应用型本科猪病学课程教学设计及实践

猪病学是应用型本科动物医学专业的一门重要专业选修课,该课程的主要任务是培养学生解决猪病相关问题的综合能力。基于应用型本科培养人才特点、猪场兽医就业岗位需求以及养猪行业变化等,从教学目标、教学内容、教学方法、教学成绩考核等方面进行了应用型本科猪病学课程教学设计,并在教学中应用,取得较好效果。

IRES核心区12-bp非连续插入突变对猪塞内卡病毒复制和细胞嗜性的影响

【背景】塞内卡病毒(senecavirus A,SVA)是新近暴发的一种引起猪特发性水疱病及仔猪死亡的小核糖核酸病毒。该病毒基因组5′非编码区(untranslated region,UTR)中的内部核糖体进入位点(IRES)元件在病毒复制过程中发挥重要作用。2017年我国出现IRES核心区Domain II 12个碱基非连续插入的自然突变SVA毒株,在病毒复制和致病性方面存在明显改变。【目的】探讨IRES Domain II区域发生的突变对SVA的复制及细胞嗜性的影响,为进一步了解SVA致病机制奠定基础。【方法】以实验室前期构建的含HeN-1/2018株全基因组感染性克隆pHeN-1/2018为基础,通过定点突变的方式,逐步将其IRES Domain II核心区域308—317 nt的9个碱基(ACTCAAGCG)替换为GD04/2017株基因组308—328 nt的21个碱基(CACGCCTGCCGATAGACGATT),构建重组载体pHeN-1/2018-i12并进行了病毒拯救。随后,利用病毒基因组克隆测序、间接免疫荧光试验和Western blot试验对所拯救病毒进行鉴定,同时验证了IRES核心区12个碱基插入突变对SVA病毒体外复制能力和细胞嗜性的影响。【结果】将构建完成的重组载体pHeN-1/2018-i12转染细胞,盲传至P2代,获得致使感染细胞病变明显、病变时间稳定的IRES突变病毒rHeN-1/2018-i12。病毒连续传代后测序结果表明rHeN-1/2018-i12遗传稳定,P5代病毒基因组序列未发生碱基突变,P10代病毒IRES区域没有出现突变现象。用低代次的突变病毒rHeN-1/2018-i12体外感染本体动物猪源细胞系PK-15和IBRS-2,及仓鼠源细胞系BHK-21,进行细胞感染试验,结果表明rHeN-1/2018-i12与亲本毒株rHeN-1/2018在PK-15、IBRS-2和BHK-21中均能导致明显的细胞病变,表现出相似的生长曲线趋势,表明IRES核心区Domain II 12个碱基突变不能够改变对上述细胞的嗜性;但SVA突变病毒和亲本株在不同细胞中的病变时间及病毒滴度上存在较大的差异,rHeN-1/2018-i12株在细胞中生长能力较其亲本株rHeN-1/2018差,诱使细胞病变的时间较晚,在感染24 hpi,两者病毒滴度相差可达10倍。【结论】本研究基于SVA反向遗传操作系统构建并拯救SVA IRES突变毒株,确定了IRES突变对SVA生物学特性的影响,有助于我们更好地了解SVA致病机制,拓宽我们对病毒IV型IRES功能的认识。

猪产业链中鼠伤寒沙门菌及沙门菌血清型4,[5],12:i:-基因组学分析

旨在探究鼠伤寒沙门菌及沙门菌血清型4,[5],12:i:-基因组学特征。采用Illumina NovaSeq 6000平台对91株河南省猪产业链中鼠伤寒沙门菌及沙门菌血清型4,[5],12:i:-分离菌进行全基因组测序,通过生物信息学分析,进行其血清型的预测、多位点序列的分型以及质粒类型、耐药基因和毒力基因分析。结果表明,在河南省猪产业链中沙门菌4,[5],12:i:-的流行率(1.58%,50/3173)已经超过鼠伤寒沙门菌的流行率(1.29%,41/3173);91株沙门菌的序列型分为ST34(71.42%,65/91)和ST19(28.57%,26/91);鼠伤寒沙门菌/ST34菌株和4,[5],12:i:-/ST34菌株都是IncHI2A_1、IncHI2_1和Col440I_1质粒的偏好宿主;沙门菌血清型4,[5],12:i:-携带率较高的耐药基因是blaTEM-1B_1(72%)、tet(B)_2(90%)、sul2_3(66%)、blaOXA-1_1(34%)等;相比鼠伤寒沙门菌菌株,沙门菌血清型4,[5],12:i:-菌株中质粒的携带率更高,且携带更多种类的耐药基因和毒力基因。本研究首次证实,河南省猪产业链中沙门菌血清型4,[5],12:i:-的流行已经超过鼠伤寒沙门菌,在一定程度上解释了该血清型在河南省病人中主要流行的原因。

