Journal Club教学法用于临床药学专业硕士研究生理论教学实践

目的探讨Journal Club教学法在临床药学专业硕士研究生理论教学中的应用效果。方法选取重庆医科大学2022年的2020级(4名)、2021级(6名)临床药学专业硕士研究生为研究对象。课前,2个年级的学生分别以小组为单位,围绕与“临床药物治疗学前沿”授课内容相关的2个临床用药问题,通过设定关键词、检索文献、分析评价、证据分级,制订最优用药方案;课中以幻灯片形式分享经典文献,并对最优用药方案进行循证药学证据分析。采用匿名问卷调查法统计对该教学法8个条目完全赞同、基本同意及否定的人数,并计算占比;授课教师对学生撰写的综述进行评分(90~100分、80~89分、70~79分、60~69分分别为优、良、中、及格);统计学生通过本轮教学的论文发表情况。结果2020级、2021级分别发放调查问卷4份、6份,均全部回收,有效回收率均为100.00%;对所有调查项目均完全赞同或基本同意的分别有29人次、47人次。期末考试成绩为优、良、中的,2020级分别有2名(50.00%)、1名(25.00%)、1名(25.00%),优良率为75.00%;2021级分别有2名(33.33%)、3名(50.00%)、1名(16.67%),优良率为83.33%。2021级学生有1篇综述发表在科学引文索引(SCI)期刊上。结论Journal Club教学法有助于提高学生的文献查阅能力和英文阅读能力,可调动自主学习的积极性,增强独立思考能力和科研创新意识。

CpG-N ODN对CpG-S ODN诱导hPBMC释放TNF-α的抑制作用

目的明确抑制性CpG ODN 208(CpG-N ODN)对刺激性CpG ODN 1826(CpG-S ODN)诱导单核/巨噬细胞分泌TNF-α的影响,为通过拮抗细菌DNA达到防治脓毒症的目的提供实验依据。方法选用本室前期筛选出的对CpG-S ODN活化RAW 264.7细胞有抑制作用的CpG-N ODN,观察其对CpG-S ODN诱导hPBMC释放TNF-α的影响;应用流式细胞术观察CpG-NODN对CpG-S ODN与hPBMC表面结合和内化的影响。结果浓度比为1∶1的CpG-N ODN对刺激性CpG-S ODN诱导hPBMC分泌TNF-α具有抑制作用,并呈一定时效关系;CpG-N ODN对CpG-S ODN在hPBMC细胞表面的结合和内化具有抑制作用。结论CpG-N ODN对CpG-S ODN活化hPBMC具有抑制作用,这个作用可能与其影响hPBMC的表面结合和内化CpG-S ODN有关。

胸腺素α1的免疫调节活性及临床应用进展

胸腺素α1(Tα1)是从胸腺第五组分(TF5)中提取并纯化具有生物活性的酸性多肽,作为免疫增强剂,可以调节免疫系统的许多环节,包括活化NK细胞,T细胞,单核和巨噬细胞,还可以刺激骨髓造血细胞的增殖分化;其中最主要的是对T细胞分化的调节。现在主要用于治疗:乙肝、丙肝等感染性疾病;非小细胞肺癌、黑素瘤、肝癌、胃癌等恶性肿瘤;自身免疫性疾病,如类风湿关节炎、重症无力、系统性红斑狼疮等;以及免疫缺陷病的治疗。在广泛的临床应用中,使用Tα1不良反应非常少见,但在极少数病例也有不良反应的发生。因此在临床应用中,应严格监控,一旦发生不良反应,应立即停药。

创新性第二课堂活动辅助药理学教学的探索与实践

传统药理学教学侧重理论知识传授,课堂教学枯燥,难以调动学生的学习兴趣和热情,不利于学生创新能力和人文知识的培养。因此,采用多种方法和手段,注重创新教育和人文教育的实施,培养医药学创新性人才是医药教育发展的方向和目标。第三军医大学药理教研室在第二课堂中将药理学相关知识以情景剧形式进行全新的组织和演绎,通过寓教于乐的表演和人文教育理念的实施,充分调动了学生的学习积极性,培养学生的创新性思维并巩固理论知识,培养学生良好的医德、人际交往能力和团队精神。总之,创新性地将药理知识以故事性、表演性的形式重新进行展现,并将其作为理论课堂教学的延伸和补充,寓教于乐,学生学习的积极性、主动性、参与性和合作性都得到了充分的调动,对培养学生的思维能力、实践能力和创新意识以及培养学生的人文素养等方面有着积极的意义。

