鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶的生物信息学分析和基因克隆

本研究以鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)L-乳酸脱氢酶(Lr-L-LDH)为研究对象,以研究较多的Lr-L-LDH1为对照,对基因组注释的两个Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2基因,进行异同分析。采用在线网站和专业软件对Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2的一级结构、基本特性、亲疏水性、二级结构进行分析和预测,对三级结构进行同源建模以及酶和底物的分子对接分析,并对酶的编码基因进行系统发育分析,克隆表达及酶活性检测。结果显示:相较于Lr-L-LDH1,Lr-L-LDH2有着相似的分子特性,二级和三级结构,但Lr-L-LDH2编码序列短,氨基酸序列同源性低(48.08%),有不同的进化地位;Lr-L-LDH2也含有乳酸脱氢酶催化活性位点序列和保守的NAD^(+)结合位点序列(GXGXXG),能够形成典型的活性三维口袋域,是NAD^(+)依赖型四聚体结构L-乳酸脱氢酶,在细胞中需要果糖1,6-二磷酸(FBP)来激活,催化丙酮酸还原为L-乳酸;体外克隆表达和酶学分析表明,Lr-L-LDH2酶活力极显著低于Lr-L-LDH1(P<0.01)。Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2都具有乳酸脱氢酶活性,推测二者在乳酸表达调控中相互作用,对鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶的分子改造应同时考虑Lr-L-LDH1和Lr-L-LDH2的作用,研究对乳酸发酵工业的基因工程改造提供分子基础和科学依据。

野油菜黄单胞菌hpa2基因的突变和功能分析

利用自杀质粒pK18mob诱变野油菜黄单胞菌Xcc8004的hpa2基因,获得整合突变体PK3001。致病性和过敏反应检测发现,hpa2突变体PK3001过敏反应完全丧失,但致病性无明显变化。利用gus报告基因和RT-PCR检测hpa2基因的表达调控,结果表明,hpa2基因在基本培养基上高表达,且受hrpG、hrpX正向调控。

妇科门诊5000例患者病种与年龄分布特征

目的了解妇科门诊初诊患者的病种和年龄分布,旨在为中医妇科学临床研究提供一定的参考。方法对2005年5月至2006年4月湖南中医药大学第一附属医院妇科普通门诊初诊病人5 000例进行统计分析。结果检出率从高到低按病种依次为妇科炎症,生殖内分泌疾病,不孕症,妇科肿瘤,乳腺疾病,性传播疾病;按年龄依次为21～30岁组,31～40岁组,41～50岁组,11～20岁组,51～60岁组,61岁以上组。结论5 000例就诊患者中,病种以妇科炎症及生殖内分泌疾病为多,年龄以育龄期妇女21～50岁为多。就诊以月经不调和妇科血证居多,是中医药治疗充分发挥特色的优势所在,并提供了研究方向和目标。

一个用于体外鉴定野油菜黄单胞菌Ⅳ型效应物的报告质粒的构建

许多革兰氏阴性植物病原细菌通过型分泌系统(T3SS),将效应物蛋白分泌并转运进入植物体内,从而引起植物发病或过敏反应。效应物是病原细菌和植物分子互作的关键物质。全基因组筛选鉴定型效应物蛋白并研究其功能,对于解明病原菌的致病机理、寄主范围和进化具有重要意义。利用avrBs1作为报告基因,将其过敏反应诱导结构域(AvrBs159-444)克隆到不含启动子的穿梭质粒pLAFR6上,构建一个用于型效应物转运体外鉴定的报告质粒pLJB,并以已经鉴定为效应物基因的XC-1553的启动子验证该报告质粒,证明pLJB工作正常。该报告质粒为进一步进行全基因组筛选鉴定野油菜黄单胞菌型效应物提供材料。