猪源绿脓杆菌的分离鉴定及16S rRNA基因同源性分析

从解剖病变为心包炎、纤维素性肺炎、肺脓肿的病死仔猪体内分离到1株细菌,通过形态特征观察、生化试验,将分离菌株初步鉴定为绿脓杆菌。动物致病性试验结果显示,分离菌株对小鼠具有很强的致病性。药敏试验结果显示,分离菌株对氧氟沙星、恩诺沙星高度敏感,对头孢噻肟、庆大霉素中度敏感,对青霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林、强力霉素、卡那霉素等耐药。将分离菌株的16S rRNA基因序列与Gen Bank中发表的绿脓杆菌序列进行Blast比对,结果表明,分离菌株与绿脓杆菌不同菌株的同源性高达99%以上,进一步确定分离菌株为绿脓杆菌。基于16S rRNA基因序列,使用MEGA 5.05软件,构建系统进化树,结果表明,分离菌株与病人痰液和腹泻婴儿分离菌株的同源性最高,与未加工水果分离菌株同源性最低。

猪群利巴韦林中毒病例

利巴韦林，又名三氮唑核苷、病毒唑，具有广谱抗病毒作用，对流感病毒、副流感病毒、甲型肝炎病毒、口蹄疫病毒、新城疫病毒、轮状病毒等均有抗病毒活性，虽然在医学上广泛使用，但是在兽医临床已经禁止使用。2005年10农业部颁发第560号公告，宣布猪、禽等动物禁止使用利巴韦林、金刚烷胺、病毒灵等人用抗病毒西药，同时2005年兽药典也未收录该类抗病毒药物。虽然禁用但是关于利巴韦林中毒的病例时有报道。

一株猪源产气荚膜梭菌分离、鉴定及药敏试验

产气荚膜梭菌,根据产毒素能力分为A、B、C、D和E 5个血清型。一般认为C型菌株是导致2周龄内仔猪肠毒血症和坏死性肠炎的主要病原,而A型菌株则与哺乳及育肥猪肠道疾病有关[1]。因此,猪产气荚膜梭菌病主要由A型、C型产气荚膜梭菌引起各种年龄阶段的猪发生一种急性、致死性肠道传染病。

副猪嗜血杆菌分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌能够引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等,是影响猪的最重要细菌之一,目前在所有的主要养猪国家均有存在。为了弄清河南省副猪嗜血杆菌病流行情况,2012年-2015年,从河南不同地区猪场送检的疑似病料,进行副猪嗜血杆菌分离和鉴定,共分离到5株细菌,通过细菌形态观察、培养特征鉴定、生化试验、PCR检测,鉴定为副猪嗜血杆菌,分别命名为A6-fei、C3-xin、C12-xin、D2-fei和E1-fei。采用纸片扩散法,对分离5株副猪嗜血杆菌进行药敏试验,其结果表明所分离的5株副猪嗜血杆菌的药物敏感性不尽相同,各分离菌株对头孢噻肟、氟苯尼考星最敏感,对复方新诺明敏感性最差,其中菌株C3-xin对复方新诺明、庆大霉素、卡那霉素、青霉素完全耐药。表明副猪嗜血杆菌病在河南省依然存在,并且不同地区菌株对常用药物的敏感性各不相同,应当引起养猪场重视。

基于工作过程的猪病防治技术课程实验实训的教学设计

猪病防治技术课程是高等职业院校兽医、猪病防治、畜牧等相关专业的一门专业核心课程,一门应用性和实践性很强的课程[1].以服务为宗旨,以就业为导向,着力培养学生的职业道德、职业技能和就业创业能力,是职业教育的根本目的[2].实验实训是培养职业技能的重要方式,是实践教学重要的组成部分.本文基于养猪与猪病防治的生产过程,按照培养合格岗位人才的要求,对猪病防治技术课程实验实训进行重新的教学设计与探索.

