海洋星虫提取物的营养分析及免疫调节作用的初步观察

目的测定海洋星虫提取物的蛋白质、氨基酸和微量元素含量 ,并初步观察其对小鼠免疫功能的影响。方法采用盐溶液抽提、超滤、乙醇沉淀等步骤 ,从海洋星虫制备得到海洋星虫提取物 ,分别采用凯氏定氮法、氨基酸自动分析仪和等离子体发射光谱仪测定蛋白质含量、氨基酸组成和微量元素水平。结果海洋星虫提取物的蛋白质含量为 5 5 .3% ,含牛磺酸、赖氨酸、精氨酸等 18种氨基酸和Zn、Cu、Ge、Se等 7种微量元素。动物实验表明 ,海洋星虫提取物能显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数 ,促进脾脏T淋巴细胞转化。结论海洋星虫提取物营养丰富 ,能明显提高机体的免疫功能。

热应激诱导的胸腺细胞凋亡及相关分子表达

目的 :探讨体外热应激诱导胸腺细胞凋亡与细胞表达Fas、Fas L及HSP70的关系。方法 :用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas L和HSP70表达阳性率。结果 :体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas L表达阳性率均呈时间依赖性增高 ,体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas L的表达与凋亡明显相关。体外热应激后 ,HSP70表达明显增高 ,在 6h达到高峰 ,此后缓慢下降。结论 :HPS70是热应激胸腺细胞损伤的标志 ,Fas与Fas

灵芝多糖胶囊对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的观察灵芝多糖胶囊对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法健康雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、香菇多糖组[110mg/(kg.d)]及灵芝多糖低[20mg/(kg.d)]、中[60mg/(kg.d)]和高[180mg/(kg.d)]剂量组,每组10只。每天灌胃给药1次,连续15d,除空白对照组外,其余各组在开始给药后第13天时腹腔注射环磷酰胺80mg/kg,连续注射3d,然后所有组均采用血细胞计数仪观察小鼠外周血细胞数量,称重法观察免疫器官重量指数,MTT法测定刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖率,乳酸脱氢酶法检测NK细胞杀伤活性,碳廓清实验观察小鼠碳廓清能力,RT-PCR法检测淋巴细胞白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)m RNA表达情况。结果与模型组比较,高剂量灵芝多糖胶囊可提高免疫抑制小鼠外周血WBC数量(P<0.05),中剂量灵芝多糖胶囊可提高免疫抑制小鼠外周血PLT数量(P<0.05)。灵芝多糖低剂量和中剂量组的脾脏指数明显高于模型组(P<0.05),低剂量组的胸腺指数明显高于模型组(P<0.05),低、中、高剂量组Con A和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖率、NK细胞杀伤活性及碳廓清指数均明显高于模型组(P<0.01,P<0.01);与模型组比较,低、高剂量灵芝多糖胶囊能够上调脾淋巴细胞中IFN-γ基因的表达(P<0.01),但未观察到灵芝胶囊对脾淋巴细胞IL-2基因表达有上调作用。结论灵芝多糖胶囊对免疫抑制小鼠外周血细胞及免疫功能具有一定保护作用。

羊栖菜多糖的提取及纯化

目的:分离纯化羊栖菜多糖。方法:采用水煮醇沉法、酸煮醇沉法及乙醇脱脂后水煮醇沉三种方法提取羊栖菜粗多糖。利用Sevag法结合胰酶消化去蛋白,SephadexG200分离纯化多糖。结果:三种方法提取获得粗多糖含量分别为:24.35%、23.87%和17.87%。分子筛层析分离得到两个在A620和A280重合的组分,其硫酸根的含量分别为8.95%和3.92%。结论:从羊栖菜粗多糖分离得到两个含有硫酸基的蛋白聚糖。

Fas与体外胸腺细胞自发凋亡的关系

目的探讨体外培养的胸腺细胞表达Ｆａｓ、Ｆａｓ－Ｌ与自发凋亡的关系。方法应用流式细胞术，检测体外培养不同时间的胸腺细胞的凋亡率及Ｆａｓ、Ｆａｓ－Ｌ表达的阳性率。结果体外培养的胸腺细胞自发凋亡率和Ｆａｓ表达阳性率，均呈时间依赖性增加， Ｆａｓ－Ｌ在体外培养２４ ｈ时明显增加。体外培养的胸腺细胞Ｆａｓ的表达与自发凋亡明显相关。结论Ｆａｓ是介导体外培养的胸腺细胞自发凋亡的重要分子。