中药口服配合灌肠治疗慢性盆腔炎临床研究

目的：研究探讨中药口服配合灌肠治疗慢性盆腔炎的临床疗效。方法：选取笔者所在医院收治的90例慢性盆腔炎患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为A、B、C三组,每组30例。A组给予中药汤剂血府逐瘀汤口服治疗,B组给予口服妇科千金片治疗,C组在A组血府逐瘀汤口服治疗的基础上给予自拟的灌肠药方对患者进行保留灌肠治疗,在月经结束后5 d可进行灌肠。以10 d为一疗程,治疗总时间为3个月,随访1-2年,比较三组患者的临床治疗效果。结果：经随访后,C组的治疗总有效率93.3%（28/30）明显高于A组的73.3%（22/30）和B组的73.3%（22/30）,差异均有统计学意义（P〈0.05）,而A、B两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：中药口服配合灌肠治疗慢性盆腔炎的临床疗效确切,治疗有效率高、安全性好,值得临床推广应用。

全面推进校务公开 依靠广大教职工办好学校

西南科技大学校务公开工作在实现学校决策的民主化和科学化,提高学校的教育质量和管理水平,加强党风廉政和校风建设,密切党群干群关系和维护教职工合法权益,调动广大教职工的积极性和主动性,促进学校的改革、发展和稳定等方面,取得了可喜成效,其重要作用和积极意义,正在被越来越多的领导干部和教职员工所认识。

凸显工程特色的《生态工程学》教学改革

生态工程学是培养生态学专业本科生工程技术能力的一门重要课程,目前存在的问题主要为教材内容陈旧和工程特色不鲜明、实践教学内容设置系统性和目的性弱、工程设计欠缺等。广西大学10年的教学改革结果表明,对教材内容进行精选和及时更新、增加和完善重要生态工程设计、强化生态工程设计实践教学可显著提高学生工程设计和解决实际问题能力。

加强教职工职业道德建设调查报告

在第二个"公民道德建设宣传月"活动中,西南科技大学就加强教职工职业道德建设,在本校教职工中进行了一次问卷调查。调查报告分为:调查的基本情况,结论与分析,思考与对策三个部分。

论夫妻间暴力行为

家庭暴力作为一种社会现象 ,在我国存在由来已久 ,但作为法律禁止的行为 ,在 2 0 0 1年婚姻法才第一次写进其中 ,在 2 0 0 1年婚姻法的司法解释 (一 )中又把家庭暴力和虐待区别开来 ,但在现实生活中家庭暴力和虐待很难区分 ,针对家庭暴力和虐待间的区别 ,并结合我国家庭暴力存在的各种原因 ,提出改变“家丑不可外扬”的观念 ;完善我国现有的保护妇女儿童权益的法律体制 ,推出一部“反家庭暴力法” ;并在司法实践中 ,真正形成尊重妇女的观念 ,从社会、法律的角度探讨出一条保护妇女儿童权益 。

预前护理计划之“让我说说”对养老院老人死亡及维持治疗态度的影响

目的探究预前护理计划之"让我说说"对养老院老人死亡及维持治疗态度的干预效果。方法便利抽取武汉市16所养老院259名老人,根据楼层将其分成干预组和对照组。干预组实施预前护理计划之"让我说说",对照组不实施干预,比较干预后两组老人对待死亡及生命维持治疗态度的差异。结果干预前,两组老人对待死亡及维持生命治疗态度差异无统计学意义(均P>0.05)。干预后,在对待死亡问题上,干预组(34.0%)比对照组(8.6%)更多地表现出恐惧,同时干预组(18.0%)比对照组(24.1%)较少表现出求死心态(P<0.05)。在对待维持生命治疗上,干预组(49.0%)比对照组(29.3%)更愿意接受维持生命治疗(P<0.05)。结论预前护理计划之"让我说说"可以给老人提供情感和行为支持,促使老人表达内心对死亡的真实想法,接受维持生命治疗。

