胸部撞击后肺组织细胞凋亡的变化及其意义

目的 探讨胸部撞击后肺损伤特点、肺组织细胞凋亡分布特征及其在肺损伤发生中的作用。方法 建立大鼠重度肺撞击伤模型，采用流式细胞术、免疫组化和形态学方法观察肺病理变化和细胞凋亡情况。结果 撞击侧肺（右肺）发生明显的出血、充血、水肿，光镜下可见肺组织较广泛的出血和结构破坏。对侧肺（左肺）伤情明显轻于右肺。伤后24 h双侧肺组织中细胞凋亡率均显著高于伤前水平（P<0.05）。右肺伤后48 h迅速升高，72 h达峰值，之后逐渐下降，伤后1周接近伤前水平。左肺组织细胞凋亡率显著低于右肺（P<0.05），在伤后48 h达高峰，72 h明显降低并接近伤前水平。右肺伤后24 h细胞凋亡以支气管、血管内皮和肺泡上皮为主，72 h以炎性细胞为主。结论 支气管、血管内皮和肺泡上皮是应力波作用的主要部位，该区域发生的细胞凋亡是肺水肿及继发性肺损伤的发生的重要原因之一。

重庆地区汉族人群CD14基因启动子区-159T→C多态性及其与LPS反应分析

目的观察重庆地区汉族人群CD14基因启动子区-159单核甘酸多态性(single nuc leotide polymorph ism,SNP)分布特征,及其与CD14表达和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)反应的关系。方法选择298例重庆地区汉族健康个体,采用限制性片段长度多态性法(restrictionfragm ent lengthpoly-morph ism,RFLP)进行基因分型,检测LPS刺激前后外周血单核-巨噬细胞mCD14荧光强度和血浆sCD14浓度。结果重庆地区汉族人群CD14-159 T/T、T/C、C/C基因型频率分别为32.21%、50.67%和17.11%,样本符合Hardy-W e inberg平衡,正常情况下,不同基因型mCD14水平差异不明显,而sCD14浓度有显著性差异(P<0.05),LPS刺激能增强mCD14和sCD14的表达,但各基因型的增强幅度没有明显差异。结论重庆地区汉族人群CD14-159 SNP等位碱基以T为主,T→C变异可抑制sCD14的表达,但对mCD14表达和LPS刺激反应的影响可能不明显。

Fas/FasL诱导细胞凋亡及其在肺损伤中的作用

近年来 ,对细胞凋亡的生理及病理作用的研究已深入人体各个系统 ,对Fas/FasL致细胞凋亡机理的描述日益完善。基础及临床实验研究揭示Fas/FasL及细胞凋亡对肺损伤的发生。

多功能小型生物撞击机的研制与应用

研制一套集柔性撞击、刚性撞击和细胞损伤于一体的多功能致伤装置及简易伤情评估系统。应用空气动力学原理、微弱信号检测技术和机电一体化的方法研制而成 ,通过更换撞击头可实现柔性撞击、刚性撞击和细胞损伤 ,通过眼、脑、肺和细胞进行实验研究。该系统通过微机对致伤参数进行精确控制 ,实时测试致伤参数 ,并对损伤前后的神经功能进行评估。实验结果表明 :采用不同的驱动压可分别造成轻、中、重度的损伤模型 :柔性撞击致大鼠脑损伤为 40 0、6 0 0、70 0 k Pa;兔视网膜挫伤为 6 0 0、80 0、10 0 0 k Pa;刚性撞击致大鼠肺损伤为 30 0、45 0、6 0 0 k Pa;细胞损伤为 10 0、15 0、2 0 0 k Pa。本装置具有操作简便、定量可控、重复性好、应用广泛等优点 ,可非常方便地复制出小动物不同部位 ,不同种类和不同程度的损伤模型。

连续断层图像立体重采样评估

目的提供连续薄层断层标本的任意方位重采样方法。方法用Amira软件对连续冰冻断层标本三维数据场进行任意方位剖切,观察并评测断层图像。结果重采样断面图像清晰,采样间隔越小,即采样频率越高,重采样图像质量越高,与原始图像差别越低。结论连续薄层断层数据重采样的图像可为断层解剖和影像研究提供形态学资料。

