单核苷酸多态性在人类基因组学发展中的应用

第三代基因组遗传标记的单核苷酸多态性(SNP)目前是与分子标记有关领域研究的焦点。通过连锁分析或关联研究方法,单核苷酸多态性应用于生物的起源、进化及迁移等群体遗传学研究、疾病相关致病或易感基因研究和个体化药物治疗等诸多领域。随着检测和分析技术的进一步发展,SNPs作为生物信息学研究的一个热点,将成为人类基因组研究计划走向实际应用的重要步骤。

基因治疗技术发展在耳聋治疗研究方面的应用

基因治疗是指将外界正常或治疗基因,通过载体转移到人体的靶细胞,进行基因修饰和表达,从而改善疾病的一种治疗手段。基因治疗的概念最早是在1972年由Friedmann和Roblin提出[1]。既往以同源重组（Homologous Recombination,HR）修复机制为基础的基因打靶（gene targeting）技术在研究基因功能方面发挥重要作用并用于基因治疗的探索。

内耳畸形的影像分类及相关基因研究

本文系统地综述了各种不同的内耳畸形分类方法,通过内耳畸形分类标准化的探索,完成对内耳畸形较为精准的分类,以准确有效地指导听觉植入实践。针对具有独特表型特征的内耳畸形耳聋亚群,综述了相关的耳聋基因检测和遗传学研究,为阐述各种内耳畸形的发生、发展和内在规律提供了一定的理论基础。

多平面重建用于人工耳蜗植入术后评估的研究

目的通过标准层面下颞骨影像重建技术对人工耳蜗植入术后内耳精细结构进行评估。方法对42例人工耳蜗植入术后病例进行颞骨CT检测,通过多平面重建(MPR)技术,在同一标准层面下观察不同电极在耳蜗内的位置、电极的覆盖角度及电极对耳蜗内精细结构(蜗轴与骨螺旋板)的影响。结果同一标准层面下不同电极在耳蜗内的位置存在差异,电极的覆盖角度不同。颞骨CT下可以观察蜗轴和骨螺旋板。精细操作下人工耳蜗植入,电极对耳蜗内精细结构损伤小。结论标准层面的MPR可以帮助准确评估电极在耳蜗中的位置,虽无法评估其对基底膜造成的损伤,但是可以评价其对蜗轴与骨螺旋板造成的影响。

紫杉醇对豚鼠听阈的影响

目的:探讨紫杉醇对豚鼠听阈的影响。方法:将30只雌性豚鼠随机分为6组(1个对照组和5个实验组,每组5只),实验组分别予以不同剂量紫杉醇腹腔内注射,检测用药前、后各组动物ABR阈值。结果:实验组听力水平用药后均显著减低,相关分析显示,总药量与听力损失程度之间无显著相关性。结论:紫杉醇可导致轻到中度听力损失。

侵及鼓室、乳突的外耳道胆脂瘤诊断和治疗

目的探讨侵及鼓室、乳突的外耳道胆脂瘤的临床表现、影像特点及其手术治疗方法。方法回顾性分析我科1998～2003年收治的侵及鼓室、乳突的外耳道胆脂瘤14例患者的临床资料。结果14例患者病变均不同程度破坏外耳道四壁并向后扩展至乳突腔。其中4例鼓膜松弛部穿孔,胆脂瘤侵入鼓室,听骨链受压、内移,或不同程度破坏。3例面神经垂直段骨质破坏。1例乳突广泛破坏,硬脑膜裸露。1例先天畸形外耳道狭窄。根据病变的范围,8例行改良乳突根治术,5例行开放式乳突根治术,1例行外耳道扩大成形术。10例听骨链未受累的,术后听力恢复正常,1例听骨链受压变形、移位,术后仍达到正常听力。3例听骨链中断,行听骨链重建术,语言频率气导平均听阈提高15dB～20dB。14例患者随访18个月至5年未见复发。结论外耳道胆脂瘤的病因目前尚不十分清楚。侵及鼓室乳突者临床表现不典型,诊断有一定难度,术前常规高分辨颞骨CT扫描,有助于原发部位的判断及确定病变范围,以选择合适的手术方式。