三种苏铁植物呈现出迥异的水力安全边界

为探究苏铁植物的水力安全边界(hydraulic safety margins,HSM),该试验选用经典的自然干燥法和最新发表的抽气法测定三种同质园苏铁植物抗旱性(即叶轴木质部脆弱性曲线),获得抗旱指标P_(50)和P_(88)(导水率丧失或气体抽取量分别为50%和88%时的木质部水势),与叶片正午水势计算HSM,结合管胞性状分析。结果表明:(1)苏铁(Cycas revoluta)、越南篦齿苏铁(C.elongata)、摩瑞大泽米苏铁(Macrozamia moorei)的管胞长度分别为(4413±378)、(5146±730)、(6954±862)μm,苏铁、越南篦齿苏铁与摩瑞大泽米苏铁差异显著(P<0.05)。(2)两种方法测定的脆弱性曲线都呈典型的“S”型,苏铁、越南篦齿苏铁、摩瑞大泽米苏铁的P_(50H)(导水率丧失50%时的木质部水势)和P_(50P)(气体抽取量为50%时的木质部水势)分别为-2.5、(-2.4±0.5)MPa,-2.3、(-3.6±0.7)MPa,-1.5、(-1.8±0.2)MPa,在已发表的裸子植物数值范围内。P_(50)和P_(88)具有显著一致性(除了越南篦齿苏铁的P_(50P)比P_(50H)更低,表示更强抗旱性),与已发表的其他木质部管胞物种通过水力学法和抽气法获得的P_(50)和P_(88)比较分析,具有显著相关性(R^(2)=0.72,P=0.0081;R^(2)=0.87,P=0.0007)。(3)自然干燥法和抽气法计算的HSMs具有相同的趋势,摩瑞大泽米苏铁为负值,而苏铁和越南篦齿苏铁为正值。综上所述,三种苏铁植物的抗旱性均在已发表的裸子植物范围内,两种方法都适于测定木质部管胞结构的苏铁类植物脆弱性曲线,苏铁、越南篦齿苏铁与摩瑞大泽米苏铁具有不同的水力安全边界。利用脆弱性曲线和正午水势探讨苏铁植物的水力安全边界,为苏铁植物的水分监测、管理和保育提供依据。

右归丸对膝骨关节炎模型鼠软骨组织凋亡和基质降解调控基因表达的影响

目的通过观察右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠软骨组织凋亡和基质降解调控基因的影响,进一步揭示右归丸防治KOA的机制.方法采用数字表法将SD大鼠随机分为假手术对照组,KOA模型组,KOA+硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖),KOA+右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只.采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,分别予相应药物灌胃8周.HE染色法观察软骨组织的形态学变化,并进行Mankin评分;应用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织B淋巴细胞瘤分子-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤分子-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(aspartate-specific cysteine protease-3,caspase-3)基因的表达;应用免疫组化法检测各组软骨组织Ⅱ型胶原(collagenⅡ,COLⅡ)的表达.结果假手术组、KOA模型组、KOA+硫酸氨基葡萄糖组、KOA+右归丸高、中、低剂量组的Mankin评分别为0.33±0.073,4.92±0.539,2.76±0.317,3.05±0.253,4.14±0.159,4.38±0.621;COLⅡ评分分别为3.45±0.07,0.39±0.02,3.53±0.11,3.87±0.05,3.15±0.21,0.41±0.13;Bcl-2基因表达分别为2.22±0.08,1.00±0.08,1.75±0.05,1.83±0.11,1.67±0.03,1.12±0.09;Bax的基因表达分别为0.23±0.01,1.00±0.05,0.33±0.03,0.28±0.07,0.42±0.03,0.75±0.01;Caspase-3基因表达分别为0.18±0.01,1.00±0.03,0.26±0.05,0.21±0.02,0.36±0.02,0.83±0.07.与假手术组比较,KOA模型组大鼠软骨组织Mankin评分明显升高,软骨组织Bcl-2基因表达降低,COLⅡ蛋白表达明显降低,Bax和caspase-3基因表达显著升高(P<0.01);KOA模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱.与KOA模型组相比,KOA+右归丸高剂量干预大鼠软骨组织Mankin评分明显降低,KOA+右归丸中、高剂量干预大鼠软骨组织Bax和caspase-3的基因表达均明显降低,Bcl-2基因表达和COL-Ⅱ的蛋白表达均明显升高(P<0.05),KOA+右归丸高剂量组软骨结构趋于正常,软骨细胞分布仅偶见不均,关节软骨表面欠光滑.结论右归丸通过上调Bcl-2表达和下调Bax和caspase-3表达减缓COL-Ⅱ的降解,从而有效保护膝骨关节炎模型鼠关节软骨,延缓关节软骨退变.

