肝癌细胞中端粒酶活性的检测

目的 本实验为检测肝癌组织中是否有端粒酶活性，端粒酶活性与肝癌临床检测指标ＡＦＰ及高低转移潜能是否相关而设计。 方法 本实验用ＴＲＡＰ法从组织中抽提端粒酶，经反转录并ＰＣＲ 扩增后用地高辛标记的探针作斑点印迹杂交（ 肝癌标本部分） 和ＰＡＧ电泳加银染法显色（ 人肝癌高低转移裸鼠模型） 。 结果 本实验检测了１１ 例肝癌患者有肝癌组织和癌周组织的端粒酶活性，结果肝癌组织中端粒酶活性为９３－８８（单位：ＩＯＤ值） ，癌周组织端粒酶活性为２４－０９，两者的差别有统计学意义（Ｐ＜ ０－００１） 。正常组织（ｎ ＝ ５） 中未检测到端粒酶活性。端粒酶活性与ＡＦＰ浓度的相关系数ｒ＝０ ．７２，与肿瘤大小的相关系数ｒ＝ －０－２９８。人肝癌高转移模型裸鼠ＬＣＩＤ２０ 的端粒酶活性为（７７－６７±６－９３），低转移模型裸鼠ＬＣＩＤ３５ 的为８２－１６ ±１５－９３），两者之间并无显著性差异（ Ｐ＞ ０－０５） 。 结论 肝癌组织的端粒酶活性明显地高于癌周组织，正常组织中未检测到端粒酶活性。端粒酶活性与ＡＦＰ及肿瘤大小无关。

MAPK和cAMP途径对白色念珠菌毒性与基因表达的影响

利 用白色念珠菌MAPK和cAMP途径几种成员的基因缺失株, 研究信号转导途径对白色念珠菌形态转变的影响. 用系统感染小鼠模型分析这些基因缺失株的毒力, 缺失株的毒力与它们形成菌丝的能力相一致, 野生菌SC5314的致病能力最强, 形成菌丝能力减弱的突变株hst7和cph1毒力也减弱, 不能形成菌丝的cph1 efGl突变株和crk1则无毒性. Northern blot杂交分析表明, MAPK途径对ECE1和ALS3的表达影响不大, cAMP途径的影响较大, ECE1的表达依赖于EfGl因子. ALS1的表达受MAPK和cAMP途径共同调控, 两者对ALS1表达的影响效应接近. 在cph1 efGl双缺失株中ALS1, ALS3, ECE1的表达完全受抑制.