抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究＊董邦权李恩善雷祚荣１杨琨金伯泉汪美先（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２）由金黄色葡萄球菌产生的肠毒素（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，简称ＳＥ）是一组分子量为２４～３０ｋｄ的单肽...

抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用

应用小鼠杂交瘤技术获得５株分泌抗Ｄ型葡萄球菌肠毒素（ＳＥＤ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞（ＤＣ３、ＤＣ４、ＤＢ１１、４Ｄ３和４Ｄ５）。其中４Ｄ３为ＩｇＭ（λ），其余为ＩｇＧ１（ｋ）。这组ＭｃＡｂ除ＤＣ３外，其它４株ＭｃＡｂ识别的抗原构象表位相同，其相对亲和力依次为４Ｄ５＞ＤＣ３＞ＤＣ４＞４Ｄ３＞ＤＢｌｌ。利用抗ＳＥＤ多克隆抗体与ＨＲＰ标记的ＤＣ３和４Ｄ３（针对不同表位）混合ＭｃＡｂ建立了夹心ＥＬＩＳＡ法，并以该法检测了自临床标本中分离的８０林金葡萄菌所产生的ＳＥＤ，其产毒率为４１．３％。

临床分离的金黄色葡萄球菌产肠毒素血清型分布及意义

金黄包葡萄球菌肠毒素(SE)引起的疾病,越来越受到人们的重视。检测SE并对其分型,对于临床诊断和预防以及医院内交叉感染的调查有着重要的实际意义。本成果对采自北京、济南和西安7所医院临床分离的138株金葡菌菌株,通过玻璃纸覆盖培养基的膜培养法产毒,以斑点免疫结合试验检测培养液中不同血清型的SE,同时以琼脂免疫扩散试验平行对比。

姜黄素对耐药细胞株K562/ADM的耐药逆转作用研究

目的:研究姜黄素对慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADM中多药耐药基因mdrl表达的下调作用。方法:采用RT-PCR和Western blot方法检测各处理组K562/ADM细胞株中mdr1基因表达;利用MTT试验检测姜黄素处理后K562/ADM细胞株对阿霉素敏感性的改变。结果:姜黄素抑制了K562/ADM细胞株中多药耐药基因mdr1的表达,姜黄素明显增加K562/ADM细胞株对阿霉素的敏感性。结论:姜黄素通过抑制P-gp的药物外排作用有效逆转K562/ADM细胞株的多药耐药性。

酶联免疫发光法检测金葡菌肠毒素(SE)B和SEC1方法的建立

目的:比较酶联免疫测定法(ELISA)和酶联免疫化学发光法(CLIA)在检测SEB、SEC1中的敏感性及稳定性。方法:常规法制备、纯化抗SEB和SEC1单克隆抗体(mAb),以碱性磷酸酶(AP)标记的FMMUSEB.D6和FMMUSEC1.C4mAb为检测抗体,FMMUSEB.B4和FMMUSEC1.G8mAb为包被抗体,以单磷酸酚酞(PMP)为显色底物,以LumigenAPS5为发光底物。结果:成功地建立了敏感、特异检测SEB、SEC1的ELISA和CLIA方法,CLIA较传统ELISA具有灵敏度高、线性范围宽和省时等优点。结论:CLIA法是一种比传统ELISA更优越的免疫学检测方法,在可疑SE污染标本检测、流行病学调查等领域具有良好的应用前景。

白细胞介素11基因治疗促进造血的实验研究

白细胞介素１１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１１，ＩＬ－１１）是一种具有广泛生物学功能的造血生长因子，体内体外实验均显示ＩＬ－１１具有显著的造血促进作用。为了探讨ＩＬ－１１基因治疗应用于造血功能低下疾病的可能性，构建了含人ＩＬ－１１ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体，并转染小鼠成纤维细胞系ＮＩＨ－３Ｔ３，经筛选获得３株高表达ＩＬ－１１的转染细胞亚克隆。用高表达ＩＬ－１１的转染细胞作为载体细胞，进行了ＩＬ－１１基因治疗对小鼠造血系统影响的实验研究。结果表明ＩＬ－１１基因治疗能显著提高正常小鼠外周血血小板水平；明显缩短亚致死量放射损伤小鼠白细胞降低的时间，促进外周血白细胞、血小板和红细胞压积的恢复。提示ＩＬ－１１基因治疗对于血小板减少性疾病治疗和放射损伤后的造血恢复具有潜在的应用价值。

HIV核心抗原p24检测方法的建立及应用

ＨＩＶ感染的检测在预防ＡＩＤＳ传播方面有重要作用。本研究以重组抗原ｐＧ１免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术建立了５株识别ＨＩＶ核心抗原ｐ２４的杂交瘤细胞株Ｄ３，１Ｈ１，２Ｇ１０，３Ｈ５和４Ｈ６。经鉴定这５株ＭｃＡｂ与其它病毒抗原无交叉反应，分别识别３个不同的抗原表位。应用两株识别不同表位的ＭｃＡｂ２Ｇ１０和３Ｈ５建立了检测ＨＩＶｐ２４抗原的夹心ＥＬＩＳＡ法，并初步检测了２４份ＨＩＶ抗体阳性血清。