基于iTRAQ技术筛选膝骨关节炎模型鼠差异表达蛋白及右归丸延缓膝关节退变的分子机制

目的利用同位素相对和绝对标记定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术筛选正常大鼠和膝骨关节炎模型大鼠关节组织中差异表达蛋白,进一步研究右归丸对膝骨关节炎模型鼠差异表达蛋白组织蛋白酶K(cathepsin K,CtsK)、凝血酶敏感蛋白-2(thrombospondin-2,TSP-2)、Rho蛋白依赖性肌球蛋白磷酸酶(Rho protein-dependent myosin phosphatase,Mprip)和钙调蛋白-1(calmodulin-1,CaM-1)等蛋白表达的影响,以揭示右归丸治疗膝骨关节炎的可能机制。方法60只SD大鼠分为假手术组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组(0.17 g/kg)及右归丸高(4.8 g/kg)、中(2.4 mg/kg)、低(1.2 g/kg)剂量组,每组10只。除假手术组外,采用改良Hulth法建立KOA大鼠模型,模型制备成功6周后分别给予干预,假手术组和模型组给予0.9%(质量分数)氯化钠注射液、硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖,右归丸干预组给予不同浓度的右归丸水煎剂,各组大鼠连续灌胃2个月,处死大鼠取膝关节。iTRAQ技术筛选假手术组和模型组大鼠的差异表达蛋白,并利用生物信息学软件进行数据分析。HE法观察各组大鼠软骨组织病理形态改变并进行Mankin评分,免疫组化法验证各组大鼠软骨组织差异表达蛋白CtsK、TSP-2、Mprip和CaM-1等表达。结果假手术组和模型组共筛选出有意义的差异蛋白1000个(以差异倍数≥1.2或≤0.83为筛选标准),其中上调蛋白442个,下调蛋白558个。基因本体论(Gene Ontology,GO)分析显示这些差异表达蛋白可分为59种功能类型,17种参与细胞成分,16种参与基因的分子功能,26种参与生物学过程,Pathway通路分析显示这些差异蛋白主要集中在核糖体、酪氨酸、Th17细胞分化、Th1和Th2细胞分化、戊糖磷酸化通路等。与假手术组比较,模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱;其Mankin评分、TSP-2、CtsK等蛋白表达均明显升高,Mprip、CaM-1等蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,右归丸高剂量组软骨结构趋于正常,软骨细胞分布偶见不均,关节软骨表面欠光滑;其软骨组织Mankin评分、TSP-2、CtsK等蛋白表达均明显降低,Mprip、CaM-1等蛋白表达均明显增强(P<0.05)。结论膝骨关节炎的形成是多基因共同作用的结果,其中CtsK、TSP-2、Mprip和CaM-1对膝骨关节炎的发生、发展起着至关重要的作用,右归丸治疗效果可能通过下调TSP-2、CtsK和上调Mprip、CaM-1蛋白表达而实现。

中青年胃肠癌化疗患者心理困扰、家庭韧性与其生活质量相关性的纵向研究

目的纵向调查接受第1、2、4程化疗的中青年胃肠癌患者的心理困扰、家庭韧性和生活质量水平,分析其动态变化和三者的相关性。方法采用医院焦虑抑郁量表(HADS)、患者家庭韧性评定量表(FRAS)和癌症康复评价简表(CARES-SF)对89例中青年胃肠癌患者进行纵向调查。结果患者第1程化疗时的心理困扰程度较高,中重度焦虑抑郁的患者占比为71%;相对第1程化疗,化疗第4程时患者的心理困扰水平降低(P<0.01),家庭韧性水平和生活质量水平有所提高(P<0.05);中青年胃肠癌患者的心理困扰水平在第1、2、4程化疗时均与生活质量呈负相关(P<0.01),与家庭韧性水平在第1、2程化疗时呈负相关(P<0.01);家庭韧性和生活质量水平呈正相关(P<0.01)。结论中青年胃肠癌患者需加强心理护理,需关注患者家庭韧性对于其心理困扰和生活质量水平的影响。