河南地区猪源沙门菌血清型4,[5],12:i:-的分离鉴定及耐药性分析

沙门菌血清型4,[5],12:i:-作为鼠伤寒沙门菌单相变种的一个代表,自从20世纪90年代中期开始,在人类和动物中的流行不断增加。为调查沙门菌血清型4,[5],12:i:-在河南地区猪中的流行情况,本研究于2015年9月~2018年12月,从河南不同地区送检的63个病例中,分别采集发病仔猪的肺脏、心血、肝脏等样品,进行沙门菌的分离培养。通过染色镜检、PCR法对分离菌株进行鉴定,采用凝集法和鞭毛相抗原诱导转化方法鉴定分离菌株的血清型,采用双重PCR对沙门菌血清型4,[5],12:i:-分离菌株的鉴定结果进一步验证。采用肉汤稀释法测定分离菌株的耐药性。沙门菌的分离鉴定结果显示,从送检的63个病例中,共分离到6株沙门菌,阳性率为9.52%(6/63),其中3株为沙门菌血清型4,[5],12:i:-,另外3株为猪霍乱沙门菌和猪霍乱沙门菌孔成道夫变种。药敏试验结果显示,所有沙门菌分离菌株对氨苄青霉素、磺胺甲基异恶唑、萘啶酸和氯霉素均耐药,且呈多重耐药表型,其中沙门菌血清型4,[5],12:i:-分离菌株对卡那霉素、庆大霉素、阿奇霉素、四环素均耐药,而猪霍乱沙门菌和猪霍乱沙门菌孔成道夫变种分离菌株的耐药性较低。本研究首次报道沙门菌血清型4,[5],12:i:-在我国猪群中的流行情况,且其耐药性较强,可能给临床用药带来困难,对公共卫生安全构成潜在威胁。

猪源气单胞菌分离鉴定及耐药谱检测

为调查气单胞菌在我国猪粪便中流行情况及耐药谱,2017年3~7月从河南省4个地区,共采集370份猪粪样品,通过缓冲液蛋白胨水增菌培养后,使用添加有氨苄青霉素的气单胞菌基础培养基选择培养,分离气单胞菌。可疑菌株通过形态特征、生化试验和16SrDNA序列比对进一步鉴定。微量稀释法测定分离菌株对17种抗菌药物耐药谱。结果显示,共分离到11株气单胞菌,分离率为2.97%,其中豚鼠气单胞菌5株(占45.45%),杀鲑气单胞菌2株(占18.18%),中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、水生气单胞菌和贝斯特润气单胞菌各1株(各占9.09%);阿莫西林/克拉维酸菌耐药率为100%,磺胺甲恶唑、氟苯尼考耐药率81.82%,阿米卡星、美罗培南敏感率均为100%,除了其中1株气单胞菌,其他菌株对头孢噻呋、头孢曲松、庆大霉素、强力霉素、磷霉素、恩诺沙星均敏感,各菌株均呈多重耐药性。表明我国健康猪粪便中携带气单胞菌,如果造成水源或者食物污染,可能有引起人类或者动物感染的风险,应引起重视。

河南地区猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性试验

为了解猪源肠外致病性大肠杆菌在河南地区的流行及耐药性,本试验于2016—2018年从河南省61家猪场送检的发病猪中,采集肺脏等病料,进行大肠杆菌的分离与鉴定,并用微量稀释法测定分离菌株的耐药性,采取PCR法检测分离菌株中氟苯尼考耐药基因(floR)、Ⅰ类整合酶基因的携带情况,通过Ⅰ类整合子基因盒可变区序列的BLAST比对,分析其耐药基因携带情况。结果显示,经细菌分离共获得17株肠外致病性大肠杆菌,检出率为27.86%(17/61);分离菌株对氨苄西林、磺胺甲噁唑、四环素、氟苯尼考和氯霉素等药物耐药率为100%,对多黏菌素耐药率为41.18%,分离菌株均呈多重耐药;在分离菌株中,floR、Ⅰ类整合子携带率均为100%,Ⅰ类整合子基因盒主要携带dfrA17-aadA5、aadA22-aadA23-aadA25、dfrA12、dfrA12-aadA2和floR等类型耐药基因谱。本试验结果表明河南地区猪源肠外致病性大肠杆菌具有一定的流行性,且耐药问题十分严重,极易导致临床上治疗失败,应引起重视。