青蒿琥酯通过增加抗菌药物在菌体内的聚集增加细菌对β-内酰胺类药物的敏感性

耐甲氧西林金葡菌（MRSA）对多种抗菌药物均表现出高耐药性，由其导致的感染病死率高。因此，为了寻找到更加有效的抗MRSA药物或逆转MRSA的耐药性，MRSA的耐药性及耐药机制等相关研究备受重视。我们发现青蒿琥酯（Artesunate，

抑制性寡核苷酸（CpG-N ODN）拮抗刺激性寡核苷酸（CpG-S ODN）的作用及其机制研究

目的：寻找有效的抑制性CpG ODN，并研究其对刺激CpG ODN（CpG-SODN）1826诱导细胞分泌TNF-α的影响及其作用机制和对脓毒症小鼠的影响。方法：选用本室前期采用生物信息学技术合成的21种CpG ODN，筛选出对CpG-SODN诱导hPBMC释放TNF-α具有抑制作用的CpG-N ODN；采用亲和传感技术观察该CpG-N ODN与CpG-S ODN间的相互结合；采用流式细胞技术观察CpG-N ODN对的影响；并采用RT-PCR技术和EMSA技术观察CpG-NODN对CpG-SODN诱导的hPBMC TLR9表达的影响以及NF-xB活化的影响。同时观察了CpG-N0DN对脓毒症小鼠的保护作用，并检测小鼠血清TNF-α水平。结果：从前期合成的CpGODN中成功的筛选出了能有效抑制CpG-SODN诱导hPBMC释放TNF-α的CpG-NODN，并发现当浓度比为3：5，4：5，和1：1时均能有效抑制CpG-SODN对hPBMC的刺激活性，其中浓度比为1：1的CpG-NODN对刺激性CpG-SODN诱导hPBMC分泌TNF-α抑制作用最强，并呈一定时效关系；应用亲和传感技术可以看出CpG-SODN与CpG-NODN没有直接结合作用；同时CpG-NODN还可以明显抑制hPBMC表面结合和内化CpG-SODN，并抑制CpG-SODN刺激的hPBMC TLR9 mRNA的表达及NF-xB的活化。同时CpG-NODN还可有效的降低由于细菌DNA导致的小鼠死亡，并降低小鼠小鼠血清TNF-α水平。结论：成功筛选出有效的CpG-N0DN，该CpG-NODN对CpG-S ODN活化hPBMC具有抑制作用，这种抑制作用可能与影响hPBMC表面结合和内化CpG-S ODN，抑制TLR9表达，进而抑制NF-xB的活化有关。同时该CpG-NODN对脓毒症小鼠的具有保护作用。

CpG ODN107对人脑胶质唐放射增敏作用及其机制研究

目的：探讨含CpG的寡脱氧核苷酸（ODN）单独及与β射线联用对人脑胶质瘤的治疗作用及其初步机制。方法：MTT，细胞迁移实验观察CpGODN107对CHG-5细胞15射线照射后的生长、细胞迁移的抑制作用；Griess法检测CpGODNl07对CHG-5细胞释放NO的影响；ELISA法检测NF—κB、TNF-α、IL-6、INF-γ活化情况；流式细胞技术观察肿瘤细胞周期的变化情况；裸鼠移植瘤模型上观察CpGODN107在体内的放射增敏作用。结果：CpGODN107能显著提高CHG．5细胞对13线的放射敏感性，可增强13射线对CHG-5细胞的生长、细胞迁移的抑制作用，放射增敏比达到1．88；在荷瘤裸鼠移植瘤模型中，CpGODN107（100ug／只）可明显抑制肿瘤组织的生长，显著增加β射线对肿瘤组织的抑制作用。在给予CpGODN107并13射线照射后，CHG-5细胞的NF-κB明显活化增强，分泌NO明显增加，但是TNF—α、IL-6、IFN—γ并没有明显变化。细胞周期检测显示经CpGODN107处理后的β射线照射后的细胞大量的阻滞于G1期。结论：CpGODN107能显著提高CHG-5细胞对β线的放射敏感性，并且．这种放疗增敏作用与CpGODN的免疫刺激作用无关，是由于增加了肿瘤细胞本身释放NO，导致肿瘤细胞在G1期的阻滞造成的。

