恩格列净通过抑制细胞焦亡改善糖尿病小鼠肾脏损伤

目的研究恩格列净(empagliflozin)对db/db小鼠肾脏损伤的保护作用及其潜在作用机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病肾病组(db/db组)和恩格列净治疗组(Empa组,恩格列净10 mg·kg-1·d-1灌胃),C57BL/6J小鼠作为正常对照组。干预3个月,检测血清生化、炎症因子等指标;病理染色观察肾脏病理学改变;检测细胞焦亡相关分子NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD的蛋白表达水平。结果与db/db组相比,Empa组空腹血糖、HbA1C、血脂、血清IL-1β、IL-18及ACR明显降低(均P<0.05),病理染色显示Empa组肾小球固缩、肾间质纤维化明显改善,Empa组肾脏组织NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白表达下调(P<0.05)。结论恩格列净可能通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡信号通路而改善糖尿病小鼠肾脏损伤。

2型固有淋巴细胞在糖尿病肾脏疾病发病机制中作用的研究

目的探讨2型固有淋巴细胞(ILC2s)在DKD发病机制中的作用。方法选取2017年8月至2018年1月于西南医科大学附属医院内分泌科住院的T2DM患者30例,DKD患者30例,另选取同期体检中心健康志愿者30名,分为T2DM组(n=30)、早期DKD组(DKD1,n=15)或晚期DKD组(DKD2,n=15)及正常对照组(NC,n=30)。流式细胞术和ELISA法检测各组血液中ILC2s比例和IL-4、IL-13水平。分别用IL-4或IL-13单独或联合高糖干预人肾小管上皮细胞(HK-2),ELISA和qPCR检测其转化生长因子β1(TGF-β1)和纤连蛋白(FN)表达水平。结果与NC组比较,T2DM、DKD1、DKD2组外周血ILC2s比例、IL-4、IL-13水平升高,DKD2组高于DKD组(P<0.05)。HK-2细胞培养、分组干预后,与Con组比较,其他组TGF-β1、FN及mRNA表达均升高(P<0.05);与IL-4组比较,HG+IL-4组TGF-β1、FN及mRNA表达均升高(P<0.05);与IL-13组比较,HG+IL-13组TGF-β1、FN及mRNA表达均升高(P<0.05)。结论 ILC2s可能部分通过分泌2类细胞因子促进DKD肾纤维化发展。

苯甲酸钠通过苯甲酰化诱导胰腺炎症和β细胞凋亡

目的探讨食品添加剂苯甲酸钠(NAB)是否通过苯甲酰化(Kbz)修饰途径诱导胰腺炎症和β细胞凋亡。方法体内实验:C57BL/6J雄性小鼠(8周龄、18~20 g)分为正常对照组(双蒸水饲喂)、NAB喂水组(1 g/kg NAB溶液饲喂), 检测血糖, 20周后处死, ELISA法检测空腹血清胰岛素、白细胞介素(IL)-18、IL-1β和苯甲酰辅酶A水平, 胰腺免疫组化检测Bax、IL-18、泛苯甲酰化(Pan-Kbz)和泛乙酰化(Pan-Kac)。体外实验:培养β-TC-6细胞, NAB(6 mmol/L)或苯甲酰辅酶A(100 μmol/L)作为刺激因子, 以酰基转移酶P300抑制剂A485(10 μmol/L)作为干预因子, 24 h后行qRT-PCR、ELISA和Western blotting检测细胞炎症、凋亡、胰岛素分泌和Pan-Kbz水平。结果体内实验中, 与正常对照组相比, NAB组小鼠糖耐量受损、空腹胰岛素水平降低, 血清苯甲酰辅酶A浓度明显升高, 胰腺IL-1β、IL-18、Bax蛋白表达相对增高, Pan-Kbz水平升高, 而Pan-Kac水平下调(均P<0.05)。体外实验中, NAB浓度依赖性抑制胰岛素分泌, 促进Pan-Kbz和炎症因子IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α释放, 抑制Bcl-2表达、上调Bax表达。A485逆转NAB诱导的Pan-Kbz修饰, 改善NAB诱导的炎症和凋亡, 促进胰岛素分泌(均P<0.05)。结论 NAB可能通过Kbz修饰途径诱导胰腺炎症、β细胞凋亡并损害胰岛素分泌功能。