ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌生长及RHO-ROCK1信号通路相关基因表达的影响

目的研究ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)对裸鼠体内胃癌细胞生长的影响及其是否通过RHO-ROCK1信号通路发挥作用。方法将16只BALB/C系裸鼠皮下注射SGC7901细胞建立荷瘤鼠模型后,随机分为两组,分别为灌胃ω-3 PUFAs药物干预组和灌胃生理盐水对照组,观察移植瘤生长情况及其形态学变化,q PCR检测肿瘤组织RHOA、RHOC及ROCK1 mRNA表达水平,免疫荧光和Western blot法分别检测RHOA、RHOC及ROCK1蛋白表达情况。结果药物干预组肿瘤体积和重量小于生理盐水组(抑制率为13. 63%),但差异无统计学意义(P> 0. 05); HE染色结果显示药物干预组相比于生理盐水组,肿瘤组织坏死呈多灶状、坏死区域炎症细胞浸润、细胞排列疏松、部分细胞肿胀呈空泡状; q PCR和Western blot结果显示药物干预组RHOA及ROCK1 mRNA和相应蛋白表达量显著减少(P <0. 05);免疫荧光结果显示药物干预组相比生理盐水组RHOA、RHOC及ROCK1蛋白表达量亦减少,趋势与mRNA结果一致。结论ω-3 PUFAs对裸鼠体内胃癌生长的影响可能是通过影响RHOA、RHOC及ROCK1的表达,从而抑制胃癌细胞的过度增殖,导致肿瘤组织坏死。

羽扇豆醇通过抑制RhoA-ROCK1信号通路抑制结肠癌细胞增殖

该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot检测相应mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测β-Catenin蛋白细胞内分布情况。通过构建shRNA敲低两种结肠癌细胞中RhoA,进一步研究Lupeol影响细胞增殖的分子机制。结果显示,Lupeol处理后,HCT116和SW620细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力受到抑制,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞内RhoA、ROCK1、β-Catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。敲低RhoA后抑制了细胞增殖,同时使得RhoA-ROCK1-β-Catenin信号通路蛋白受到抑制,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。综上所述,Lupeol可通过抑制RhoA-ROCK1信号通路,抑制β-Catenin蛋白表达,进而抑制HCT116和SW620细胞增殖,Lupeol有望成为临床结肠癌治疗的新药物。

环磷酰胺小鼠少精子模型的构建及枸杞煎提液的治疗作用

目的：研究环磷酰胺（CP）小鼠少精子模型的构建方法，以及评价枸杞煎提液对少精子症的治疗作用。方法小鼠分别以60、80、100mg/kg CP腹腔注射，qid，连续5d，测定精子相对数和睾丸组织切片，得出最适CP剂量；再以高低剂量（20g/kg、10g/kg）枸杞煎提液给最适CP剂量构建的少精子小鼠灌胃14d，测定精子相对数、睾丸组织切片和流式细胞仪检测生精细胞倍性。结果3种剂量CP处理组精子相对计数、生精小管面积、直径、生精上皮细胞层数（CMSE）均显著低于空白对照组和生理盐水组（P＜0.001）；枸杞高低剂量组精子相对计数、生精小管面积、直径、CMSE显著高于阳性对照组（P＜0.001）；枸杞高剂量组与阳性对照组比在单倍体细胞（1C细胞）比例上显著降低，四倍体细胞（4C细胞）比例上显著升高（P＜0.05），枸杞低剂量组与阳性对照组比在二倍体细胞（2C细胞）比例上显著升高（P＜0.05）。结论60mg/kg CP为构建小鼠少精子模型的适宜剂量；枸杞煎提液对少精子症有一定治疗效果，可能与促进4C细胞增殖有关。