精准微创的人工耳蜗植入手术

随着精准医学概念的提出,人工耳蜗手术从原来的微创手术入路,到"柔"手术电极植入保留残余听力,发展到现在的疑难耳蜗的精准定位及保留内耳精细结构的微创电极植入。这对人工耳蜗植入候选者的术前评估、术中操作和术后康复均提出越来越高的要求。我们希望通过良好的手术径路设计,减少人工耳蜗植入的皮瓣并发症,提高手术的安全性;通过"柔"手术技巧植入电极,保护耳蜗内精细结构和残余听力;通过对内耳畸形分类的标准化探索,影像重建对耳蜗结构及植入后电极位置的研究,实现个体化电极选择和精准电极植入;通过结合耳聋基因诊断预测植入效果,使得耳聋康复更加精准。让人工耳蜗植入步入精准微创。

微创人工耳蜗植入

人工耳蜗植入已经成为重度感音神经性耳聋的有效治疗手段,微创理念已被医患广泛接受并重视。本文通过文献回顾微创理念的不同层面探讨人工耳蜗植入效果影响因素,希望通过良好的设计和规范化实施,显著降低手术并发症、保留残余听力,寻找最合理和微创的手术方法,推动人工耳蜗植入工作不断发展。

慢性化脓性中耳炎并发迷路瘘管的临床特征和手术治疗

目的 探讨慢性化脓性中耳炎并发迷路瘘管的临床特征及其手术治疗方法。方法 回顾性分析1996～2003年经手术确诊的慢性化脓性中耳炎并发迷路瘘管的22例(23耳)患者的临床资料。结果 22例(23耳)中,术前主诉眩晕者 9 例(39.1 %),瘘管试验阳性 8例(34.8 %),薄层颞骨CT扫描提示迷路瘘管10 例(50 %)。术中见胆脂瘤型中耳炎 22耳(95.7 %),骨疡型中耳炎1耳(4.3 %)。瘘管发生于外半规管19耳(82.6 %),后半规管3耳(13.0 %),同时累及上半规管和外半规管1耳(4.3 %),同时累及上半规管和后半规管1耳(4.3 %)。结论 迷路瘘管术前缺乏可靠的依据诊断。几乎是胆脂瘤型中耳炎独有的并发症,最常见于外半规管。术中对瘘管的处理应根据瘘管的大小、类型、部位及患者术前听力状况而定。

三氧化二砷对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的观察三氧化二砷(As2O3)对喉癌Hep-2细胞株增殖的影响及细胞周期的改变。方法体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的As2O3作用24、48、72小时,通过MTT还原法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果As2O3可有效抑制Hep-2细胞的生长,呈时间和浓度依赖性特点。2μmol/LAs2O3作用24h时,S期细胞比例增高,72小时后,S期细胞明显下降,细胞大量凋亡。As2O3在低浓度时,阻滞细胞通过S期,高浓度时诱导S期细胞凋亡。结论As2O3可抑制Hep-2细胞的增殖,与细胞周期阻滞有关。

HIV与耳带状疱疹

HIV系人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus),可引起获得性免疫缺陷综合征AIDS,它使人体免疫功能缺陷,丧失对微生物的抵抗力而发生各种病毒、细菌、霉菌、寄生虫等所致的涉及全身的机会性感染和继发性肿瘤.笔者在非洲博茨瓦纳医院工作期间,遇到12例耳带状疱疹患者,其中7例HIV阳性,5例HIV阴性,进行临床观察及中西医结合治疗,效果满意.报告如下.

人工耳蜗植入术术中检测的临床应用

目的分析电极阻抗测试和神经反应遥测(NRT)技术在人工耳蜗手术中的应用,评估人工耳蜗植入术术中电极阻抗测试、NRT的临床意义,探讨术中检测的方式及注意事项。方法对12例植入Nucleus24型人工耳蜗的患者于术中及术后1个月进行电极阻抗测试、NRT,并比较术中、术后ECAP阈值的差异。结果91.7%(11/12)的患者术中电极阻抗测试正常;8.3%(1/12)的患者其中1个电极出现开路。91.7%(11/12)的患者记录到良好的NRT反应波形;8.3%(1/12)的患者术中NRT测试未获得分化良好的ECAP。术中、术后ECAP阈值具有显著的相关性。结论电极阻抗测试可以及时了解电极的工作状况。NRT技术可以有效地应用于Nucleus人工耳蜗植入患者的术中检测,同时协助开机时不能进行心理物理测试的儿童完成映射图的调试。