应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计

应用型本科兽医传染病学实验实训课程是兽医传染病学课程教学的重要组成部分,是动物医学专业的主要实践环节之一。该文就应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计的理念与依据、内容选取、组织与实施、考核进行研究与探索,并在2013级、2014级、2015级动物医学本科生中应用,取得较好的效果。

一株致多发性浆膜炎猪源肠外E.coli的分离与鉴定

无菌采集多发性浆膜炎病猪的心血、肝脏,进行细菌分离培养,并对分离菌株进行染色镜检、生化试验、PCR鉴定、小鼠致病性试验和药敏试验。结果显示,分离菌株为肠外致病性大肠杆菌;分离菌株对庆大霉素、恩诺沙星、强力霉素、氨苄西林、磺胺类药物、头孢噻肟等均耐药,对阿米卡星、多粘菌素、美罗培南、亚胺培南敏感。本研究为致多发性浆膜炎的猪大肠杆菌病的诊断与防治提供了参考依据。

导师制对应用型专业人才培养的实践与探索——以河南牧业经济学院部分专业为例

本科生导师制;聘任有丰富经验的教师;在师生双向选择的前提下对学生进行思想引导、生活指导、心理疏导、专业技能训练辅导、科研论文指导等的一种教育模式.本文就河南牧业经济学院动物医学专业传染病课题组在导师制实行背景、师生互选、培养方式与过程管理、实践技能训练辅导和科研论文指导进行了研究与探索;并在2013级、 2014级本科生中应用;结果表明;实行导师制对预防兽医领域人才培养质量具有促进作用.

高职院校兽医类专业学生在规模化猪场顶岗实习效果好

《关于全面提高高等职业教育教学质量的若干意见》[1]（教高[2006]16号）明确指出：“高等职业院校要保证在校生至少有半年时间到企业等用人单位顶岗实习”.为了响应教育部职业教育培养质量人才的指示精神,本校动物医学系从2008年开始,对兽医类专业实践教学进行改革,采用“2＋1”人才培养模式,即两年学校理论学习加一年校外实习.在校外的一年实习时间里,要求学生必须在养殖场顶岗实习半年以上,余下的实习时间,学生才能自由选择实习单位.通过几年来的顶岗实习教学改革与实践,提高了人才培养质量,增加了学生就业能力,毕业生深受企业好评.本文仅谈高职院校兽医类专业学生在规模化猪场顶岗实习的管理.

浅析高职院校班主任工作的策略与方法

班主任是班级建设的管理者和组织者,是学校、教师、学生之间沟通的桥梁和纽带,是学生教育管理的重要依托,在高职院校教育管理中起着不可替代的作用。本文从高职院校发展现状、学生特点、培养目标等入手,探讨做好高职院校班主任管理工作的方法与策略。

家畜传染病学教学改革探索与实践

家畜传染病学是兽医及相关专业的一门非常重要的专业必修课程,与兽医临床结合密切。为了培养合格的兽医专业人才,笔者结合多年的教学实践,教学课程设计、从教学内容、教学方法、教学考核手段等方面对家畜传染病学课程教学进行改革、探索并实践,取得了良好的教学效果。

猪腹泻病防治浅谈

猪腹泻病是猪的一种常见病．可由各种不同的因素引起，对养猪业的危害严重，特别是对断奶前仔猪的危害更加严重，如发病率高、死亡率高、耐过仔猪的生长速度慢、饲料转化率低以及药物治疗成本增加等。

牛流行热的诊断和防治

牛流行热(Bovine Ephemeral Fever),又叫三日热,暂时热,是由弹状病毒科水疱病毒属的病毒引起的牛的一种急性、热性传染病.