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鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症的国内流行情况及防控对策 被引量:9
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作者 仇保丰 宋鸿雁 +6 位作者 董蓉莲 顾炳泉 景瑾 刘文斌 邵义祥 高逢结 李建 《中国动物检疫》 CAS 2015年第10期9-14,共6页
为了解鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症这3种新纳入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》鼠病在国内的流行情况,对这3种鼠病的文献资料进行了收集和分析。重点分析了3种鼠病在国内清洁级及以上级别的实验大、小鼠中的流行情况,同... 为了解鼠痘、小鼠肝炎和鼠仙台病毒感染症这3种新纳入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》鼠病在国内的流行情况,对这3种鼠病的文献资料进行了收集和分析。重点分析了3种鼠病在国内清洁级及以上级别的实验大、小鼠中的流行情况,同时对如何防控提出了建议和对策。这3种鼠病在国内清洁级或以上级别的实验大、小鼠中均有检出,应进一步提高实验大、小鼠屏障设施建设和管理的标准化和规范化水平,重视微生物监测的作用,有效提高实验大、小鼠的质量。 展开更多
关键词 鼠痘 小鼠肝炎 鼠仙台病毒感染症 流行情况 预防 控制
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SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间的建立及性别差异探讨 被引量:4
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作者 陈耿 张颖 +5 位作者 施伟庆 董蓉莲 鹿奎奎 徐德洲 刘协 奚清丽 《江苏预防医学》 CAS 2019年第6期614-616,621,共4页
目的建立8周龄SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间,并探讨性别因素的影响。方法在严格质量控制的条件下,选取本实验室近3年30d喂养试验终点阴性对照组SD大鼠,雌雄各160只,采用SIEMENS ADVIA 2120血液分析仪对其血液学指标进行检测,并制定... 目的建立8周龄SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间,并探讨性别因素的影响。方法在严格质量控制的条件下,选取本实验室近3年30d喂养试验终点阴性对照组SD大鼠,雌雄各160只,采用SIEMENS ADVIA 2120血液分析仪对其血液学指标进行检测,并制定95%参考区间。结果8周龄SPF级SD雌/雄大鼠血液学指标95%参考区间分别为:白细胞总数(WBC,×10^9/L):4.82~10.96/5.22~12.94;红细胞总数(RBC,×10^12/L):6.16~7.72/6.12~7.75;血红蛋白(HGB,g/L):111.40~143.46/114.00~143.00;血小板总数(PLT,×109/L):800.94~1456.33/862.21~1415.82;中性粒细胞百分比(NEUT%):4.94~24.58/6.78~24.94;淋巴细胞百分比(LYMPH%):69.83~91.48/69.59~89.73;单核细胞百分比(MONO%):0.96~4.12/1.20~4.80;嗜酸细胞百分比(EOS%):0.60~2.60/0.40~1.90;嗜碱细胞百分比(BASO%):0.10~0.30/0.10~0.30。WBC、NEUT%、MONO%雄鼠均高于雌鼠(t值分别为6.798、2.046、2.294,P值均<0.05),EOS%雄鼠低于雌鼠(t=-7.188,P<0.01),RBC、HGB、PLT、LYMPH%和BASO%雌雄之间无统计学差异(t值分别为-0.146、0.927、0.600、-1.662、0.779,P值均>0.05)。结论SD大鼠多项血液学指标存在雌雄差异,建立的95%参考区间可为保健食品毒理学安全性评价提供参考。 展开更多
关键词 SD大鼠 血液学指标 参考区间 30d喂养试验
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冷冻原肠浸泡解冻池水细菌多样性分析 被引量:2
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作者 仇保丰 宋鸿雁 +4 位作者 董蓉莲 高雪梅 蒋荧梅 顾炳泉 胡顺林 《动物医学进展》 北大核心 2017年第5期43-48,共6页
为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分... 为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分析发现,除去24.00%~32.00%为无法鉴定的未培养细菌和未分类细菌以外,其余细菌来自于芽胞杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌纲和黄杆菌纲,分别占各文库克隆总数的38.00%~42.00%、20.00%~26.00%、4.00%~8.00%和0~2.00%。除去44株无法鉴定的细菌,进一步对其他106株细菌进行分析发现,其中2株放线菌目细菌和5株肠杆菌科细菌无法进一步鉴定,其余99个菌株包含了来自19个属的至少30种细菌,且肠球菌属、变形杆菌属和芽胞杆菌属为其中的优势菌属。本研究显示冷冻原肠浸泡解冻池水中细菌多样性较高,其中部分细菌为致病菌和条件致病菌。 展开更多
