circ_0061140靶向miR-6838-5p促进非小细胞肺癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡

目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为si-circ_0061140组(转染si-circ_0061140;低表达circ_0061140)、si-NC组(转染si-NC;阴性对照)、NC组(未转染;空白对照)、miR-6838-5p组(转染miR-6838-5p模拟物;高表达miR-6838-5p)、miR-NC组(转染miR-NC;高表达miR-6838-5p的阴性对照)、si-circ_0061140+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-NC)、si-circ_0061140+anti-miR-6838-5p组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-6838-5p)。采用Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleavedcaspase-3)蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。双荧光素酶活性检测circ_0061140和miR-6838-5p的靶向结合。结果非小细胞肺癌组织、细胞NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975中的circ_0061140表达量均比癌旁组织或正常肺上皮细胞BEAS-2B高,miR-6838-5p表达量比癌旁组织或BEAS-2B细胞低(P_(均)<0.05)。si-circ_0061140组或miR-6838-5p组NCI-H1299细胞的CyclinD1蛋白表达量、增殖能力、S期细胞比例比NC组减少,Cleaved-caspase-3蛋白表达量、G_(0)/G_(1)期细胞比例、凋亡率比si-NC组或miR-NC组增加(P均<0.05)。circ_0061140靶向调控miR-6838-5p的表达。共转染si-circ_0061140、anti-miR-6838-5p可减弱转染si-circ_0061140对细胞生物学行为的作用。结论低表达circ_0061140通过靶向非小细胞肺癌细胞的miR-6838-5p,抑制细胞增殖、阻滞G_(0)/G_(1)期细胞周期,并加速凋亡。

靶向ABCG2的RNA干扰逆转乳腺癌球囊细胞化疗耐药的研究

目的通过靶向ABCG2的RNA干扰逆转乳腺癌球囊细胞化疗耐药。方法以ABCG2为靶点,设计ABCG2-siRNA,构建ABCG2干扰慢病毒载体并包装好病毒,稳定转染到筛选好的MCF-7球囊细胞中,Western Blot方法检测ABCG2的表达情况,MTT法检测RNAi沉默ABCG2基因对球囊细胞的增殖抑制作用,同时流式细胞术检测RNAi沉默ABCG2对MCF-7球囊细胞在耐药情况下的细胞周期变化和凋亡状况。结果 ABCG2干扰慢病毒载体成功构建并包装病毒,建立起ABCG2稳定沉默的MCF-7乳腺癌球囊细胞系。Western Blot显示球囊细胞中高表达的ABCG2,在RNAi沉默后表达下降;MTT结果显示,在5-Fu的作用下的MCF-7贴壁细胞抑制率高于MCF-7球囊细胞,而沉默ABCG2的MCF-7球囊细胞其抑制率会随着5-Fu量的增加而增高;流式细胞仪也显示球囊细胞大多处于G0/G1期,加入5-Fu和沉默ABCG2后,处于G0/G1期细胞数会增加,凋亡率会明显增加。结论乳腺癌球囊细胞高表达ABCG2蛋白,其5-Fu耐药性高于亲本MCF-7细胞,沉默ABCG2后能够增加球囊细胞在5-Fu的作用下的细胞抑制率及凋亡率,从而逆转对5-Fu的耐药性。

晚期非小细胞肺癌一线化疗的策略

近年来，肺癌的发病率和死亡率一直呈上升的趋势，已成为各种癌症死亡的首要原因。据估计，2013年美国肺癌新发患者数将达到228190例，居恶性肿瘤发病率第二位。而且，肺癌导致相关死亡人数达到159480例，

在那个春天遇见

在那个不寻常的春天里,我遇见了如此独特的你,只是一个完美的转身,从此淡出我的视线。当第一抹春光在我的掌心晕开,明媚的光透进我的眼。春天的气息扑面而来,阳光透进树叶照得一切格外美好,微风拂过,杨柳絮纷纷舞落。春天,已经悄然出现在面前。你从我的旁边经过,带着一阵风。嗯？因为你的一句话,诧异地抬起头,正对上你那琥珀色的眸。咦,似有什么重大发现似的：你,原来是个混血儿。