GJB2 235delC纯合突变致聋患者的听力表型分析

目的探讨GJB2 235del C纯合突变致聋患者的听力表型,着重分析其双耳听力对称性情况。方法 2007年至2014年间在解放军总医院聋病分子诊断中心筛查出的100例GJB2 235del C纯合突变的非综合征型耳聋患者,对其听力学表型及双耳听力对称性情况进行统计学描述。结果 100例患者的听力损失程度以极重度(51%)、重度(20%)和中重度(21%)常见。听力曲线图形以下降型(37%)和平坦型(21%)常见。100例患者中,图形或听力损失程度不对称的有61例,不对称性检出率为61%,其中包括:双耳听力曲线图形不对称(A型)36例,其中一耳为残余型听力或全聋者(Aa型)11例;规则性双耳听力损失程度不对称(B型)18例;不规则性双耳听阈不对称(C型)7例。听力不对称患者中,极重度听力损失21例(34.4%),重度听力损失17例(27.9%),中重度听力损失17例(27.9%);听力曲线图图形以下降型(36.1%)和平坦型(23.0%)最常见。听力对称患者中,极重度听力损失为30例(76.9%);听力图形以下降型(38.5%)和残余型(30.8%)最常见。结论 GJB2 235del C纯合突变致聋患者的双耳听力表型呈现多样性,且有较大比例的患者双耳听力不对称。

Otoplan重建在人工耳蜗植入术前评估和电极选择中的应用

目的应用Otoplan软件对患者术前颞骨CT原始数据进行重建,结合耳蜗螺旋函数(Spiral Function)计算蜗管长度以评估植入电极长度,对预测电极长度与术中植入电极进行比对,评估该方法的准确性。方法对13例(14耳)人工耳蜗植入候选者进行颞骨HRCT检测,在耳蜗重建的标准观测层面上通过耳蜗螺旋函数公式进行耳蜗测量,计算耳蜗蜗管长度。根据测量结果选择合适的植入电极,与实际耳蜗植入的电极长度进行比对。结果通过Otoplan软件重建技术结合耳蜗螺旋函数公式准确预测了12例(12耳)患者的植入电极长度,1例(2耳)耳蜗骨化患者预测电极长度大于实际电极植入长度。结论应用Otoplan软件对耳蜗进行影像重建结合耳蜗螺旋函数公式分析,预评估植入电极具有一定准确性,然而对于耳蜗骨化等特殊病例还应结合核磁共振检查进行综合评估分析。

孕妇外周血中胎儿有核红细胞的分离和富集

产前诊断是遗传性疾病早期诊断的重要手段,可以有效减少出生缺陷的发生风险。以孕妇外周血中胎儿遗传物质为检测和分析目标的无创产前诊断技术发展迅速,其中孕妇外周血中胎儿有核红细胞与其他胎儿细胞或游离胎儿DNA比较,前者有明显优势。本文就胎儿有核红细胞的分离和富集技术的研究现状进行综述。

基于集总参数模型的人工耳蜗圆窗植入位置对残余听力影响分析

人工耳蜗植入是目前治疗重度到极重度感音性耳聋的有效方法。低频残余听力能够让患者具有较好的言语识别及音乐鉴赏能力,因此在人工耳蜗植入术中保护患者残余听力具有重要意义。本文主要探讨人工耳蜗通过圆窗植入时的不同位置对残余听力可能带来的影响。研究首先基于医学影像利用有限元方法对耳蜗圆窗膜进行建模,将其简化为椭圆形平板结构;随后计算分析了10种人工耳蜗电极在圆窗上的植入位置对圆窗膜刚度变化的影响;进而通过集总参数模型预测了不同圆窗植入位置对残余听力的影响。研究发现,相对圆窗中心沿长轴方向偏移较远的植入方案可以帮助有效保护残余听力。

