基于AIEgens增强的CRISPR/Cas12a荧光探针设计及在单核细胞增生李斯特菌快速检测中的应用

研制了一种基于聚集诱导发光染料(aggregation-induced emission fluorogens,AIEgens)增强的荧光探针,建立了基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)结合CRISPR/Cas12a高灵敏检测单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的新方法。利用阳离子AIEgens与双链DNA结合荧光极大增强的特性,构建了一种含双链以及单链DNA的探针。该探针5’末端携带一个荧光淬灭基团,双链DNA片段结合了多个AIEgens;利用crRNA可准确识别靶标序列并激活Cas12a反式切割活性的特点,切割荧光探针单链DNA产生荧光信号,从而实现LM高灵敏检测。将AIEgens增强型荧光探针与CRISPR/Cas12a结合,在无扩增情况下检测DNA片段的检出限为0.37 pmol·L^(-1),灵敏度较传统荧光探针高40倍。将以上检测体系与RPA反应联用,检测LM的检出限为3×10^(1) CFU·mL^(-1);该方法检测人工污染LM的牛奶以及金针菇样本,批内以及批间平均回收率介于91.14%~108.47%,变异系数小于12.71%。构建了一种基于AIEgens增强的CRISPR/Cas荧光探针,极大地提高了基于荧光信号输出的CRISPR/Cas方法检测灵敏度,实现了食源性致病菌的高灵敏检测。

Hβ沸石催化剂酸性及晶粒尺寸对2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸脱水闭环反应的影响

采用4种不同硅/铝比(n(SiO2)/n(Al2O3))β沸石经柠檬酸改性制备了4种催化剂。采用XRF、XRD、NH3-TPD和SEM等方法对催化剂进行了表征。并将它们用于2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸(BEA)脱水闭环合成2-乙基蒽醌(2-EAQ)反应,考察其催化性能。结果表明,在较低反应温度(230℃)下,4种催化剂样品的活性差别很大,n(SiO2)/n(Al2O3)=25的催化剂样品上反应物BEA的转化率为82.2%,而n(SiO2)/n(Al2O3)=38的催化剂样品上BEA的转化率仅为30.3%;在较高反应温度(258℃)下,4种催化剂样品的活性差别较小。结果还表明,β沸石的酸性质对催化剂的催化性能有一定影响,而催化剂晶粒尺寸对其催化性能影响较大,晶粒小,扩散容易,反应活性高;反之,活性较低。

2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸催化脱水闭环反应中Hβ沸石催化剂失活和再生的研究

研究了柠檬酸改性的Hβ沸石催化剂在2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸(BEA)脱水闭环合成2-乙基蒽醌(2-EAQ)工艺中的失活及再生性能。结果表明,催化剂经过多次重复使用,催化活性下降。通过乙醇洗涤催化剂再焙烧的方法,可以恢复催化剂活性。再生后的催化剂重复使用4次后,BEA的转化率仍然高达99.5%,2-EAQ选择性也高达99.4%。采用TG-DTA对乙醇洗涤前后失活催化剂进行表征,并结合电喷雾质谱API-ES和1HNMR对催化剂上积炭物种的组成进行了定性分析。

有机酸改性Hβ沸石催化剂上2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸脱水闭环合成2-乙基蒽醌

采用柠檬酸等有机酸对Hβ沸石样品进行改性,研究了改性后Hβ沸石样品在2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸(BEA)脱水闭环合成2-乙基蒽醌(2-EAQ)反应中的催化性能.采用X射线衍射、X射线荧光光谱、红外光谱、核磁共振和程序升温脱附方法对催化剂进行了表征.结果表明,有机酸改性没有破坏Hβ沸石样品的骨架结构,但其有序度和结晶度均有不同程度的降低,而且酸量明显减少;其中草酸改性后的催化剂脱铝严重.柠檬酸、酒石酸、苹果酸和丙二酸改性后的Hβ沸石样品在合成2-EAQ的反应中有较好的反应性能,以其为催化剂,BEA的转化率和2-EAQ的选择性均在95.0%以上.

柠檬酸浸渍改性H-β沸石对2-(4＇-乙基苯甲酰基)苯甲酸脱水合成2-乙基蒽醌反应的催化性能

采用浸渍法制备了柠檬酸改性的H-β沸石催化剂,采用X射线衍射、X射线荧光、红外光谱、核磁共振和程序升温脱附方法对催化剂进行了表征,并考察了催化剂对2-(4′-乙基苯甲酰基)苯甲酸(EBA)脱水合成2-乙基蒽醌(EAQ)反应的催化性能.结果表明,经柠檬酸改性没有破坏H-β沸石的骨架结构,但其酸量明显减少.柠檬酸浸渍改性后未经水洗的催化剂上有较多的非骨架铝及柠檬酸残留;水洗至中性的催化剂在EBA脱水合成EAQ反应中有较好的催化性能,EBA转化率可高达96.5%,EAQ选择性可高达96.0%.