双抗体夹心ELISA检测SEB方法的建立及在不同基质中检测的应用

目的:建立检测SEB的双单克隆抗体(mAb)夹心ELISA,并检测在多种基质中SEB的敏感性。方法:制备、纯化抗SEBmAbB4和D6。D6mAb标记辣根过氧化物酶(HRP)作为检测抗体,B4mAb作为包被抗体。结果:成功建立了敏感、特异检测SEB的ELISA方法,检测抗体稀释液和小牛血清中SEB,检测灵感度0.2μg/L,定量线性范围0.78～12.5μg/L,r2=0.992,批间变异系数(CV)<10%,回收率80%～110%。检测50g/L脱脂牛奶、尿液和自来水中的SEB,灵敏度0.39μg/L,定量线性范围0.78～25μg/L,r2=0.997。与SEA和SECl无交叉反应。结论:本方法测量准确,灵敏度高,特异性好,在食品工业和临床标本检测中有广阔的应用前景。

扁桃体细胞的表型及其自然杀伤功能

目的比较腭扁桃体细胞 (PTC)与外周血单个核细胞 (PBMC)的表型 ,观察IL 2刺激前后PTC的杀伤活性,探讨扁桃体的免疫功能。方法用流式细胞仪分别检测扁桃体与PBMC表面CD3,CD4 ,CD8 ,CD20,PTA1及9.1C3的表达情况。用4h51Cr释放实验检测静止时及IL 2刺激后PTC中NK细胞杀伤K562活性的改变。结果PTC中CD20的表达率为71.2 % ,PBMC为15.5 % ,且PTC中的平均荧光强度 (MFI)明显高于PBMC。静止的扁桃体细胞杀伤功能非常低 ,经IL 2刺激后杀伤功能显著提高 ,效靶比为200∶1时达到61.5 %。CD3阳性率在PTC和PBMC中分别为32.8%和57.7% ;CD4/CD8的比值分别为6.97和1.11。两种新分子血小板T细胞活化抗原1(PTA1)和9.1C3在扁桃体中均有表达。结论扁桃体单个核细胞中B细胞占多数 ,而且CD20的表达密度明显高于外周血B细胞 ;在T细胞中以CD4 +细胞为主 ;IL 2活化后PTC有较高的自然杀伤活性 ;与CTL和NK细胞相关的膜标记PTA1和9.1C3均有表达。

分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用

应用常规方法建立了３株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌Ｃ１型肠毒素（ＳＥＣ１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系Ｂ３、Ｃ４和Ｇ８。其中Ｂ３和Ｃ４均为ＩｇＧ１（ｋ），Ｇ８为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。Ｂ３和Ｇ８与ＳＥＡ、ＳＥＢ及ＳＥＤ均无交叉反应；Ｃ４虽与ＳＥＡ和ＳＥＤ无交叉反应，但与ＳＥＢ有交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水效价为１０－５～１０－８。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＳＥＣ１，敏感性可达１ｎｇ／ｍｌ。

抗B型葡萄球菌肠毒素(SEB)单克隆抗体的研制及其初步鉴定(简报)

葡萄球菌肠毒素是一组分子量为24,000—34，000的单肽链蛋白质。已知有SEA、SEB、SECs(包括SEC1，SEC2及SEC8)，SED及SEE等血清型。都能引起食物中毒。并证实SEA和SEB还具有强烈的有丝分裂原效应。对机体可产生广泛地免疫调节作用。因此，建立抗SEB单抗的杂交癌细胞系具有重要的实际意义。

rHuIL－3McAb在rHuIL－3促人骨髓干细胞集落形成中的中和作用

本文在应用ｒＨｕＩＬ－３刺激健康人骨髓干细胞半固体培养中的集落形成的实验系统，发现了ｒＨｕＩＬ－３ＭｃＡｂＩＢ９对ｒＨｕＩＬ－３刺激集落形成活性的中和作用，当在培养系统中加入１：１０００稀释的ＭｃＡｂ腹水时其抑制率达到８２．５％。本结果对由于ＩＬ－３分泌过高时所引起的某些造血系和非造血系肿瘤等疾病的治疗提供了有价值的实验依据。

医学免疫学教学改革的探索与实践

论述了医学免疫学的教学方法、教学手段、多元化的考试方式，目的在于提高医学免疫学教学质量，培养跨世纪的医学人才，适应21世纪生命科学发展的需要。

抗rHuIL-8单克隆抗体的制备和初步鉴定

本文以单核细胞衍生的基因重组人IL-8(MIL-8)为免疫原,经常规免疫、融合、克隆化制备了6株抗MIL-8的单克隆抗体(2G2、4E1、4C3、4D7、5C9、5A4)。其中5株(除4D7)对MIL-8的嗜中性粒细胞趋化活性具有中和作用,6株单抗均与内皮细胞衍生的重组人IL-8(EIL-8)具有交叉反应,但与表达IL-8的载体菌裂解液均无交叉反应。