关键词 冷冻原肠 解冻池 细菌多样性 16SrDNA文库
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国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析 被引量:1
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作者 仇保丰 宋鸿雁 +4 位作者 董蓉莲 蒋荧梅 高雪梅 刘文斌 胡顺林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期970-975,共6页
目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同... 目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16SrDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果 40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16SrDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。 展开更多
关键词 冷冻原肠 奇异变形杆菌 监测 分析
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SPF级实验动物房的环境系统升级改造初探 被引量:1
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作者 石根勇 王民生 +1 位作者 董蓉莲 吴亚华 《实验动物科学》 2009年第5期41-43,共3页
Objective Many SPF animal rooms were upgraded and reconstructed on the basis of the old ordinary rooms in our country,there are some deficiencies in the design of automatic monitoring system.In generally,the temperatu... Objective Many SPF animal rooms were upgraded and reconstructed on the basis of the old ordinary rooms in our country,there are some deficiencies in the design of automatic monitoring system.In generally,the temperature,cleanliness,and the room pressure gradience are easily controlled.However,the humidity control is very hard,especially in the winter and rainy season.In addition,the monitoring system usually emphasizes on the monitoring function,but the control function is weak,and there is no electronic record reserved in the system.Based on these deficiencies,our laboratory animal room has been upgraded and the reconstructed,and performance of the new system is good. 展开更多
关键词 SPF级实验动物房 温湿度 压差 智能化监控系统
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柔嫩艾美耳球虫江苏株SAG10基因的克隆及分析
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作者 仇保丰 景瑾 +6 位作者 董蓉莲 宋鸿雁 刘春 朱顺星 邵义祥 刘文斌 李建 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第3期24-28,共5页
根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.... 根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高,高达99%,其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同,其中3个为无义突变,8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现,国内外不同E.tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强,但国内不同分离株之间的抗原性更加接近,并优于国外的豪顿株,这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析,发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守,且与犬新孢子虫(Neospora caninum)、N.hughesi、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的SAG基因之间同源性较低,与已有观点一致;但神经肉孢子虫(Sarcocystis neurona)的2条SAG1基因序列却与E.tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性,这与其他研究结论不符。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 SAG10基因 克隆 分析
