U71Mn钢轨在中性NaCl溶液中的初期腐蚀行为探析

为研究钢轨腐蚀行为与NaCl溶液浓度及腐蚀时间的关系,以U71Mn钢轨为对象,采用全浸试验和电化学测试方法探究了钢轨材料浸泡在1.0%、2.0%、2.5%、3.5%、4.0%和5.0%不同浓度的中性NaCl溶液中144 h及在中性3.5%NaCl溶液中浸泡12、48、96、144、192和288 h的初期腐蚀行为和机理。结果表明:初期钢轨材料的平均腐蚀速率与NaCl浓度和浸泡时间均呈正相关关系。随着NaCl浓度的增加,钢轨试样的E_(corr)从-0.651 V负向移动至-0.717 V,J_(corr)从5.71μA/cm_(2)增大至67.48μA/cm_(2);随着腐蚀时间的延长,钢轨试样的E_(corr)从-0.692 V负向移动至-0.720 V,J_(corr)从7.54μA/cm_(2)增大至74.59μA/cm_(2),其中腐蚀产物γ-FeOOH的还原会破坏原有稳定的锈层结构,最后造成腐蚀的加速。

小鼠骨髓基质干细胞与脱细胞基质骨联合培养的实验研究

目的 研究小鼠股骨骨髓基质干细胞 (marrow stromal stem cells,MSCs)在同种异体脱细胞基质骨(acellular extra cellular matrix,AECM)上的生长情况。 方法 昆明种小鼠 8只共 16侧股骨 ,用 Triton X- 10 0处理后获 AECM。另将 1月龄昆明种小鼠 2 0只双侧股骨切断 ,用 4 ml PBS反复冲洗骨髓腔后 ,离心分瓶 ,取 MSCs进行原代培养 ,以 5× 10 6 /ml浓度将原代培养的小鼠 MSCs种植于 AECM中 ,进行体外联合培养 7d,通过相差显微镜、光镜、电镜等方法观察细胞在材料中的生长情况。 结果 在 AECM的孔隙中 ,有成团蓝染的 MSCs核团 ,周边部分大于中间部分 ,且靠近细胞培养液层面的 AECM中蓝染的核团数量明显比远离细胞培养液的层面多。 AECM具有良好的孔隙率 ,MSCs可在 AECM上良好生长。 结论 AECM可作为构建组织工程骨的一种较好的支架材料。

小鼠骨髓基质干细胞的培养及常见的组化染色方法

目的 :研究小鼠骨髓基质干细胞的培养条件及其成为组织工程种子细胞的可能性。方法 :取小鼠股骨骨髓进行骨髓基质干细胞的原代培养 ,通过相差显微镜、光镜及扫描电镜观察 ,了解骨髓基质干细胞的生长情况及其特点。结果 :刚接种的干细胞散在分布 ,胞体透亮 ,1～ 2d后开始贴壁 ,1周后开始形成成纤维细胞样集落 ,大约2周长成单层 ,碱性磷酸酶染色阳性 ,细胞可分泌胶原 ,可形成钙结节。结论 :小鼠骨髓基质干细胞可在体外进行培养增殖并具有组织工程种子细胞的特点。

依达拉奉对脑缺血大鼠自由基清除的可视化评价

目的对依达拉奉清除自由基的效果做即时可视化评价。方法通过使用·O2-荧光探针(MitoSOXTM)或·OH荧光探针(HPF)标记大鼠脑表区域神经细胞,共焦点激光显微镜活体观察在大鼠缺血(10min)再灌注(30min)过程中,脑表区域·O2-或·OH产生的情况,比较模型对照组与依达拉奉治疗组(3.0mg/kg缺血前静脉给药)之间·O2-或·OH产生情况的差异,对依达拉奉的自由基(·O2-,·OH)清除效果进行可视化评价。结果显示缺血开始3min后,·O2-及·OH产生开始,并一直持续增加到再灌注后10min达到峰值;依达拉奉有效清除·OH产生,而对·O2-的清除效果不明显。结论依达拉奉在缺血期及再灌注早期能有效地清除·OH的生成。

