新西兰大白兔获得了较高滴度的多克隆抗体;将重组蛋白作用于BGC-823细胞,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达增高;同时用MTT法来检测重组蛋白对细胞增殖的影响,结果表明其活性呈现一定量的时间和剂量依赖性。已成功克隆了HP0527-C的重组蛋白,初步探讨了其与细胞之间的相互作用,为进一步阐明H.pylori致病机制奠定了基础。

幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表达、纯化及初步鉴定

[目的]构建幽门螺杆菌(H.pylori)NCTC11637菌株36kDa(OMP36)外膜蛋白基因原核表达系统,探索研制H.pylori疫苗的新途径。[方法]培养和收集H.pylori NCTC11637菌株,提取基因组DNA,PCR扩增目的基因片断。将其克隆到T载体并测序,再将目的基因克隆入PET32a(+),构建重组表达载体PET32a-OMP36。转化E.coliBL21后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白。[结果]测序分析表明,插入的基因片断为987bp,表达的蛋白的相对分子质量(M r)约为36kDa,并显示具有良好的抗原性。SDS-PAGE检测表明,表达量占细菌总蛋白的37%,镍亲和层析纯化率约92%。Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性。[结论]成功克隆了外膜蛋白OMP 36kDa的编码基因,其表达产物OMP36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H.py-lori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础。

荧光定量PCR熔解曲线法检测真菌核酸的临床应用价值评估

目的评估荧光定量PCR熔解曲线法检测真菌核酸的准确性及临床应用价值。方法纳入460例疑似或确诊为呼吸道真菌感染患者为研究对象,以荧光定量PCR熔解曲线法作为考核方法,以真菌26S rRNA基因核酸测定试剂盒联合Sanger测序法作为参考方法,采集各研究对象痰液样本并同步使用考核方法、参考方法检测,计算两种方法的Kappa值以评价结果的一致性。结果以参考方法为对照,考核方法检测结果总符合率为92.83%(427/460);此外,与参考方法相比,考核方法检测8种真菌(白念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、新生隐球菌、季也蒙念珠菌、曲霉菌)的阳性符合率、阴性符合率、总符合率分别为97.34%(183/188)、97.06%(264/272)、97.17%(447/460);100.00%(33/33)、99.77%(426/427)、99.78%(459/460);100.00%(16/16)、99.55%(442/444)、99.57%(458/460);98.11%(52/53)、99.75%(442/444)、99.57%(458/460);95.08%(58/61)、99.50%(397/399)、98.91%(455/460);100.00%(9/9)、99.56%(449/451)、99.57%(458/460);85.00%(17/20)、99.32%(437/440)、98.70%(454/460);97.59%(81/83)、97.88%(369/377)、97.83%(450/460);两种方法检测结果一致性评价的Kappa值均大于0.8。对两种方法不一致结果进行复核检测,结果发现有53.7%(22/41)的检测结果与考核方法一致,有46.3%(19/41)的检测结果与参考方法一致。结论使用荧光定量PCR熔解曲线法能同时检测8种真菌,且检测结果与参考方法高度一致,在真菌检测中具有独特优势,且有重要的临床应用价值。

基于大规模人群新型冠状病毒核酸检测的经验介绍

根据国家新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情防治工作需要,为全力支援新疆新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测工作,2020年7月17日江苏省紧急组建了第一批省核酸检测医疗队驰援新疆。该文总结第一批核酸检测队在新疆2019-nCoV核酸检测工作的经验,为未来可能出现的COVID-19或其他突发公共卫生事件的大规模人群筛查工作提供参考。

磁共振弥散加权成像技术在直肠癌诊断及分期中的应用

目的探讨磁共振弥散加权序列(DWI)成像在直肠癌诊断及分期的价值,以指导直肠癌的个体化治疗。材料与方法采用1.5T用单次激发自旋回波-平面回波技术(SE-EPI),b值的选择为500、800、1000s/mm^2,判断直肠癌的分期及浸润情况,并将影像诊断结果与术后病理结果对照。结果在DWI序列上,肿瘤及淋巴结均表现为高信号,随着b值升高对肿瘤组织的显示越明显,而肿瘤与周围正常肠周脂肪、肌肉及水的对比更清晰。结论 DWI序列可以较准确地对直肠癌进行术前诊断,协助TN分期的判断,并能有效评估直肠壁周围的侵犯程度、环周切缘是否受侵和邻近器官的侵犯情况。

CT联合MRI在成人早期非创伤性股骨头坏死中的诊断价值分析

探讨分析CT联合MRI在成人早期非创伤性股骨头坏死中的诊断价值。方法 此次研究对象,选择院内收治疑似成人早期非创伤性股骨头坏死患者,共计60例,2021年1月-2023年2月,患者均接受手术或活检、CT、MRI检查,并以手术病理为金标准,对CT、MRI诊断价值进行分析。结果 病理结果,60例中阳性患者53例,阴性患者7例;CT检查结果阳性患者45例,阴性患者6例;MRI检查结果阳性患者48例,阴性患者6例;CT联合MRI结果阳性患者52例,阴性患者7例;CT联合MRI诊断灵敏度98.11%(52/53)、准确率98.33%(59/60),高于CT、MRI检查灵敏度84.91%(45/53)、90.57%(48/53)、准确率85.00%(51/60)、90.00%(54/60)(P<0.05);CT联合MRI特异性100.00%(7/7),与CT、MRI检查特异性85.71%(6/7)、85.71%(6/7)对比,无统计学差异(P>0.05)。结论 对成人早期非创伤性股骨头坏死患者,采取CT联合MRI检查,所具诊断价值较高,可为后续治疗提供一定支持。