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柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因的克隆及分析
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作者 仇保丰 董蓉莲 +6 位作者 宋鸿雁 顾炳泉 景瑾 刘文斌 邵义祥 高逢结 李建 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第12期68-71,共4页
根据Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从纯化的柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子中提取总RNA,然后应用RT-PCR技术扩增出约810 bp的产物,将其连入p MD18-T载体,经双酶切和PCR鉴定正确后,进一... 根据Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从纯化的柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子中提取总RNA,然后应用RT-PCR技术扩增出约810 bp的产物,将其连入p MD18-T载体,经双酶切和PCR鉴定正确后,进一步进行DNA序列测定。将本研究测序结果与Gen Bank收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因进行比对,发现两序列间有6个碱基发生突变,其中3个为无义突变,其余为有义突变,同源性为97.9%;本研究扩增的S3a基因包含了一个全长795 bp的完整开放阅读框(ORF),编码264个氨基酸,蛋白分子量约为29.9 KD,ORF碱基同源性为99.0%,推导氨基酸序列同源性为98.1%。将本研究克隆的核糖体蛋白S3a基因与Gen Bank中收录的人和哺乳动物、植物、真菌、禽鸟等共15种真核生物的核糖体蛋白S3a基因进行比对发现,虽然本研究克隆和Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因之间同源性最高,但是两者却与硕大利什曼原虫和布氏锥虫这2种原虫的S3a基因同源性较低,反而与禽鸟S3a基因的同源性较高。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 S3a基因 克隆 分析
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快速康复外科护理在腹腔镜肾囊肿去顶减压术围手术期中的应用效果观察
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作者 董蓉莲 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2019年第4期0291-0291,共1页
针对快速康复外科护理在腹腔镜肾囊肿去顶减压术围手术期中的应用效果进行分析。方法:选取2017年6月到2018年6月来我院就医的86例腹腔镜肾囊肿去顶减压术患者进行研究,分为实验组(n=43例)和对照组(n=43例),对照组患者围手术期使用普通... 针对快速康复外科护理在腹腔镜肾囊肿去顶减压术围手术期中的应用效果进行分析。方法:选取2017年6月到2018年6月来我院就医的86例腹腔镜肾囊肿去顶减压术患者进行研究,分为实验组(n=43例)和对照组(n=43例),对照组患者围手术期使用普通护理的方式,实验组在使用普通护理的基础上组采用快速康复外科护理的方式。对两组患者手术后的恢复效果和并发症发生率进行对比。结果:实验组患者手术后的恢复效果与对照组患者相比优势显著,P<0.05;实验组患者术后并发症的发生率明显低于对照组,P<0.05。结论:使用快速康复外科护理对患者在腹腔镜肾囊肿去顶减压术围手术期中的护理效果显著,可以有效的减少并发症的发生,可以使患者手术后恢复的更快,值得在临床上进行应用。 展开更多
关键词 快速康复外科 腹腔镜 肾囊肿去顶减压术 围手术期 康复效果
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斯氏艾美耳球虫热休克蛋白70基因的克隆及表达分析 被引量:4
9
作者 景瑾 张帅 +8 位作者 仇保丰 董蓉莲 蒋荧梅 朱顺星 田颖超 刘春 吴刘成 宋鸿雁 邵义祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期11-16,共6页
为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E... 为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E.stiedai HSP70的全基因序列,将其连入原核表达载体p ET-28a(+),转化Competent Rosetta2(DE3)p Lys S,通过IPTG诱导表达重组HSP70蛋白,并进行Western-blot分析。结果表明:HSP70序列全长为2 727 bp,最大ORF为2 010 bp。HSP70在诱导后37℃培养4 h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下无表达。说明试验成功获得E.stiedai HSP70的全基因序列以及重组HSP70蛋白。 展开更多
关键词 斯氏艾美耳球虫 热休克蛋白70(HSP70) cDNA末端快速扩增法 克隆 原核表达 重组蛋白