中医院中医药文化建设的探索与实践

作为一所县级中医医院,对中医药文化建设进行了一些有益的探索和实践,形成了富有医院特色的中医药文化,促进了医院快速发展。县级中医医院要真正实现社会效益和经济效益同步提高的目标,就要不断重视和加强中医药文化建设,将中医药文化融入到医院管理、经营和诊疗活动之中,使中医药文化成为促进医院发展的重要支撑。

老年下肢骨折的中医护理

目的 探讨老年人下肢骨折术后中医护理方法.方法 我科于2008年1月～2013年12月收治60岁以上老年下肢骨折患者105例,将其随机分为对照组和观察组,对照组52例,观察组53例.两组患者均经手法复位、夹板、石膏固定及牵引复位;或经皮穿针及开放复位等可靠内外固定.对照组给予术后常规护理,观察组在常规护理的基础上,加强情志疏导及饮食调护;结合针刺、穴位按摩、肌肉拿搓及中药熏洗、外敷、漱口、内服等有针对性的中医护理干预措施.结果 观察组并发症发生率明显低于对照组（p＜0.05）,住院天数较对照组明显缩短（p＜0.05）,住院费用较对照组明显降低（p＜0.05）,患者对护理满意度明显高于对照组（p＜0.05）.结论 老年人骨折术后做好中医临证护理,能有效减少并发症发生,缩短住院时间,降低住院费用,提高患者对护理工作满意度.

39例溃疡性结肠炎病人行中药保留灌肠治疗的临床观察及护理

[目的]观察39例溃疡性结肠炎病人行中药保留灌肠治疗的效果,总结相应的护理措施。[方法]对39例溃疡性结肠炎病人行中药保留灌肠治疗,同时加强心理护理、病情观察、灌肠时的护理、饮食护理、出院指导。[结果]临床痊愈29例,好转7例,无效3例。[结论]加强溃疡性结肠炎病人行中药保留灌肠治疗的护理有利于预后。

肛肠病术后中药熏洗坐浴疗效观察与护理

目的对肛肠病术后中药熏洗坐浴临床疗效与护理进行对比探讨。方法对照组术后用1:5000高锰酸钾溶液坐浴;治疗组采用自制中药痔疾一号熏洗剂坐浴,并配合相应的护理。结果治疗组总有效率为99.34%,对照组总有效率为87.74%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论中药熏洗坐浴用于肛肠病术后病人,在缓解创口疼痛、减轻或消除水肿、减少切口出血等方面,疗效确切,优于高锰酸钾溶液。中药熏洗坐浴同时,加强肛肠病术后护理,对减轻病人术后不适、减少术后复发和促进病人痊愈出院起到了较好的作用。

中药治疗子宫内膜异位症相关不孕症的临床研究

目的分析中药治疗子宫内膜异位症相关不孕症的临床效果。方法选取子宫内膜异位症相关不孕症患者92例,将其按双盲随机方法均分为对照组与观察组(n=46)。对照组患者采用腹腔镜治疗;观察组患者在对照组治疗基础上加用中药口服治疗,将2组患者治疗6个月后的疗效进行比较。结果观察组患者妊娠率为47.8%,显著高于对照组的19.6%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者流产率为9.1%,显著低于对照组的22.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论将中药应用于子宫内膜异位症相关不孕症患者治疗中,能有效调节机体的免疫力,改善盆腔内正常解剖结构,对提高妊娠概率有重要作用。