药学专业药理学课程中PBL教学案例设计

基于问题导向的教学模式是培养学生自觉、主动、创造性学习的有效方式。该教学模式的重要组成元素是教学案例,文章从案例设计理念和设计原则两个重要方面,结合实践对如何撰写适用于药学专业的PBL教学案例进行了介绍。

PBL教学法在心血管药理模块教学中的体会

药理学是联系医学与药学、基础医学与临床医学的桥梁课程,其中心血管系统药理内容历来是药理学教与学中的重点和难点。为提高心血管系统药理模块教学效果,将目前国际上广泛流行的PBL教学法在药理学教学实践中进行了大量的尝试,并将运用PBL教学法在药理学心血管药理模块教学中的尝试与体会进行总结。

人TLR9真核表达载体在HEK293T细胞中的表达

目的构建人Toll样受体9(TLR9)全长序列与绿色荧光蛋白GFP的重组质粒,观察融合蛋白在HEK293T细胞内表达并检测其应答CpG DNA的能力。方法PCR法扩增TLR9全长,限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切绿色荧光真核表达质粒pcDNA3/GFP和TLR9全长,构建重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP,脂质体转染人胚肾293T细胞(HEK293T),荧光显微镜下观察绿色荧光融合蛋白在细胞内的表达与分布;将重组质粒与NF-κB荧光素酶报告质粒pGL2-luc共转染HEK293T细胞,CpG DNA(10mg/L)刺激后,化学发光法检测细胞内荧光素酶活性。结果成功构建pcDNA3-TLR9/GFP质粒,经酶切及测序分析证实载体构建正确;转染细胞后,在荧光显微镜下观察到TLR9/GFP融合蛋白大量表达;重组质粒与pGL2-luc共转染细胞,应用荧光报告系统检测显示,CpG DNA刺激后荧光素酶活性显著高于生理盐水对照组(P<0.01)。结论重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP在HEK293T细胞中表达的TLR9/GFP绿色荧光融合蛋白,能够识别CpG DNA并诱导增加胞内NF-κB转录活性。

临床医学八年制药理学PBL教学模式的思考与探索

作为"授人以渔"的教学方法,以问题为基础的学习(PBL)符合八年制培养高层次、高素质目标的要求。国内部分医科院校实施了PBL教学模式,实施PBL教学模式主要有2种方式:(1)在现有医学课程外,单独开设一门PBL课程;(2)在某一门医学课程中选择个别章节实施PBL教学模式。作者综合这两种方式的优势,重新整合药理学教学内容,从师资培训、教学材料准备、硬件准备、学生培训及课堂教学实施等方面进行改革,实施了单一课程、全程式PBL教学模式,结果证明,教学效果良好,值得推广应用。

经IDDS联合给药治疗难治性癌痛患者的药学监护

为探讨疼痛专科临床药师在植入鞘内药物输注系统(intrathecal drug delivery systems,IDDS)治疗难治性癌痛病例中的作用,临床药师参与1例植入IDDS治疗难治性癌痛患者的临床药物治疗,评估患者疼痛的性质,协助临床医师从镇痛药物的遴选、药物剂量、药品不良反应、相互作用等方面制定个体化用药方案,密切关注患者的镇痛方案疗效及并发症状,为临床提供药物合理性建议,为患者实施药学监护并提供用药教育。治疗结果显示,患者疼痛控制满意,药物治疗全面优化,未发生严重药物不良反应,说明疼痛专科临床药师通过对癌痛患者进行动态、全面的疼痛评估,参与镇痛方案制定及不良反应监测,可从合理用药的角度协助优化鞘内镇痛用药方案,提高患者用药依从性,保障患者用药安全。