白沙枇杷叶、枇杷花三萜酸类和黄酮类含量的比较

目的比较白沙枇杷叶、枇杷花主要功效成分熊果酸、齐墩果酸及总黄酮含量。方法采用HPLC法同时测定了枇杷叶和枇杷花中熊果酸和齐墩酸的含量;采用紫外可见分光光度法测定了枇杷叶和枇杷花总黄酮含量。结果白沙枇杷叶熊果酸含量为10.43 mg·g-1,齐墩果酸含量为2.71 mg·g-1,白沙枇杷花熊果酸含量2.87 mg·g-1,齐墩果酸含量为0.44 mg·g-1,白沙枇杷叶中三萜酸类含量明显高于枇杷花。白沙枇杷叶的总黄酮含量也高于枇杷花,两者分别为61.5 mg·g-1和38.7 mg·g-1。结论白沙枇杷叶的三萜酸类及总黄酮含量高于枇杷花。

高温对小鼠胸腺和脾脏T细胞亚群的影响

目的 研究高温对小鼠胸腺和脾T细胞亚群变化的影响 ,探讨高温诱导小鼠免疫器官损伤及热耐受形成的机理。方法 BALB/c小鼠每天 41℃高温处理 1小时 ,连续应激 9天 ,每间隔 1天于高温处理后 4h取胸腺和脾脏 ,称重后制成单细胞悬液 ,用流式细胞术检测CD4CD8细胞亚群。结果 高温的第 3天开始小鼠胸腺重量明显减轻 ,脾脏重量在第 3、第 5天明显减轻。胸腺CD4+ CD8+ 亚群比例第 1、3天明显减少 ,第 5天后开始恢复 ,胸腺细胞CD4+ :CD8+ 比值第 1天明显增高 ,之后迅速下降 ,第 7天下降到最低 ,第 9天开始恢复。脾细胞CD4+ :CD8+ 比值第 1天也增高 ,第 3天下降到最低值 ,此后开始恢复。结论 高温使小鼠胸腺和脾细胞均受到损伤 ,未成熟的CD4+ CD8+ 胸腺细胞亚群减少是高温处理后小鼠胸腺萎缩的主要原因 ,高温处理后期小鼠胸腺和脾T细胞亚群比例恢复可能提示热耐受的形成。

角燕制剂对小鼠免疫功能的调节作用

目的观察角燕提取物对小鼠免疫功能的影响。方法采用盐溶液提取、有机溶剂分级沉淀等步骤 ,从角燕的有效部位中制备得到角燕制剂 ,用不同剂量的制剂给小鼠灌胃 ,观察其对小鼠免疫功能的调节作用。结果角燕制剂能显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数 ,促进淋巴细胞转化 ,增强小鼠NK细胞杀伤活性及腹腔巨噬细胞的吞噬活性。结论角燕制剂能明显提高机体的免疫功能 。