基于PACS系统的PBL及CBL联合导师制教学在医学影像科住院医师规范化培训中的应用

在医学影像科住院医师规范化培训过程中发现,传统的住院医师培训模式已经不能适应新时代的培训需要,而以PACS系统为基础的PBL和CBL教学法,通过问题导向分析影像病例,将临床与影像结合起来,借助影像思维和手段锻炼住院医师的临床实践能力,充分调动住院医师的学习积极性和主动性,是对传统培训方式的再创新,有利于教学效果和实践能力的提高,为住院医师规范化培训工作提供了新思路。全程导师制能够更好地了解每名学员的学习态度、知识掌握程度,通过典型病例的问答学习、建立师生联合学习课堂及师生双向考评系统等多种方式对学生进行动态管理及教学督导。

142例小儿脓毒症临床及病原体药物敏感试验分析

脓毒症是机体受到病原微生物感染而引发的全身性炎性反应综合征，进一步发展可导致脓毒性休克和多器官功能障碍综合征，对儿童的生命威胁较大。国外关于儿童流行病学调查资料显示，在儿童ICU脓毒症的发生率为17％。及时有效地应用抗菌药物治疗，可以明显降低严重脓毒症患儿的病死率。

热毒宁注射液佐治儿童急性化脓性扁桃体炎的疗效

目的观察热毒宁注射液佐治儿童急性化脓性扁桃体炎的临床疗效。方法选取急性化脓性扁桃体炎患儿100例,随机分为观察组和对照组,每组50例。两组均给予青霉素或阿莫西林或头孢他啶等抗感染治疗,青霉素过敏者给予阿奇霉素治疗;观察组再加用热毒宁注射液0.5ml/kg,最高剂量不超过10ml,以5%葡萄糖注射液100~250ml稀释后静脉滴注,每天1次,用5~7d。观察两组患儿临床症状、体征消失时间;治疗前及治疗后5d,采集外周静脉血4ml,检测WBC、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)。结果治疗后,观察组患儿主要临床症状、体征消失时间早于对照组(P<0.05)。治疗后5d,两组患儿血WBC、CRP、PCT均较治疗前下降(P<0.05);观察组WBC、CRP、PCT降低更明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患儿均未出现寒战、惊厥、皮疹等并发症。结论热毒宁注射液佐治儿童急性化脓性扁桃体炎临床疗效好。

幽门螺杆菌的耐药机制及基因检测研究进展

在全球范围内,幽门螺杆菌的耐药性呈上升趋势,且多重耐药严重阻碍了幽门螺杆菌感染的成功根除。了解相关药物作用机制及耐药原因,通过基因检测实现个体化分子精准诊疗,有助于提高根除效率,以及建立抗生素在全国各地的耐药数据,更好地服务于临床。本文就幽门螺杆菌感染的抗生素治疗现状、菌体及宿主因素的分子耐药机制以及耐药基因检测方法进行综述。

脑脊髓液和淤斑中同时检出脑膜炎奈瑟菌一例

患者男,11岁,无明显原因发热,体温40 ℃,伴头痛,全身皮疹,非喷射性呕吐1次,为胃内容物,量不多,于2009年4月21日拟"伤感,反应疹"收入我院.入院体检:全身可见散在出血点,压之不褪色,散在皮疹压之褪色,无水肿,咽部充血,扁桃体不大,两肺呼吸音清,未闻及干、湿性哕音,克尼格征(-),巴彬斯基征可疑(+),布鲁金斯基征(-),颈部抵抗.无麻疹、水痘、风疹和流行性腮腺炎等传染病史及接触史,2008年曾接种流脑疫苗.实验室检查:脑脊髓液无色、透明,潘氏试验弱阳性,有核细胞计数:12×106/l,以多核细胞为主,微量总蛋白:763 mg/l,葡萄糖:4.1 mmol/l,腺苷脱氨酶:0 u/l,k+:2.54 mmol/l,na+:140.3 mmol/l,cl-:126.9 mmol/l;血常规:白细胞(wbc)23.5×109/l,中性粒细胞0.939,淋巴细胞0.022,单核细胞0.031,血小板:99.0×109/l;c-反应蛋白69.7 mg/l,其余指标正常.

淋巴结血管肌瘤性错构瘤一例

患者男，63岁，因发现右侧腹股沟肿块4年余入院。4年来患者自觉肿块体积较前增大，间断I生疼痛不适，无右下肢麻木及活动异常。腹股沟超声检查提示：右侧腹股沟皮下肌肉层内见5．1cm×1．7cm×3．1cm大小的低回声肿块，境界欠清，分布不均，CDFI示内部血流，结果提示：右侧腹股沟皮下肌肉层实质性肿块。

左侧异位肾合并右侧重复肾一例报告

患者男，27岁。因体检发现下腹部包块就诊。患者一般情况良好，无特殊不适。实验室检查：血、尿常规及肝、肾功能均未见异常。磁共振检奄：左肾位于中下腹髂总动脉分叉水平（见图1），右肾皮髓分辨清晰，