阿片受体激动-拮抗剂的镇痛作用及不良反应研究进展

阿片受体激动-拮抗剂是一类对阿片受体兼有激动和拮抗作用的药物。已经上市的这类药物主要包括喷他佐辛、布托啡诺、纳布啡、丁丙诺啡和地佐辛等。与吗啡、芬太尼等单纯阿片受体激动剂相比,该类药物具有镇痛效果较强,成瘾性较弱,咳嗽、瘙痒以及呼吸抑制等副作用少的优点。由于阿片受体激动-拮抗剂在不同内源性阿片受体(μ、κ、δ等)间具有不同的倾向性作用,基于不同受体亚型,可在情绪影响、药物依赖方面表现出不同甚至相反的作用,因此合理地使用这类药物可以有效地减少阿片类药物导致的不良反应以及药物滥用的发生。随着学界对内源性阿片各受体亚型及相关药物研究的深入,阿片受体激动-拮抗剂在改善阿片类药物不良反应和提高患者药物依从性方面有着广泛的应用空间和前景。

青蒿琥酯增加人脑胶质瘤细胞CHG-5对β射线的敏感性

目的从青蒿素及其衍生物中筛选出对人脑胶质瘤细胞CHG-5及U87具有较好放射增敏效果的药物,并初步探讨其放射增敏机制。方法①采用MTT法测定上述青蒿素衍生物对2株胶质瘤细胞的IC50,观察以20%IC50浓度的青蒿素衍生物联合β射线对CHG-5及U87的放射增敏效果,从中筛选出放射增敏效果最好的药物;②通过克隆形成法计算目标药物的放射增敏比;③划痕法观察它对β射线照射后CHG-5细胞迁移的影响;④检测胞内还原型GSH水平;⑤流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布情况。结果青蒿素(artemisinin,ART)、双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)、青蒿琥酯(artesunate,AS)对CHG-5的IC50分别为:1.47、0.20、0.29mmol/L;对U87,则分别为1.61、0.25、0.46mmol/L。以20%IC50为β射线的协同给药浓度,仅有AS可以同时抑制经β射线照射后的CHG-5及U87细胞的增殖。且0.06mmol/L的AS对CHG-5细胞的放射增敏比为1.25,该浓度的AS可以明显地抑制CHG-5细胞的迁移。GSH结果表明0.06mmol/LAS处理组较未处理组细胞内GSH水平下调(P<0.05),流式细胞术结果提示0.06mmol/LAS可以阻滞细胞周期于G1期。结论从3种ART衍生物中筛选出AS对CHG-5细胞具有放射增敏作用,机制可能与下调的胞内GSH水平及细胞周期阻滞于G1期有关。

青蒿素类药物的抗炎免疫作用机制及其安全性研究进展

青蒿素及其已上市衍生物是临床常用的抗疟药物。现有研究发现青蒿素类药物的作用早已不再局限于疟疾的治疗,还具有抗肿瘤、抗寄生虫、抗炎免疫调节等多种抗疟外作用。本文总结了最新的青蒿素类药物抗炎免疫调节作用的文献,可以看到青蒿素类药物通过调节细胞增殖和细胞因子释放发挥对包括红斑狼疮、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化在内的多种免疫炎性疾病的治疗作用,并对其机制进行了总结;同时也总结了现有报道到的青蒿素类药物的不良反应。这对于我们将青蒿素类药物开发为新一代抗炎免疫调节药物具有重要意义。

青蒿素及其衍生物抗菌活性的研究进展

目的:为青蒿素及其衍生物的进一步开发利用提供参考。方法:以“青蒿素”“抗菌”“结核分枝杆菌”“金黄色葡萄球菌”“大肠埃希菌”“Artemisinin”“Antibacterial”“Mycobacterium tuberculosis”“Escherichia coli”“Staphylococcus aureus”等为关键词,在中国知网、万方数据、PubMed、Medline 等数据库中组合查询2000 年1 月-2019 年3 月发表的中英文相关文献,对青蒿素及其衍生物抗菌活性的研究进展进行归纳与总结。结果与结论:共检索到相关文献327 篇,其中有效文献39 篇。青蒿素及其衍生物对结核分枝杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及幽门螺杆菌等多种临床常见的致病菌、耐药菌都具有直接或者协同的抗菌作用。其直接抗菌作用需要的药物浓度明显高于协同抗菌,直接抗菌时的药物浓度与现有的抗菌药物相比并没有明显的优势;但是协同抗菌时青蒿素及其衍生物的浓度要求较低,这提示现有青蒿素类药物直接用作抗菌药的可能性不大,用作协同抗菌药物可能具有更广阔的前景。

