尿外泌体miR-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌临床结局的预测价值

目的 探讨尿外泌体微小RNA(miR)-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌(BUC)临床结局的预测价值。方法 2017年1月~2022年3月,从我院泌尿外科选取152例BUC病人作为验证集。另外,从我院体检中心选择了126例非癌对照。采用实时荧光定量PCR法检测尿外泌体miR-29c表达水平。结果 验证集BUC病人尿外泌体miR-29c水平低于非癌对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而尿外泌体miR-17-5p水平和miR-590-5p水平比较无明显差异(P>0.05)。尿外泌体miR-29c水平诊断BUC的ROC曲线下面积为0.969(95%CI:0.953~0.986),相应的敏感性和特异性分别为92.1%和90.2%。亚型分析中,非器官局限性BUC病人尿外泌体miR-29c水平较器官局限性BUC病人进一步降低(P=0.009)。预后分析中,尿外泌体miR-29c高表达组病人总生存期、无病生存期和疾病特异性生存期均更长(P<0.05)。结论 尿外泌体miR-29c低水平是BUC病人不利的预后因子,有希望作为器官和非器官局限性BUC不良临床结局的预测标志物。

miR-155调控前列腺癌细胞NF-κB通路机制研究

目的探讨miR-155调控前列腺癌细胞核因子转录κB(NF-κB)通路的分子机制。方法前列腺癌DU145和PC-3细胞株经Anti-miRTM miR-155抑制剂(anti-miR-155)转染后(实验组),采用蛋白印迹法(Western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测转染后细胞中RelA和RelB蛋白及mRNA表达水平,同时检测NF-κB活性及细胞因子水平。以转染AntimiR^(TM)阴性对照的DU145和PC-3细胞株为对照组。结果与对照组相比,实验组细胞RelA、白细胞介素(IL-6)、白细胞介素(IL-21)表达水平,以及NF-κB活性显著降低(P<0.05),RelB表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论降低人前列腺癌细胞NF-κB活性和RelA表达水平,可能是miR-155参与调控前列腺癌生物学行为的分子机制之一。

miR-155对前列腺癌放射治疗的增敏作用

目的探讨miR-155在前列腺癌放射治疗(简称放疗)中的增敏作用。方法转染anti-miR-155,抑制前列腺癌DU145和PC-3细胞中miR-155水平,联合应用放射治1疗,通过观察DU145和PC-3细胞的存活率、黏附率,以及前列腺癌细胞的凋亡率,并观察Caspase-3和Caspase-9表达水平和活性的变化。结果与对照组相比,DU145和PC-3细胞经放射或antimiR-155单独处理后,细胞存活率(放射组分别为25.6%±2.0%和21.6±1.0%;anti-miR-155处理组分别为20.5%±1.0%和15.5%±1.0%)和黏附率(放射组分别为0.8%±0.1%和0.7%±0.1%;anti-miR-155处理组分别为0.7%±0.1%和0.6%±0.1%)均显著降低(P<0.01);前列腺癌细胞凋亡率增高(放射组分别为3.3%±0.3%和4.2%±0.3%;anti-miR-155处理组分别为4.1%±0.1%和3.9%±0.2%);Caspase-3和Caspase-9表达水平和活性均提高(P<0.01);联合组的细胞存活率(分别为10.1%±0.5%和6.1%±0.5%)和黏附率(分别为0.4%±0.1%和0.4%±0.1%)低于单独处理组(P<0.01,n=6),细胞凋亡率(分别为6.9%±0.4%和6.8%±0.3%),Caspase-3和Caspase-9表达水平和活性等均高于单独处理组(P<0.01)。结论抑制miR-155可增加人前列腺癌的放疗敏感性,提高放射线对人前列腺癌细胞的治疗效果,其机制可能与Caspase-3和Caspase-9参与细胞凋亡的途径相关。

局限性前列腺癌病理分期比较的临床研究进展

目的:探讨指诊分期和动态增强核磁(DCE-MRI)分期预测局限性前列腺癌病理结果的临床价值。方法:对42例局限性前列腺癌患者术前行经直肠指诊分期及MRI、DCE-MRI分期,并与根治术后的病理结果进行比较,评价临床分期及DCE-MRI分期的临床意义。结果:DCE-MRI分期与病理分期相比总体检测结果相同(0.25<P<0.5),能很好的预测前列腺内肿瘤的病理分期;直肠指诊诊断局限性前列腺癌有较高的敏感性(89.5%),DCE-MRI则有较高的特异性(79.17%)及准确性(83.33%)。结论:直肠指诊是筛查前列腺癌的重要手段,DCE-MRI则能更好的了解肿瘤的范围及浸润情况,更准确的预测肿瘤的病理分期。