基于胎儿有核红细胞建立遗传性耳聋无创产前诊断的新方法

目的基于原位捕获孕妇外周血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells, FNRBCs)建立遗传性耳聋产前无创诊断的新方法。方法将FNRBCs抗体固定在一种功能和结构化医疗导丝上,制备成FNRBCs采集器。利用血液循环模拟装置,对3例男性新生儿脐血进行体外捕获和FISH检测以验证体外捕获体系的可行性。然后,对5例孕妇外周血进行FNRBCs捕获,对捕获细胞全基因组扩增产物和孕妇外周血DNA进行STR分型以分析FNRBCs含量和纯度;对耳聋基因的致病性位点进行Sanger测序,并与已知胎儿羊水穿刺结果对比从而判断捕获细胞来源。结果 FISH结果显示,捕获细胞为有核细胞,即体外捕获体系可行;STR分型表明捕获细胞中存在一定数量的FNRBCs;Sanger测序结果表明1例孕妇外周血的捕获细胞为FNRBCs,其余4例均为母体细胞。结论基于原位捕获孕妇外周血中FNRBCs,有望建立遗传性耳聋产前无创诊断的新方法。但是,原位捕获FNRBCs的特异性、效率和稳定性还有待于进一步提高。

范可尼贫血互补群B对丝裂霉素C诱导的293T细胞DNA损伤修复的研究

目的研究丝裂霉素C诱导的DNA损伤的浓度和时间对293T细胞中范可尼贫血互补群B(FANCB),DNA损伤因子gammaH2AX,修复因子RAD51表达量的影响,探索FANCB在DNA损伤中的作用机理。方法利用人293T细胞系作为研究载体,通过Western blot和qRT-PCR技术定量分析FANCB,gammaH2AX,RAD51在25μM丝裂霉素C浓度作用下,在1、3、5 h不同作用时间点评估FANCB,gammaH2AX,RAD51蛋白和基因表达水平差异;分析细胞在25、35、45、60μM丝裂霉素C浓度下作用3 h后gammaH2AX蛋白表达水平;siRNA敲低FANCB表达后FANCB、gammaH2AX和RAD51蛋白和基因表达检测。结果相比对照组,在蛋白水平,gammaH2AX表达在1、3 h对比0 h差异具有统计学意义(P均<0.05),而5 h对比0 h差异无统计学意义(P=0.223);FANCB表达在1、3、5 h对比0 h差异均具有统计学意义(P均<0.05);RAD51表达在1、3、5 h对比0 h差异均具有统计学意义(P均<0.05)。在基因水平,FANCB在1、3、5 h和RAD51在1、3、5 h相比对照组均具有统计学意义(P均<0.05);gammaH2AX蛋白表达水平与MMC浓度无明显关系。相比对照组,siRNA敲低组FANCB蛋白和基因表达下降,gammaH2AX蛋白表达上升,RAD51蛋白和基因表达下降。结论在丝裂霉素C造成的293T DNA损伤模型中,FANCB在同源重组DNA修复途径中对DNA损伤具有潜在的调控功能。

不同面神经功能重建方式治疗周围性面瘫效果分析

目的:探讨不同面神经重建方案的影响因素及其疗效,为面神经功能重建策略提供参考。方法:回顾性分析2016年1月至2021年1月因面神经不可逆损伤,行面神经功能重建手术的24例患者,面神经全瘫时程均<18个月。面神经中枢端可利用的患者中,根据面神经缺失长度,行面神经吻合术6例(A组),行面神经移植术(腓肠神经或耳大神经)5例(B组);面神经中枢端无法利用时,行面神经-舌下神经桥接术(端-侧吻合)5例(C组),面神经移植术(腓肠神经或耳大神经)-舌下神经桥接术(端-侧吻合)4例(D组);联合修复术(面神经-咬肌神经桥接术联合上述方式之一)4例(E组)。术后随访时程≥1年。结果:24例患者中,术后1年面神经功能HB-Ⅲ级的百分比分别是:A组83.3%(5/6),B组60.0%(3/5),C组40.0%(2/5),D组25.0%(1/4),E组50.0%(2/4)。非多重面神经修复患者,口眼联动发生率为15.0%(3/20),而进行面神经-咬肌神经桥接的多重面神经修复患者中无一例发生口眼联动,且微笑时口角偏斜不明显。所有面神经-舌下神经端侧吻合的患者,伸舌无偏斜,舌肌无萎缩。结论:周围性面瘫的面神经功能重建方案多样,需根据中枢端能否利用及面神经缺损长度制定个性化修复方案。在单一修复方案中,为增加术后面神经功能疗效,应尽量减少神经的吻合口,提倡面神经转位吻合,同时为避免术后舌下神经功能障碍,提倡面神经-舌下神经端侧吻合。另外,多重面神经修复能够有效提高微笑时口角活动对称性,并降低口眼联动的发生率,对患者术后生活质量的提高具有较重要的意义。