临床药师对1例脑卒中后肺部感染的肥胖患者抗感染治疗方案的优化

目的:为脑卒中后肺部感染的肥胖患者的抗感染治疗提供治疗方法和思路方案。方法:临床药师对我院收治的1例脑卒中后肺部感染肥胖患者(BMI=34.602 kg/m^2)的抗感染方案进行优化,针对该肥胖患者的哌拉西林他唑巴坦的剂量调整、药物更换,以及抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)药物的选择和剂量确定等方面提出建议。结果:根据患者体质量和指南,调整哌拉西林他唑巴坦剂量自4.5 g,q12 h至4.5 g,q6 h;在因病原变化更换抗菌药物为莫西沙星时,确认剂量为0.4 g,qd,无需加量;确诊为MRSA感染导致的肺炎时,选用利奈唑胺而非万古霉素进行肥胖患者的感染治疗,并确定剂量为600 mg,q12 h。医师采纳上述建议。患者经治疗后体温下降,咳嗽、咳痰缓解,实验室指标恢复正常后顺利出院。结论:肥胖患者在使用抗菌药物治疗前,临床药师应评估患者的肥胖程度、肝肾功能,再结合药物自身特性,协助医师合理地选择药物并调整给药剂量,在保证疗效的同时避免不良反应。

N-甲基-D-天冬氨酸受体相关性骨癌痛作用机制研究进展

目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体相关性骨癌痛的作用机制。方法检索国内外相关文献,从NMDA受体及其亚基NR1和NR2B,以及NMDA相关性通路方面进行总结与分析。结果作用机制包括驱动蛋白家族KIF17介导的NR2B树突转运,炎性因子诱导NMDA受体亚基磷酸化,以及含NR2B的NMDA受体-Ca^(2+)/Ca^(2+)-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)-环磷酰腺苷反应元件结合蛋白(CREB)-CREB转录共激活因子1(CRTC1)-脑源性神经营养因子(BDNF)-NR2B的正反馈通路。结论相关研究可为骨癌痛的镇痛治疗提供新的参考靶点,同时也为临床骨癌痛的镇痛治疗提供了参考。

尼美舒利解热镇痛抗炎作用比较研究

目的研究尼美舒利的解热、镇痛、抗炎作用的量效关系，比较尼美舒利3种药理作用的ED50为临床合理使用尼美舒利提供依据。方法分别采用热灭活大肠埃希菌制备家兔发热模型、冰醋酸制备小鼠疼痛模型、角叉菜胶诱发大鼠足跖肿胀模型，观察尼美舒利的解热、镇痛、抗炎作用，并计算ED。结果尼美舒利能显著降低家兔体温，减少小鼠扭体次数，明显减轻大鼠足关节肿胀程度，其解热、镇痛、抗炎作用的ED50分别为0.85～1．95，2.56，3.15～4.05mg·kg^-1，根据体表面积比例换算成人ED50分别为0．50～0.60，2.72，0.26～0.59mg·kg^-1。结论尼美舒利发挥解热、镇痛和抗炎作用的ED，n存在差异，其中解热最低。

氯胺酮及其衍生物的抗抑郁研究进展

抑郁症是一种常见的精神疾病,主要表现为显著而持久的心境低落、快感缺失,给患者及其家庭带来沉重负担。抑郁症的治疗主要以单胺类抗抑郁药物为主,但这类药物起效慢、治愈率低、复发率高。近年来,大量研究证实氯胺酮及其对映异构体具有快速而持久的抗抑郁作用,且艾司氯胺酮已经被国内外批准用于治疗成人难治性抑郁患者。同时,研究还发现氯胺酮的代谢物可能是其发挥抗抑郁作用机制的关键步骤,如S-去甲基氯胺酮、(2R,6R)-羟基去甲氯胺酮、(2S,6S)-羟基去甲氯胺酮等代谢物具有抗抑郁作用。然而,氯胺酮及其衍生物的具体作用机制和作用特点不清。本文旨在总结氯胺酮及其衍生物(氯胺酮的对映异构体和活性代谢物)的研究进展,重点关注其抗抑郁作用机制和作用特点,以期为后续临床研究提供理论基础及为重度抑郁症的治疗提供新方法。