与NRL相互作用所必需的OPTN结合区域的确定

背景视神经蛋白（OPTN）基因是青光眼和肌萎缩性脊髓侧索硬化的致病基因，在眼部视网膜组织中的表达最多。我们先前的研究分离出与OPTN相互作用的蛋白质，确定其中之一为视网膜色素变性的致病基因——碱性亮氨酸拉链（bZIP）转录因子，即神经视网膜亮氨酸（NRL）拉链，并证实OPTN和NRL两蛋白间存在相互作用。目的确定与NRL相互作用所必需的OPTN蛋白结合区域。方法构建一系列带FLAG标签的OPTN部分片段缺失质粒，分别与带血凝素标记的NRL（HA—NRL）共转染HeLaS3细胞。用抗HA和抗FLAG标签抗体分别对细胞质和细胞核提取物进行免疫共沉淀和Westernblot检测，分析两蛋白质问的相互结合方式，以确定NRL与OPTN蛋白的结合区域。结果在OPTN的第一、第二和第三缺失区域质粒转染细胞的细胞核组分中均检测出血凝素标记的NRL（HA-NRL）免疫共沉淀条带，但在第四缺失区域质粒中不产生此HA—NRL条带。从所有缺失质粒及全长OPTN质粒转染细胞的细胞质组分中均未观察到NRL条带。结论本研究进一步证实OPTN和NRL在HeLaS3细胞核内的相互作用，并明确其蛋白结合区域。在共表达NRL和OPTN的HeLaS3细胞中，Flag-OPTN可与HA-NRL相互结合，且OPTN的尾端区域（423-577）是结合NRL所必需的。

EB病毒编码的BARF1对GES-1细胞的影响

目的探讨爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码的BARF1基因对人胃上皮细胞(GES-1)增殖、迁移及细胞周期分布的影响。方法将pIRES-EGFP/BARF1重组质粒、pIRES-EGFP空载体转染GES-1细胞,通过G418筛选,获得稳定表达pIRES-EGFP/BARF1及pIRES-EGFP的GES-1细胞。在荧光显微镜下观察转染与未转染组细胞生长状况;通过逆转录PCR(Reverse Transcription-PCR,RT-PCR)检测转染细胞中BARF1基因表达情况;通过细胞计数及CCK8法评估转染与未转染三组细胞的增殖能力;通过免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色法评价不同组别细胞周期蛋白Cyclin D1的表达情况;应用划痕实验分别对稳定转染BARF1组和空载体组GES-1细胞的迁移效率进行分析评价;应用流式细胞仪检测与分析细胞周期的分布情况。结果获得稳定表达pIRES-EGFP/BARF1、pIRES-EGFP的GES-1细胞模型;稳定转染BARF1组的细胞增殖能力高于未转染组及转染空载体组,并且稳定转染BARF1组S期显著延长;稳定转染BARF1组GES-1细胞的迁移能力比转染pIRES-EGFP空载体组得到明显提升;细胞周期蛋白Cyclin D1集中表达在稳定转染BARF1组的GES-1细胞核内。结论作为EBV编码的癌基因BARF1能够促进人胃上皮细胞GES-1增殖、迁移及分裂,抑制细胞凋亡,促进胃上皮细胞的恶性转化。

南京地区成人上呼吸道感染患者鼻病毒分子流行病学特征分析

目的分析南京地区成人上呼吸道感染(upper respiratory tract infection,URTI)患者人鼻病毒(human rhinovirus,HRV)的感染特征及流行特征。方法收集2021年10月—2022年9月南京地区成人上呼吸道感染患者的流行病学资料,采集临床标本使用荧光定量逆转录聚合酶链反应开展14种常见呼吸道病毒的检测;对HRV阳性标本VP4/VP2编码区基因扩增测序并做进化分析。结果共收集399份上呼吸道感染患者的咽拭子样本,呼吸道病毒的总体阳性检出率为28.07%(112/399),其中HRV的检出率最高,达到9.52%(38/399);38株HRV阳性标本中37株成功测序,共鉴定为3种基因型,分别为13株HRV-A、14株HRV-B、10株HRV-C,涉及25种血清型;其中3种HRV的基因型呈现交替流行或共流行。结论HRV是2021年10月—2022年9月南京地区成人上呼吸道感染者的主要病原体,且HRV-A、B、C三种基因型共流行或交替流行。