数字化人体大脑坐标系的建立及三维测量

目的构建临床常用的大脑三维空间坐标系,并对人体大脑各结构进行空间定位和三维测量。方法采用低温冷冻铣切技术采集人体大脑的横断层图像,用课题组自行开发的软件,在分割、重建后的三维模型上,建立三维空间坐标系,进行人脑各结构在空间中的准确定位和三维测量。结果建立了以前后连合间线的中点为原点的大脑三维空间坐标系,并对原始数据进行重新采样,生成了与新坐标系相匹配的人体大脑数据集,并测量了大脑主要结构的大小及空间坐标。结论在计算机上寻找坐标原点,构建新的坐标系,为大脑坐标系构建提供了一种新的方法和研究手段。所获得的数字化可视人体大脑主要结构的体积等测量数据真实可靠,为构建大脑解剖模型积累了定量资料。

汉族人髓样分化蛋白2基因启动子区多态性与严重创伤后并发症易感性的关系

目的探讨中国汉族人髓样分化蛋白2(MD-2)基因启动子单核苷酸多态性及其与严重创伤患者多器官功能衰竭和脓毒症易感性之间的关系。方法应用限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应技术,检测105例严重创伤患者(其中42例并发脓毒症)MD-2基因启动子-1625C/G单核苷酸多态性位点基因型。并对所有患者进行多器官功能障碍综合征(MODS)评分。结果-1625G等位基因携带者MODS评分显著高于C等位基因携带者(显性遗传模式P<0.001,隐性遗传模式P>0.05)。携带G等位基因型的创伤患者比C等位基因携带者并发脓毒症的可能性高(OR值为0.477,95%可信区间为0.266-0.855,P<0.05)。携带G等位基因型的创伤患者死亡率显著高于C等位基因携带者(显性遗传模式P<0.05,隐性遗传模式P>0.05)。结论汉族人严重创伤后多器官功能衰竭、脓毒症的易感性与MD-2基因启动子-1625C/G单核苷酸多态性相关。-1625G可能是严重创伤后并发症发生的危险因素。

MD-2基因启动子区-1064、-1625 SNP对启动子活性的影响

目的探讨MD-2基因启动子区-1064、-1625SNP位点碱基变异对启动子活性的影响。方法通过PCR和定点突变技术,构建了含MD-2基因基础启动子及-1625G和-1064G突变启动子,以双荧光素酶报告系统观察SNP对MD-2基因启动子活性的影响。结果化学发光结果显示,在U937细胞中,-1625G突变启动子活性比MD-2基础启动子活性高11.4%,差异显著。而-1064G突变启动子与MD-2基础启动子活性无明显差异。结论-1625C→G碱基变异可增强MD-2基因启动子活性,但-1064SNP对靶基因启动子活性无明显影响。

水下冲击伤后犬主要脏器的病理学改变

目的:观察动物水下冲击伤后主要脏器的形态学变化。方法:采用大体、光镜和电镜的方法观察犬水下冲击伤后肺脏、小肠及心脏的病理变化。结果:损伤动物大体解剖可见明显肺出血、水肿,光镜下可见肺出血、淤血,肺泡腔内有大量的红细胞及纤维蛋白渗出,电镜下可见肺泡壁毛细血管内皮细胞破坏严重,部分线粒体出现空泡变与髓鞘样结构。以出血为主的肠道损伤明显可见。可见少量心肌纤维断裂,心肌细胞肿胀。结论:严重的肺出血、水肿可能是水下冲击伤动物早期死亡的主要原因。动物伤情的严重程度与水下冲击波的正向冲量密切相关。肠道损伤也应引起足够重视。

水下冲击伤伤情特点的实验研究

目的探讨水下冲击伤的伤情特点。方法成年杂种犬19只,布放于离爆心10.36、12.79、15.25m,1.019kg和1.020kg TNT水下3m爆炸,PCB压力传感器测定冲击波物理参数,观察现场至伤后20-28小时动物存活情况和大体形态学改变。结果犬死亡率为31.58%（6/19）。形态学观察发现肺损伤发生率最高（100%）,主要表现为不同程度的肺出血和肺水肿;其次为肠道损伤（26.32%）,主要表现为浆膜下出血,浆肌层撕裂和浆膜下血肿;部分可见肝脾轻微的包膜下出血和血肿。1例出现膀胱浆膜和黏膜下出血,体表未见损伤。结论水下冲击伤具有死亡率高,肺损伤发生率高、肠道损伤发生率较高、肝脾等实质脏器损伤轻微,胆囊、膀胱等含液脏器和体表很少发生损伤等特点。