羊栖菜多糖复方对雄性小鼠免疫及生殖器官辐射伤的防护

目的观察羊栖菜多糖复方制剂对γ射线损伤雄性小鼠免疫器官及生殖器官的防护作用。方法将50只雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组及低〔0.692 g/(kg.d)〕、中〔2.075 g/(kg.d)〕、高〔4.150 g/(kg.d)〕3个剂量羊栖菜多糖复方制剂组(SFPCP),每天1次灌胃给药,灌胃2周后,除正常对照组外,各组均以剂量率为0.83 Gy/h的60Coγ射线进行1次全身照射6 h,照射剂量为5 Gy。于照前1 d,照后3 d、14 d测定外周血白细胞数,照后14 d测定小鼠胸腺指数、脾指数、骨髓有核细胞数(BMNC)、睾丸质量指数、精子总数及精子畸形率。结果照后14 d,中剂量给药组外周血白细胞数为(1.4±0.2)×109/L,明显高于模型组(1.0±0.5)×109/L(P<0.05);照后14 d,低、中、高3个剂量组小鼠的胸腺指数分别为(2.21±0.63)mg/g、(2.10±0.43)mg/g及(2.03±0.32)mg/g,明显高于模型组的(1.58±0.58)mg/g(P<0.05),中、高剂量组的脾指数和骨髓有核细胞数显著高于模型组的(P<0.05);中、高剂量组睾丸质量指数分别为(3.55±0.30)mg/g和(3.57±0.31)mg/g,明显高于模型组(3.26±0.30)mg/g(P<0.05),低、中、高剂量组精子总数分别为(17.5±6.2)×104,(19.0±7.0)×104和(20.8±11.4)×104,明显高于模型组(12.2±7.4)×104(P<0.05),中、高剂量组的精子畸形率显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论羊栖菜多糖复方制剂对小鼠的免疫器官及生殖器官的辐射损伤具有一定的保护作用。

Fas/Fas-L与体外热应激胸腺细胞亚群变化及凋亡的关系

目的探讨体外热应激胸腺细胞的亚群变化及凋亡与胸腺细胞表达 Fas、Fas- L 的关系。方法用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率、CD4CD8亚群及表达 Fas、Fas- L的阳性率。结果体外热应激胸腺细胞的凋亡率和表达 Fas及 Fas- L 的阳性率均呈时间依赖性增高 ,凋亡的胸腺细胞以 CD4+ CD8+双阳性胸腺细胞为主。结论热应激主要诱导 CD4+ CD8+ 胸腺细胞凋亡 ;Fas与 Fas-

低剂量率裂变中子长期照射对大鼠外周血细胞的影响

目的探讨低剂量率裂变中子长期照射对大鼠外周血细胞的影响。方法96只雄性大鼠均分成对照组和照射组，照射组每天用低剂量率裂变中子（252Cf，吸收剂量率为0．35mGy/h）照射20．5h，在照射的第14d，28d，42d，56d，70d及停止照射后35d各取8只大鼠，用血细胞计数仪测定大鼠外周血WBC、RBC、PLT、HGB、MCV及HCT。结果低剂量率中子累积照射可使大鼠外周血WBC明显下降，在累积剂量为0．3Gy和0．4Gy时白细胞数明显低于对照组（P〈0．05），在累积剂量0．5Gy及停止照射后35d，照射组的WBC非常显著低于对照组（P〈0．01）；低剂量率中子照射在累积剂量为0．2Gy时，RBC反而显著高于对照组（P〈0．01），同时红细胞压积（HCT）、血红蛋白（HGB）含量明显高于对照组，提示有血液浓缩现象。在其他剂量处，RBC则表现为下降趋势，但仅0．5Gy时RBC下降有统计差异（P〈0．05）；累积剂量为0．3Gy，0．4Gy及0．5Gy时，照射组HGB低于对照组（P〈0．05）；在停止照射后35d，照射组MCV明显高于对照组。仅发现在累积剂量为0．2Gy时，照射组PLT显著低于对照组（PLT）。结论累积剂量0～0．5Gy的低剂量率裂变中子照射对大鼠外周血RBC及PLT的影响相对较少，但可造成太鼠外周血WBC减少，且在停止照射后一段时间。白细胞总数仍难以恢复至正常水平。

初代培养的胸腺基质细胞对小鼠胸腺细胞的粘附和吞噬作用

目的探讨胸腺基质细胞（ＴＳＣ）对胸腺细胞的调节作用。方法应用光镜、电镜和流式细胞术等，观察初代培养的ＴＳＣ对胸腺细胞发育的调节作用。结果光镜和电镜均可见，ＴＳＣ可大量粘附和吞噬胸腺细胞，其中部分胸腺细胞发生凋亡。尽管与ＴＳＣ共培养的胸腺细胞存活率高，凋亡率低，但其总数却显著减少。结论ＴＳＣ可通过粘附和吞噬作用，清除部分胸腺细胞。

胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响

目的探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用。方法应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用。结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少。TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少。结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞。