巴曲酶抑制黑质纹状体损伤后的细胞凋亡并改善行为学功能

目的研究巴曲酶对黑质纹状体通路损伤的保护作用及可能机制。方法制备小鼠黑质纹状体通路损伤模型并给予巴曲酶腹腔注射,采用行为学方法观察运动和神经功能的变化;FJC染色观察神经元凋亡变化;免疫组化染色观察络氨酸羟化酶的变化。结果巴曲酶具有改善脑损伤后神经功能损伤的效果,急性期减少纹状体神经元凋亡,增加黑质中络氨酸羟化酶阳性细胞数目。结论巴曲酶在黑质纹状体通路损伤中具有神经保护作用,并具有临床应用潜在价值。

2021年冬季江苏省常熟市成年人患者呼吸道鼻病毒感染分析

目的了解2021年冬季江苏省常熟市成年人呼吸道感染者的病毒流行情况和鼻病毒的感染种类及型别。方法采集江苏省常熟市门诊与呼吸道感染住院成年人患者的咽拭子样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法开展15种常见呼吸道病毒检测;扩增鼻病毒VP4-VP2基因测序,以MEGA 7.0软件对获取序列进行系统发育分析与同源性分析。结果共收集咽拭子样本333份,检出病毒阳性样本120份,阳性检出率为36.04%,其中人鼻病毒(human rhinovirus,HRV)检出样本数占阳性样本的28.33%(34/120),检出率最高,其次是腺病毒22.50%(27/120)和乙型流感病毒15.83%(19/120)。以单一病毒感染为主,占83.33%(100/120);混合感染以2种病毒为主80%(16/20),3种病毒共感染仅有4份。34份鼻病毒感染样本中成功扩增出32条条带,比对分析发现涉及20种血清型,分属于HRV-A(19株)、HRV-B(9株)和HRV-C(4株)3种。结论HRV是2021年冬季江苏省常熟市成年人呼吸道感染的主要病原体之一,存在HRV-A、HRV-B、HRV-C 3种型别共同流行特点,以HRV-A型为其主要流行株型。

2021年安徽蚌埠秋冬季肺炎患者鼻病毒检测及基因特征分析

目的了解人鼻病毒(human rhinovirus,HRV)在成人住院肺炎患者中的检出率及基因特征。方法采集2021年9~12月安徽蚌埠某医院住院肺炎患者咽拭子,以实时荧光定量PCR方法进行14种常见呼吸道病原体检测。巢式PCR法扩增HRV阳性样本的VP4/VP2编码区基因,扩增产物测序。使用MEGA7.0软件构建HRV-VP4/VP2基因序列系统发育树。结果共采集住院肺炎患者咽拭子146份,其中检出阳性样本52份,检出率为35.62%(52/146),HRV、腺病毒、冠状病毒OC43和乙型流感病毒检出率位居前四位。HRV共检出23例,占检出病毒样本的44.23%(23/52),其中HRV混合感染有9例(39.13%,9/23);结合临床数据分析,HRV混合感染组白细胞、中性粒细胞计数、合并高血压、糖尿病、辅助通气比例以及不良预后比例均高于单一感染组(P<0.05)。系统发育树结果显示本研究的HRV感染主要以A组与B组为主。结论HRV是2021年安徽蚌埠秋冬季成人肺炎患者中最常见的病原体,其中HRV-A与HRV-B为优势株。HRV与其他呼吸道病毒混合感染易出现在合并高血压和糖尿病的患者,临床治疗中更需要辅助通气,易出现不良预后。