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大鼠透皮电阻实验替代皮肤腐蚀性实验的验证 被引量:3
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作者 俞萍 胡启之 +2 位作者 陆罗定 刘协 董蓉莲 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期360-363,共4页
目的通过建立大鼠皮肤透皮电阻(TER)实验,研究运用体外方法替代动物试验检测化学品皮肤腐蚀性的可行性。方法参照经济合作与发展组织(OECD)体外实验方法指南430(透皮电阻分析法)建立测定系统,使用11种参考物质对该实验体系进行评估。根... 目的通过建立大鼠皮肤透皮电阻(TER)实验,研究运用体外方法替代动物试验检测化学品皮肤腐蚀性的可行性。方法参照经济合作与发展组织(OECD)体外实验方法指南430(透皮电阻分析法)建立测定系统,使用11种参考物质对该实验体系进行评估。根据本实验系统对参考物质的实测数据,可判定TER值>15 kΩ为阴性(非腐蚀性),TER<5 kΩ为阳性(腐蚀性),TER介于两者之间或3个平行样的TER测定值在界值上下波动时为可疑阳性,进一步进行染料渗透量测定,以8 mol/L盐酸测得的染料渗透量作为判断标准。结果整个实验的灵敏度为100%(5/5),特异度100%(6/6)。结论大鼠TER测定和染料渗透量分析相结合能成功判断本研究所选的11种标准化学物质的皮肤腐蚀性。此方法在实际运用中的有效性还需更多化学物质的检测来验证。 展开更多
关键词 皮肤腐蚀性 替代方法 大鼠透皮电阻实验
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华东地区清洁级大、小鼠中ECTV、MHV和SV的检测 被引量:2
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作者 宋鸿雁 董蓉莲 +6 位作者 仇保丰 景瑾 顾炳泉 邵义祥 刘春 朱顺星 吴刘成 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第1期90-92,共3页
为了研究华东地区清洁级实验鼠中鼠痘病毒(ECTV)、小鼠肝炎病毒(MHV)和仙台病毒(SV)感染症的流行情况,从华东地区4个主要实验动物供应基地分别购入ICR和(或)C57BL/6小鼠各30只,SD或Wistar大鼠各15只。采用摘眼球法采集血样和分离血清后... 为了研究华东地区清洁级实验鼠中鼠痘病毒(ECTV)、小鼠肝炎病毒(MHV)和仙台病毒(SV)感染症的流行情况,从华东地区4个主要实验动物供应基地分别购入ICR和(或)C57BL/6小鼠各30只,SD或Wistar大鼠各15只。采用摘眼球法采集血样和分离血清后,用进口商品化ELISA试剂盒分别检测小鼠的ECTV、MHV和SV的血清抗体。大鼠因为一般不易感染MHV和SV,因此只检测ECTV血清抗体。调查结果显示,在华东地区4个主要实验动物供应基地中,有3个基地的清洁级实验大、小鼠的检测结果均为阴性,但在另1个基地的清洁级ICR小鼠中,MHV和SV的血清抗体阳性率分别为56.7%和100%,C57BL/6小鼠的MHV血清抗体阳性率为100%。研究结果表明,华东地区实验动物供应基地大部分商品化的实验大、小鼠中,上述3种疫病的检测质量合格,但在个别基地中MHV和SV依然存在,且感染情况比较严重,应该积极采取措施加强管理,净化鼠群,同时认真开展鼠病的监测工作,保证实验用鼠的质量,以免对实验用鼠的繁育和使用带来不利影响。 展开更多
关键词 华东地区 小鼠 大鼠 流行病学调查
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斯氏艾美耳球虫ASP基因的克隆表达与免疫特性分析 被引量:2
12
作者 宋鸿雁 景瑾 +5 位作者 董蓉莲 仇保丰 蒋荧梅 朱顺星 王生存 邵义祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期676-681,共6页
根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种天冬氨酸蛋白酶(ASP)蛋白序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增法(RACE)获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)ASP的全基因序列,将其连入原核表达裁体pET-28a(+... 根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种天冬氨酸蛋白酶(ASP)蛋白序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增法(RACE)获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)ASP的全基因序列,将其连入原核表达裁体pET-28a(+),转化CompetentRosetta2(DE3)pLysS,通过IPTG诱导表达重组ASP蛋白,并进行Westernblot分析。结果显示,ASP序列全长为1568bp,最大ORF为1407bp。Westernblot分析发现,ASP在诱导后37℃培养4h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下有表达,且有少量可溶性表达;证实重组ASP蛋白确实对E.stiedai有免疫原性。结果表明,试验成功获得E.stiedaiASP的全基因序列以及重组ASP蛋白. 展开更多
关键词 E.stiedai ASP cDNA末端快速扩增法 克隆 原核表达 重组蛋白
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