医学期刊论文关键词的选取方法

关键词是直接从论文中选取出来的最主要内容的术语,对该文献检索起着重要作用。就体现医学论文主要主题内容的关键词和主题词,进行了二者区别分析比较,提出了如何更规范、准确地选取论文关键词,以达到全、准和便捷地为读者获取医学科技信息提供有效途径。

急性T淋巴细胞白血病细胞系JM分泌抑制因子在体外对T细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 研究急性 T淋巴细胞白血病细胞系 JM分泌的抑制因子 (TL SFJM)在体外对 T细胞凋亡及细胞周期的影响 .方法 以 TL SFJM作用于有丝分裂原 PHA、蛋白激酶 C(PKC)活化剂 PMA和同种异体抗原 (alloantigen)活化的人或小鼠 T细胞 ,应用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期 .结果 TL SFJM在体外可诱导 PHA/IL - 2活化的小鼠胸腺细胞的凋亡 .TL SFJM在体外可诱导 alloantigen活化的人外周血单个核细胞 (PBMC)的凋亡 ,且把细胞周期阻遏在 G1期 .TL SFJM对 PMA诱导的人 PBMC活化抗原 CD2 5的表达无明显影响 ,也不引起凋亡 .结论 TL SFJM在体外可诱导 PHA、alloantigen活化的 T细胞凋亡 .

医学期刊论文被PubMed收录后的XML标记格式及FTP传递

目的细胞与分子免疫学杂志被收录情况。方法数据库中每条记录都经由专业标引人员进行数据加工处理,特别是对医学文献进行了医学主题词与副主题词的标引,如何将期刊论文数据编辑为XML标记文档。结果该杂志的XML标记格式及FTP的传递使期刊进入了PubMed。结论为更多的生物医学以及生命科学期刊进入PubMed检索系统后的参考和交流。

PTA1在人巨核母细胞系HEL细胞和血小板的表达及分布

应用抗人血小板和Ｔ细胞活化抗原１（ＰＴＡ１）单克隆抗体（ｍＡｂ）间接免疫荧光染色和流式细胞仪（ＦＣＭ）分析，以及胶体金免疫电镜技术，检测了人巨核母细胞系ＨＥＬ细胞和血小板膜表面ＰＴＡ１分子的表达水平，并对静止与活化血小板膜表面ＰＴＡ１分子的表达和分布进行了比较。结果表明，ＨＥＬ细胞与人血小板膜表面均表达高水平ＰＴＡ１分子，活化血小板膜表面ＰＴＡ１分子表达水平有所降低，但胞膜内陷所形成的胞浆空泡膜内侧可见密度较高的ＰＴＡ１分子。

国际免疫学专业相关期刊的引文分析

通过对2003年度JCR中免疫学专业相关期刊各项引证指标的统计分析,应用文献计量学方法对SCI中收录的免疫学专业相关期刊进行统计分析,探讨免疫学专业相关期刊影响因子和被引频次的分布规律;运用引文分析方法筛选了免疫学领域具有影响力的期刊。为我国免疫学工作者能更全面地了解SCI,将新颖而有创新的高水平研究成果在重要的国际免疫学期刊上发表提供参考依据。

TLSF_(JM)在体内对同种异体抗原诱导的小鼠T细胞增殖和杀伤细胞分化的影响

目的 :探讨JM急性T淋巴细胞白血病细胞分泌的抑制因子 (TLSFJM)对BALB C小鼠胸腺发育的影响及其在体内对同种异体抗原诱导的小鼠辅助性T细胞 (Th)增殖及杀伤性T细胞 (CTL)分化的影响。方法 :建立小鼠同种异基因型肿瘤排斥模型 ,实验小鼠腹腔注射含TLSFJM 的JM细胞培养上清 ,对照小鼠注射RPMI16 4 0。无菌取小鼠脾脏细胞 ,分别以3H TdR掺入法和51 Cr释放法检测T细胞增殖和CTL的分化。结果 :①TLSFJM 明显抑制多克隆刺激剂PHA联合IL 2诱导的小鼠胸腺细胞增殖 ;②体内注射TLSFJM明显抑制多克隆刺激剂PHA联合IL 2诱导的小鼠T细胞活化、增殖 ;③TLSFJM在体内能有效抑制同种异体抗原诱导的小鼠T细胞增殖 ;④TLSFJM 在体内能有效抑制同种异体抗原诱导的小鼠CTL分化。结论 :TLSFJM 在体内能有效抑制同种异体抗原诱导的小鼠T细胞增殖和小鼠CTL分化。