Fas/Fas-L介导热应激诱导的胸腺细胞凋亡

目的 探讨体外热应激诱导小鼠胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L表达的关系。方法 用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas-L表达阳性率。结果 体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas-L表达阳性率均呈时间依赖性增高，体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas-L的表达与凋亡明显相关。结论 Fas与Fas-L是介导体外热应激损伤胸腺细胞凋亡的重要分子。

角燕胶囊的毒理学实验研究

〔目的〕对海洋生物提取物角燕胶囊进行毒理学安全性评价。〔方法〕通过急性毒性试验、3 0d喂养试验以及致突变试验对角燕胶囊进行毒性评价。〔结果〕 ( 1)角燕胶囊的急性毒性试验LD50 大于每公斤体重 10 .0g ,表明属无毒级样品 ;( 2 )Ames试验、骨髓微核试验、精子畸形试验均为阴性结果 ;( 3 ) 3 0d喂养试验显示角燕胶囊无毒性 ,无体内蓄积中毒。〔结论〕角燕胶囊属无毒级产品 ,无致突作用 ,无遗传毒性 ,无明显体内蓄积中毒。

HSP70与热应激诱导胸腺细胞凋亡关系的研究

目的 :探讨体外热应激诱导胸腺细胞凋亡与细胞表达HSP 70的关系。方法 :用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及HSP 70表达阳性率。结果 :体外热应激后 ,胸腺细胞的凋亡率在 0h、6h、12h随时间延长而增高 ,但 2 4h后凋亡率不再增高 ;体外热应激胸腺细胞HSP 70表达阳性率比对照组明显增高 ,在 6h阳性率最高 ,12h、2 4h阳性率逐渐下降 ,至 2 4h ,已明显低于 6hHSP 70的阳性率 (P <0 .0 5 )。结论 :HSP 70是调节体外热应激诱导胸腺细胞凋亡的重要分子之一。

鲨鱼软骨粘多糖对辐照损伤雄性小鼠的保护作用

目的观察鲨鱼软骨粘多糖的抗辐照作用,为进一步临床应用提供资料。方法将50只ICR雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组及鲨鱼软骨粘多糖低〔0.5 g/(kg·d)〕、中〔1.0 g/(kg·d)〕、高〔2.0 g/(kg·d)〕3个剂量组,灌胃给药,每天1次,2周后,除正常对照组外,各组均以0.83 Gy/h60Coγ射线一次性全身辐照6 h,辐照剂量为5.0 Gy。结果辐照后3 d,中、高剂量组白细胞计数均为(1.0±0.4)×109/ml,明显高于模型组〔(0.7±0.2)×109/ml,P<0.05〕;辐照后14 d,中、高剂量组白细胞计数仍明显高于模型组(P<0.05)。辐照后,各组红细胞计数和血小板数计数无明显变化(P>0.05)。辐照后14 d,中、高剂量组的胸腺指数分别为(1.99±0.39)mg/g和(2.05±0.23)mg/g,明显高于模型组〔(1.58±0.58)mg/g,P<0.05〕;高剂量组脾指数也明显高于模型组(P<0.05)。中、高剂量组的骨髓有核细胞计数分别为(2.75±0.60)×107和(2.68±0.35)×107,明显高于模型组〔(2.16±0.44)×107,P<0.05〕;中、高剂量组SOD活性分别为(203±12)U/ml和(216±10)U/ml,明显高于模型组〔(187±17)U/ml,P<0.05,P<0.01〕;低、中剂量组MAD含量明显低于模型组(P<0.01)。结论鲨鱼软骨粘多糖对辐照损伤小鼠具有明显的保护作用。

胸腺五肽研究进展

胸腺五肽(TP5)是人工合成的五肽,其氨基酸顺序和结构与胸腺生成素(TP)的32-36位氨基酸组成相同,是TP重要的功能活性部分,具有与TP相似的生物活性.TP5能促进胸腺和外周T细胞的分化和发育,对机体的免疫功能具有双向调节作用,能使过高或过低的免疫反应趋向正常.动物实验和临床研究证明TP5对免疫功能低下和自身免疫病患者的免疫功能具有重要的调节作用.