化归方法在数学中的应用

一、化归方法的含义所谓"化归",可理解为转化和归结的意思,数学方法论中所论及的"化归方法",是指把待解或未解决的问题,通过某种转化过程,归结到一类已经解决或比较容易解决的问题去,最终求得原问题之解答的一种手段和方法。为理解化归方法的具体含义,我们看下面两个例子:

血汗症患儿1例护理体会

血汗症是指在无破损的皮肤黏膜表面有发作性溢血现象,中医又称＂肌衄＂、＂血剑＂、＂汗血＂等;西方宗教称之为＂圣痕＂。该病极为罕见,迄今文献中仅有80例报道[1],且多为19世纪前病例,其可靠性较低,因本病需排除自残、毛细血管扩张或色汗症的可能性[2,3]。21世纪以来,

如何增强课堂提问的艺术性

课堂提问是教学过程中的有机组成部分,是推进和发展整个教学过程的重要动力。它具有强化知识信息的传输、评价学生学习的状况、调控课堂教学的过程、激发思维活动的开展、沟通师生感情的交流等多项功能。

加强学生的数学逆向思维的培养

发展数学思维是中学阶段数学教学中的一项重要的任务，对逆向思维的培养更为重要。笔者从事二十多年的中学数学的教学工作，对如何培养学生的逆向思维能力，总结了一些经验。

浅谈煤矿信息化建设存在的问题与对策

煤矿信息化建设要坚持"以人为本"的思想,以徐州某煤矿信息化建设为例,阐述了煤矿信息化建设的方法和途径。提出煤矿信息化建设中存在的问题,并进行分析和解决。

关于提高异地矿井调度员队伍综合素质的几点思考

随着煤炭企业外出创业步伐的不断加快,新产生的异地矿井调度员队伍综合素质出现了良莠不齐的现象。如何提高异地煤矿调度员队伍综合素质,成了煤炭企业积极适应经济新常态的重要工作之一。

汽车仪表板搪塑表皮的质量控制

通过研究汽车仪表板搪塑表皮生产过程中出现的质量问题,发现了造成搪塑表皮缺陷的根本原因。进而通过对搪塑设备的改进和搪塑工艺的调整,解决了搪塑表皮质量问题,获得了用户的认可,取得了显著的经济、社会效益。

大型风循环式搪塑机的自主研发

针对国内搪塑机主要依赖进口的局面,在分析搪塑工艺技术的基础上,自主研发了一种大型风循环式搪塑机,其特点是对模具加热和冷却均采用风循环的方式。对搪塑机的预热炉、转料装置、塑化炉和冷却室等关键部件进行了结构设计,包括在预热炉中采用数字化燃烧管理器及对炉内风管进行仿形设计以实现大型模具在炉内热处理的均匀性,在转料装置中采用一个大孔进、多个小孔出的旋转气动接头以有效改善气缸的敲击力,在塑化炉中采用4风道72风管以实现对模具充分均匀加热,在冷却室中冷凝器的下方设计冷凝水收集装置以避免在背离模具的搪塑表皮B表面上形成薄膜型气泡缺陷。该设备可完成10套模具的共线生产,生产节拍为90 s/张,满足了中高档汽车仪表板的生产质量要求。

对高等职业学校数学教学的思考

本文指出了当前高等职业学校数学教学中存在的一些问题。通过教学实践，从培养学生的“问题意识”、采用问题式教学方法着手，充分体现数学课的核心思维，并取得了良好的教学效果。

谈小学英语课堂教学中的新课导入

在小学英语教学中,学生掌握知识的关键是学会用英语进行交流和表达,但是课堂教学中如何导入新课对于小学生来说非常重要。小学英语课程内容广泛,但又有许多困难与障碍,所以如何导入是一个十分重要的环节。在进行新课导入时我们应把握以下几个方面。“授人以鱼不如授人以方”,良好的导入能让学生在不知不觉中掌握知识,并能顺利地完成课堂教学任务。在课堂教学中,如果教师对新知识的导入方式设计得巧妙精当,教学效果便事半功倍。情景导入、游戏导入、话题导入、谜语、儿歌导入、设疑导入等给学生营造出一种轻松、愉快的学习氛围,在这样的氛围中,学生情绪高涨、思路开阔、思维敏捷,从而会大大增强学习效果。

农村集体产权制度改革清产核资工作要点分析

本文主要从农村集体产权制度改革清产工作发展概况角度出发,阐述了相关工作的实施现状,论述了改革清产核资工作要点,并从不同角度进行详细分析,从而为农村集体产权制度改革清产核资工作要点研究提供参考。

“智能制造”探索研究

"中国制造2025"的主攻方向是"智能制造",确定主题为"坚持创新驱动、智能转型、强化基础、绿色发展,加快从制造大国转向制造强国",并提出"三步走"路线:2025年迈入制造强国行列;2035年制造业整体达到世界制造强国阵营中等水平;2050年达到制造强国前列[1]。作为汽车内饰生产制造企业,"智能制造"也是我们未来几年大力发展的方向。本文主要针对国内外制造企业的现状,对如何实现生产的"智能制造"进行探索研究。

单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备与鉴定

以单核细胞增生李斯特菌细胞碎片免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法成功筛选获得2株稳定分泌抗LM的单克隆杂交瘤细胞株4A7、4H11。抗体效价为1∶160 000以及1∶20 000,亚型为IgG1、IgG2a,Dot-ELISA结果表明4A7和4H11单克隆抗体具有很好的属特异性,Western blot分析表明4A7、4H11抗体分别与单核细胞增生李斯特菌62 kDa以及32 kDa外膜蛋白抗原表位结合,胶体金免疫电镜实验进一步确证以上抗体可有效识别单核细胞增生李斯特菌细胞表面抗原。

美学方法在中学数学教学中的应用

人们经常从逻辑的角度对数学发现的问题进行讨论，但除了逻辑的成分以外，数学发现中还包含直觉的因素。它是人脑对数学对象及其关系结构的某种直接的领悟或洞察。直觉的产生是不可能预期的，但是直觉能力可以培养。这其中的重要环节之一就是应当培养对数学美的鉴赏能力。本文就如何运用美学方法，谈谈在中学数学教学中的应用。