兔坠落式颅脑减速伤的实验研究

目的研究兔坠落式颅脑减速伤模型及探讨其损伤机制。方法用自行设计的减速伤致伤装置复制兔坠落式颅脑减速性损伤。致伤装置由滑动导轨、动物固定台车、基座、撞砧及支架等部分组成。55只家兔分为对照组(10只)和致伤组(45只),致伤组又根据坠落的高度不同随机平均分为3组,Ⅰ组2.5m,Ⅱ组3.5m,Ⅲ组7.0m。将兔仰卧固定于动物固定台车上从不同高度坠落,其颅顶部撞击基座上的撞砧,用高速摄像观察兔颅脑减速伤致伤过程。从动物伤后行为、CT影像、大体解剖观察和病理变化等四方面对兔颅脑损伤进行研究。结果Ⅰ、Ⅱ组动物伤后4小时存活9只和6只,Ⅲ组动物致伤后即刻死亡。Ⅰ组CT影像观察和解剖未见颅脑损伤;Ⅱ组致伤后出现颅骨骨折、脑挫伤、硬膜下出血、对冲伤和轻微脑实质出血;Ⅲ组均出现了颅骨骨折、脑挫伤、硬膜下出血、脑实质出血和对冲伤。颅脑减速伤的病理改变主要为出血性脑挫伤。结论坠落高度(减速度)对颅脑损伤的程度有影响,对冲伤在严重颅脑减速伤中尤为明显。

冲击伤复合破片致伤后狗IL-8及IL-8 mRNA的变化

目的：探讨冲击伤复合破片伤的损伤特点、致伤机制。方法：采用狗冲击伤复合左后肢高速破片致伤实验模型，分析伤后不同时相点ＩＬ－８的变化及肺组织ＩＬ－８ｍＲＮＡ表达。结果：冲击伤、高速破片伤、冲击伤复合高速破片伤后血浆和肺组织ＩＬ－８升高，且ＩＬ－８的变化与肺损伤程度有关。各致伤组肺组织ＩＬ－８ｍＲＮＡ表达上调。结论：ＩＬ－８在肺损伤的发生和发展过程中起一定作用，监测血浆ＩＬ－８的变化有助于对伤情的判断。

犬水下冲击伤后血糖变化与肺损伤的关联分析

目的探讨水下冲击伤后血糖的变化特点及其与肺损伤的关联分析。方法成年杂种犬29只,分为3组,分别垂直于水面布放于离爆心10.36m(A组,12只)、12.79m(B组,12只)和15.25m(C组,15只)处。爆心置TNT炸药,于水下3m爆炸。分别检测各组别犬伤前、伤后1、4、24小时等时相点血糖水平,同时观察动物肺损伤情况,利用SPSS13.0软件对结果进行统计分析。结果水下冲击伤后各组别、各时相点血糖水平变化显著,多集中于伤后1小时;伤后1小时血糖水平与肺伤情有一定关联性。结论水下冲击伤后血糖水平的变化值得特别关注,并可在一定程度上有效预测肺伤情的发展。

家兔主要内脏共振频率研究

目的：研究低频振动条件下，家兔肠、肺、肾、胃、心、肝的共振频率和振动特点，为生物体器官共振损伤及其反应研究奠定基础。方法：家兔8只，1．5％戊巴比妥钠麻醉后，将加速度传感器固定于脏器表面，兔以仰卧位固定在振动台上，施加振幅为2rnm的振动，振动频率范围为2～50Hz，测量各脏器在每个振动频率点的振幅，最大振幅对应的频率即为共振频率。结果：在2～50Hz频率范围内，家兔肠、肺、肾、胃、心、肝在前后（胸背）方向的共振频率分别为6．0Hz、5．0Hz、7．0Hz、8．0Hz、6．0Hz、7．0Hz；在共振频率处肺的振幅最大；共振频率与体重、脏器质量、脏器体积无明显统计相关性。结论：家兔主要内脏前后方向的低频共振频率为5．0～8．0Hz，其低频共振特性可能是低频波动致生物生理功能障碍和组织器官损伤的重要基础，值得深入研究。

犬冲击伤复合高速破片伤时内皮素的变化及其意义

目的探讨犬高速破片伤对冲击伤伤情的影响。方法成年杂种狗21只,依据冲击波和高速破片的物理参数,分别复制中度冲击伤、肢体高速破片伤、中度冲击伤复合高速破片伤,观察伤后肺动脉压、致伤后24小时肺形态学、肺含水率和肺体指数,同时测定血浆和肺组织内皮素含量。结果致伤后,犬肺动脉压升高,血浆和肺组织内皮素含量升高。高速破片可加重中度冲击伤,其效应主要发生在肺脏,伤情可加重1个等级。结论肢体高速破片伤对中度肺冲击伤具有加重作用,其机制与致伤后血浆和肺组织内皮素含量升高有关。