不同海拔花椒棉蚜天敌寄生蜂调查

在金阳县800—1800 m不同海拔段,对棉蚜寄生蜂种类和数量进行了调查。寄生蜂对棉蚜寄生率为2.63%。共发现棉蚜寄生蜂3科3属4种:蚜虫跳小蜂Aphidencyrtus aphidivorus、印度三叉蚜茧蜂Trioxys indicus、蚜茧蜂T.sp.、棉蚜蚜小蜂Aphelinus gossypii。印度三叉蚜茧蜂占寄生蜂总数的90.38%,是花椒棉蚜寄生蜂优势种群。经统计,印度三叉蚜茧蜂在1000—1800m范围内随着海拔升高而雌雄性比下降。

全麻下软式输尿管镜下输尿管结石钬激光碎石患者的护理研究

目的研究全麻下软式输尿管镜下输尿管结石钬激光碎石患者的护理。方法随机选择本院收治的118例输尿管结石患者,按双盲数字法将其分为对照组和观察组。所有患者均采用全麻下软式输尿管钬激光碎石术治疗,对照组进行常规护理,观察组进行系统强化护理,对患者的护理结果进行统计分析。结果通过对比,观察组一次清除结石的成功率(91.53%)高于对照组(81.36%);观察组并发症的发生率3.39%低于对照组并发症发生率8.47%。观察组患者SDS评分、住院时间、VAS评分及SAS评分优于对照组(P<0.05)。观察组对相关知识了解程度(88.14%)、治疗配合度(91.53%)高于对照组患者知识了解程度(76.27%)、治疗配合度(74.58%)。结论采用全麻下软式输尿管镜下钬激光碎石术治疗输尿管结石,同时加强患者治疗过程系统强化护理,增强患者的治疗的配合度及对相关疾病知识的了解,值得普及推广。

T4DNA连接酶对电转化效率的影响

目的探讨T4DNA连接酶影响电转化效率的机制并寻找提高电转化效率的方法。方法将1μg噬粒pDAN5加入到连接反应体系中并进行沉淀、热灭活以及酚氯仿抽提等各种处理后进行电转化。结果热灭活、酚氯仿抽提、热灭活后沉淀及热灭活后酚氯仿抽提处理后的转化效率最高(4.6×108￣5.3×108),其次是沉淀处理(4.8×107),未处理的转化效率最低(4.4×106)。结论 T4DNA连接酶的活性是导致电转化效率降低的主要原因,任何可以灭活该酶活性的方法均可显著地提高转化效率。

开放及腹腔镜小儿隐睾复位固定术后免疫功能的比较

目的:探讨开放手术及腹腔镜下隐睾复位固定术对小儿机体免疫功能的影响。方法:检测两组术前1d和术后1d、4d外周血中TNF、IL-6及CD3、CD4、HLA-DR的表达水平。结果:腹腔镜组TNF、HLA-DR的表达术前术后未见明显异常,开放组术后TNF维持高水平,而HLA-DR术后持续降低;腹腔镜组IL-6术后1天高于正常,术后4天恢复术前水平,开放组术后维持高水平;2组术后1d外周血CD3、cD4细胞较术前均有不同程度的下降(P<0.05),术后4天腔镜组恢复术前水平,开放组仍明显低于正常。结论:研究结果证实腹腔镜手术对小儿机体免疫功能的损伤影响大大低于开放手术。

姜黄素@普朗尼克纳米胶束抑制前列腺癌PC-3细胞生长实验研究

目的:制备姜黄素@普朗尼克纳米胶束,观察其对前列腺癌PC-3细胞的体内外抗肿瘤活性。方法:溶剂挥发法制备姜黄素@普朗尼克纳米胶束,激光粒度仪测定胶束的粒径分布,HPLC法测定胶束的载药量、包封率及体外释药,观察姜黄素@普朗尼克纳米胶束的细胞摄取;MTT法评价姜黄素胶束的细胞毒性;并建立裸鼠荷PC-3肿瘤模型,观察肿瘤体积变化,计算肿瘤体积抑制率,评价姜姜黄素@普朗尼克纳米胶束的体内抗肿瘤活性。结果:姜黄素@普朗尼克纳米胶束平均粒径为322 nm,呈圆球状,载药量和包封率分别为(15.7±0.3)%和(89.4±1.2)%,72 h体外释药可达80%,具有一定的缓释效果;细胞试验显示胶束可显著增加姜黄素细胞内的聚集,抑制PC-3细胞的增殖;体内抗肿瘤研究显示,胶束显著减小肿瘤体积,有效抑制肿瘤生长,提示该纳米胶束具有一定的体内抗肿瘤作用。结论:姜黄素@普朗尼克纳米胶束具有一定缓释作用,可显著提高姜黄素在细胞内的蓄积水平,增强姜黄素对前列腺癌PC-3细胞的体外抗肿瘤作用,并呈现出一定的体内抗肿瘤效果。