江苏省常熟市一起聚集性儿童上呼吸道感染疫情的病原学调查

目的分析2021年9月江苏省常熟市某幼儿园一起急性上呼吸道感染聚集性疫情发生的原因。方法收集2021年9月江苏省常熟市某幼儿园急性上呼吸道感染患儿的临床信息,采集患儿咽拭子样本。采用实时荧光定量PCR对样本进行18种呼吸道病原体筛查。利用巢式PCR法对高检出率的鼻病毒进行分型片段扩增及测序。使用MEGA 7.0软件对测序结果进行序列比对,并构建系统进化树。结果此次聚集性急性上呼吸道感染疫情主要临床症状为流涕、咽痛。共采集患儿咽拭子样本51份,其中男童24份、女童27份。18种呼吸道病原体筛查结果显示,检出率为80.39%(41/51),其中单一病毒检出率为64.71%(33/51),混合病毒检出率为15.69%(8/51)。检出的单一病毒中鼻病毒占比最高,为42.43%(14/33)。其他病毒占比依次为细小病毒B19占18.18%(6/33),博卡病毒为15.15%(5/33),冠状病毒229E为6.06%(2/33),人偏肺病毒、乙型流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒OC43和NL63均为3.03%(1/33)。7例鼻病毒与其他病毒混合感染。对21份鼻病毒阳性样本进行VP4-VP2基因片段扩增和测序,12株成功分型,均为A组,其中血清型A19、A22、A41各1株,血清型A49共9株。结论本次急性呼吸道感染病例的咽拭子中检出多种呼吸道病毒,以鼻病毒居多,血清型A49与此次聚集性病例的发生密切相关。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的腺病毒感染及基因特征分析

目的了解慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者的呼吸道病毒感染情况及腺病毒感染特点。方法收集2020年11月至2021年4月安徽省蚌埠市某三甲医院AECOPD住院重症患者咽拭子,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法筛查16种常见呼吸道病毒,对腺病毒(ADV)阳性样本扩增腺病毒六邻体基因,构建进化树。结果AECOPD患者呼吸道样本中呼吸道病毒检出率为38.38%(109/284),其中,ADV检出率最高,为27.81%(79/284)。重症患者ADV感染以C1型为主,同时,有B、C和D等多个亚型存在。结合临床数据,AECOPD患者中,感染ADV的较未感染ADV的病程长、预后差。结论临床应对AECOPD患者的呼吸道病毒感染情况进行有效监测,以提高诊断和治疗效果。

2019年冬季青岛市手足口病患者感染柯萨奇病毒A组16型基因特征分析

目的 调查2019年冬季青岛市妇幼医院和中心医院手足口病(HFMD)住院患儿病原感染情况,分析柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)基因进化特征。方法 收集2019年冬季青岛地区HFMD住院患儿104份咽拭子,采用实时荧光定量PCR进行肠道病毒核酸检测。使用肠道病毒通用分型引物扩增阳性样本,扩增序列测序后进行Blast比对。设计Cox A16 VP1全长引物,通过半巢式PCR扩增测序,使用DNAStar进行核苷酸和氨基酸的基因分析,使用MEGA软件构建进化树。结果 HFMD住院患儿的咽拭子样本肠道病毒总体阳性率为57.7%(60/104)。其中Cox A16阳性率为30.8%(32/104),Cox A6阳性率为26.9%(28/104)。对32份Cox A16阳性的样本进行VP1区全长扩增、测序并进行比对和同源性分析,其核苷酸同源性为87.0%~100%,氨基酸同源性为98.3%~100%。系统进化分析表明,32株Cox A16中有17株为Cox A16 B1a基因型,另外15株为Cox A16 B1b基因型。结论 引起2019年冬季青岛地区住院HFMD的病原体之一是Cox A16,且同时流行Cox A16的B1a和B1b型。

PBL教学法在解剖学课程中应用模式的探索和思考

恩格斯说没有解剖学就没有医学,精辟地论述了解剖学在医学中的重要地位。可见,学好解剖学为后续医学课程的学习奠定必要的基础尤为重要,但是由于人体解剖学内容繁多纷杂,偏重记忆,学生听起来索然无味,记起来尤为困难,记忆效果差,导致一些学生学习劲头不足,甚至出现厌学现象,因而成绩不佳,严重影响了教学质量。