大鼠严重创伤后腹腔巨噬细胞Toll样受体2/4基因表达及受体反应性

目的观察大鼠创伤后腹腔巨噬细胞Toll样受体(TLR)2/4基因表达及受体反应性变化。方法建立大鼠严重创伤(右侧胸部撞击伤复合双侧股骨闭合性骨折)模型,分别于创伤后2、6、12、24小时取腹腔巨噬细胞,以逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)测定TLR2/4的mRNA表达,以脂多糖(LPS)、Pam3CSK4刺激后取细胞上清液测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果创伤后2小时腹腔巨噬细胞TLR2、TLR4的mRNA表达较正常对照组降低(P<0.05),直至创伤后24小时。行不同浓度LPS、Pam3CSK4刺激后细胞上清液TNF-α水平较对照组降低(P<0.01)。结论严重创伤后腹腔巨噬细胞TLR2/4基因表达降低,受体反应性下降。

水下冲击波致犬肺损伤的病理学改变

目的探讨水下冲击伤后肺的病理学改变。方法成年杂种犬29只，布放于离爆心10．36—15．25m处，分别用968、1019、1020gTNT水下3m爆炸，水中压力传感器测定冲击波物理参数，观察伤后肺的大体形态学改变以及光镜和电镜下组织结构的变化。结果肺损伤的发生率达93．1％，大体形态学改变主要为肺出血、肺淤血和肺水肿；光镜下可见肺泡腔内有大量的红细胞及纤维蛋白渗出；电镜下可见肺泡壁毛细血管内皮细胞破坏严重，部分线粒体出现空泡变与髓鞘样结构，常可见脱落的变性的肺泡Ⅱ型上皮细胞等特点。结论严重的肺出血和肺水肿可能为动物水下冲击伤早期死亡的主要原因。

家兔胃低频振动特性研究

目的 研究低频振动条件下家兔胃共振频率和振动特点，为器官共振损伤及其反应研究奠定基础。方法 家兔8只，1．5％戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉后，将加速度传感器固定于胃表面，兔以仰卧位同定在振动台，施加振幅为2mm、振动频率范围为2～50Hz的振动，测量每个振动频率点胃的振幅，及家兔胃的共振频率。结果 在2—50Hz频率范围内家兔胃在前后（胸背）方向的振动在5Hz后振幅迅速增大，在8Hz左右达峰值，达到施加振幅的277．5％，之后又逐渐减小；共振频率为7—9Hz，在6～10Hz频率范围内胃的振幅都超过了施加振幅的150％；随着胃的质量、体积的增大，胃共振频率变低，但最大振幅增大。结论 用正弦扫频振动法测得兔胃前后片向的低频共振频率为7—9Hz，其低频共振特性可能是低频波动致生物生理功能障碍和组织器官损伤的重要基础，值得深入研究。

EMT在大肠癌细胞奥沙利铂耐药中的作用及分子机制研究

目的探讨上皮-间叶转化(EMT)在大肠癌耐药中的作用及分子机制。方法采用药物浓度递增的方法建立大肠癌LOVO细胞奥沙利铂(L-OHP)耐药细胞株LOVO/L-OHP,免疫荧光和蛋白质印迹法(Western blot)检测LOVO和LOVO/LOHP细胞E-cadherin和Vimentin表达;Western blot检测核转录因子Snail、Twist表达;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖。结果与LOVO细胞比较,LOVO/L-OHP皮表型消失,细胞膜E-cadherin表达减弱(22.63±3.25)%(P<0.01),获得间叶细胞表型,表达Vimentin(475.42±58.36)%(P<0.01)。LOVO/L-OHP细胞株Twist表达轻度增加(116.42±18.36)%(P>0.05),Snail表达显著增加(382.18±41.33)%(P<0.01)。siSnail上调E-cadherin表达(246.82±31.57)%(P<0.01),下调Vimentin表达(28.75±3.96)%(P<0.01);siSnail显著增强LOVO/L-OHP细胞株L-OHP化疗敏感性,对照组和siSnail组的IC50分别为23.75μg/mL和12.42μg/mL。结论 EMT在大肠癌细胞L-OHP耐药中可能起重要作用,抑制EMT可恢复耐药细胞化疗敏感性。