高效液相色谱-质谱联用法测定姜黄素在大鼠体内的分布

目的:采用高效液相色谱-质谱联用法,测定姜黄素在大鼠血浆和组织中药物浓度随时间变化的分布规律及药物代谢动力学的特点。方法:大鼠口服灌胃姜黄素后,收集血浆和组织样品,通过有机溶剂乙酸乙酯分离提取,采用高效液相色谱-质谱联用法分析,选择C18色谱分析柱,乙腈(85%)和水(5%)为流动相,检测血浆和组织中的姜黄素药物浓度。质谱条件为电喷雾电离正离子方式(ESI+),多反应监测(MRM)模式。结果:姜黄素在血中的达峰时间为0.5 h,曲线下面积(AUC)为(236±6)ng·h/mL,峰值血药浓度为(91±5)ng/mL;心脏中的达峰时间为1 h,肝脏和肾脏中的达峰时间均为2 h。在心脏和肝脏中,曲线下面积(AUC)分别为(127±3)ng·h/mL和(166±5)ng·h/mL,均显著高于其他组织。结论:我们建立的高效液相色谱-质谱联用分析方法,可有效监测姜黄素在血中或组织器官中药物浓度随时间变化的规律,此方法简便、重复性高、灵敏度强。大鼠口服姜黄素后,可被吸收入血,组织器官分布广泛。

高海拔地区腹腔镜手术后并发深静脉血栓的防治

目的:探讨高海拔地区(>3000m,PO2<75%)腹腔镜术后对并发深静脉血栓的防治措施.方法:回顾分析在我院行腹腔镜手术的238例患者临床资料,分为处理组和对照组,处理组117例患者在围手术期采取积极的干预措施,而对照组121例患者给予常规处理,比较两组患者术后深静脉血栓形成(DVT)发生的情况.对13例发生DVT的患者应用抗凝、溶栓等综合治疗.结果:DVT的发病率在处理组为1.7%,而对照组为9.1%,两组相比差异有统计学意义(P<0.05),通过综合治疗,疗效优者10例,良者3例.结论:在高海拔地区,围手术期应积极采取预防措施,改善血液高凝状态,并发DVT后要早期诊断、早期治疗.

选择性绿激光汽化术治疗良性前列腺增生症的疗效和并发症

目的:探讨选择性绿激光前列腺汽化术(PVP)治疗良性前列腺增生(BPH)的疗效和并发症。方法:应用PVP治疗BPH患者204例。结果:术后最大尿流率增加,IPSS评分、QOL评分、残余尿量均较术前下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后出现的并发症有膀胱痉挛、尿路刺激症状、排尿困难、继发性出血、尿失禁、发热等,经治疗好转。结论:此方法操作简单、出血少、痛苦较小,适于高龄、高危患者。但仍有一定并发症,要妥善处理。

姜黄素提高人前列腺癌细胞系PC-3放疗敏感性

目的探讨姜黄素提高人前列腺癌细胞系PC-3放疗敏感性的分子机制。方法将细胞分为对照组、放射组、姜黄素组和姜黄素联合放射组,通过MTT,RT-qPCR和流式细胞仪等方法,观察PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果放射治疗和姜黄素组,其细胞存活率、细胞中PCNA mRNA和Cdc2 mRNA水平均低于对照组(P<0.05),而其S期和G_(2)/M期细胞比例、caspase-3活性、caspase-9活性以及细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05);姜黄素联合放射治疗组,其细胞存活率、细胞中PCNA mRNA和Cdc2 mRNA水平均低于放射组(P<0.05),S期和G_(2)/M期细胞比例、caspase-3活性、caspase-9活性以及细胞凋亡率均高于放射组(P<0.05)。结论姜黄素具有一定放射增敏效应,可显著提高放射治疗对人前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制效应。

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞体外生长的影响

目的探讨姜黄素通过Notch1途径影响前列腺癌PC-3细胞体外生长的分子机制。方法培养前列腺癌PC-3细胞,分别给予不同浓度的姜黄素处理,分别为500 nmol/L组、10μmol/L组、100μmol/L组和空白对照组。观察PC-3细胞增殖和凋亡的变化,并分析姜黄素对Notch1和PI3K mRNA水平的影响。结果不同剂量的姜黄素均可抑制PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,增加Caspase-3和Caspase-9活性(均P<0.05),并具有一定的剂量依赖性。PC-3细胞中Notch1和PI3K高表达,经过姜黄素处理的PC-3细胞,可以显著降低Notch1和PI3K mRNA水平和蛋白表达(P<0.05),体现一定的剂量依赖性。结论姜黄素通过Notch1途径抑制前列腺癌PC-3细胞的体外生长。

去卵巢骨质疏松山羊骨髓基质细胞成骨分化能力的研究

目的：研究在构建的去卵巢骨质疏松山羊动物模型中,骨髓基质细胞(MSCs)的生物学特性以及其成骨能力。方法：建立去卵巢骨质疏松山羊动物模型,使用全骨髓法获取去卵巢骨质疏松山羊(实验组)和正常山羊(对照组)MSCs,流式细胞仪检测实验组和对照组细胞用期及增殖指数(PI)；地塞米松诱导21d时油红O染色,观察成脂分化比例；成骨诱导液诱导14d,碱性磷酸酶(ALP)染色、检测ALP表达量。结果：对照组PI高于实验组；地塞米松诱导后实验组脂肪细胞比例明显高于对照组；成骨诱导第7d,对照组ALP的表达量明显高于实验组。结论：去卵巢骨质疏松山羊的MSCs增殖和成骨分化能力都降低,可能与骨质疏松症的发病机理有关。

施万细胞高效体外传代培养的实验研究

目的探讨获取大量高纯度施万细胞（SC）的体外培养纯化方法。方法取6-7 d SD乳鼠坐骨神经,立体显微镜下机械性剥除神经外膜与束膜,采用低浓度胰酶消化法和差速贴壁法去除成纤维细胞,阿糖胞苷与G enetic in联合应用进行SC纯化,牛脑垂体提取物（BPE）促进SC增殖。结果经形态学及S-100蛋白相关抗原免疫细胞化学染色鉴定证实所获得的SC状态良好,纯度较高,可达96%以上。结论本方法可以体外获取大量、高纯度的SC,为神经组织工程的研究奠定了实验基础。

小金县油松枯死原因分析及对策研究

针对近年来小金县油松枯死现象有进一步蔓延的趋势,本研究通过分析油松立地条件、病虫害发生情况对其健康的影响,结果表明病虫害及立地条件的综合作用是导致小金县油松枯死的主要因素。由于小金县油松立地条件较差,长势弱,给油松赤枯病、松针锈病、小蠹、天牛等病虫害提供了侵入的机会,导致当地油松树势衰退,甚至死亡。因此,应加强林分抚育,监测重点病虫害的发生。

盐亭县森林防火现状与对策

介绍了盐亭县森林防火的基本现状,从森林防火意识、林种、火源控制、防火经费等方面探讨了盐亭县且前森林防火存在的问题,并提出相应的对策。

miR-155通过p53/p21调控前列腺癌细胞周期

目的:探讨miR-155对前列腺癌细胞周期的影响及其分子机制。方法:通过转染anti-miR-155抑制前列腺癌DU145和PC-3细胞中miR-155水平后,采用流式细胞术观察细胞周期的变化,western blot和RT-PCR观察p53和p21蛋白及CDK2和cyclin蛋白和m RNA表达的变化。结果:与对照组相比,DU145和PC-3细胞转染anti-miR-155后,G2/M期细胞阻滞,S期细胞数比例显著增加(P<0.05),p53和p21蛋白和m RNA表达水平显著增加(P<0.01),CDK2和cyclin E蛋白和m RNA表达均显著降低(P<0.01)。结论:miR-155可影响人前列腺癌细胞的周期,可能与其调节p53、p21及其下游的CDK2和cyclin E的表达相关。

MiR-155增加前列腺癌化疗敏感性的体外研究

目的探讨miR-155提高前列腺癌化疗增敏作用的效应和分子机制。方法转染anti-miR-155,抑制前列腺癌DU145和PC-3细胞中miR-155水平,联合应用顺铂治疗,通过四甲基偶氮唑盐(microculture tetrazolium,MTT)法观察DU145和PC-3细胞的增殖水平,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,蛋白免疫印迹(western blotting)观察Cdc2和cyclin B1蛋白的表达,同时检测caspase-3和caspase-9活性的变化。取对数生长期细胞分对照组、顺铂处理组,anti-miR-155处理组,顺铂联合anti-miR-155处理组,每组n=6。结果与对照组相比,顺铂处理组,anti-miR-155处理组中DU145和PC-3细胞细胞增殖水平显著降低;引起G2/M期细胞阻滞,Cdc2和cyclin B1蛋白表达水平均降低;细胞凋亡率增加,caspase-3和caspase-9活性均提高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。顺铂联合anti-miR-155处理组的细胞增殖水平显著高于对照组;G2/M期细胞阻滞明显,Cdc2和cyclin B1蛋白表达的水平均显著低于对照组;而细胞凋亡率,caspase-3和caspase-9活性等均显著高于对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论抑制miR-155可增加前列腺癌细胞对顺铂的敏感性,提高顺铂的临床治疗效果,其机制可能与细胞周期和细胞凋亡的进程密切相关。