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羊口疮病毒F1L基因真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
蒋尊
安红艳
+3 位作者
孙创奇
葛佳仪
梁倩
鲜思美
《贵州畜牧兽医》
2024年第1期57-59,共3页
为构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达载体,以ORFV-DZ分离株基因组作为模板,PCR特异性扩增F1L基因,扩增产物与pEGFP-N1质粒连接构建重组质粒pEGFP-F1L,经测序和酶切验证的阳性重组子转染HEK-293t细胞进行表达,通过荧光显微镜观察和Western...
为构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达载体,以ORFV-DZ分离株基因组作为模板,PCR特异性扩增F1L基因,扩增产物与pEGFP-N1质粒连接构建重组质粒pEGFP-F1L,经测序和酶切验证的阳性重组子转染HEK-293t细胞进行表达,通过荧光显微镜观察和Western blotting对融合蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR产物长度为1 029 bp,与F1L基因片段长度相符;阳性重组质粒pEGFP-F1L转染HEK-293t细胞可观察到明显绿色荧光,表达的融合蛋白大小约65 ku,与预期相符。结论:试验成功构建了pEGFP-F1L真核表达载体。
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关键词
羊口疮病毒
F1L基因
真核表达载体
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题名
羊口疮病毒F1L基因真核表达载体的构建及鉴定
1
作者
蒋尊
安红艳
孙创奇
葛佳仪
梁倩
鲜思美
机构
贵州大学动物科学学院
贵州省动物疫病研究所
出处
《贵州畜牧兽医》
2024年第1期57-59,共3页
基金
“羊口疮病毒F1L基因过表达对病毒增殖的影响研究”大学生创新创业训练计划项目[贵大(省)创字2022(103)]。
文摘
为构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达载体,以ORFV-DZ分离株基因组作为模板,PCR特异性扩增F1L基因,扩增产物与pEGFP-N1质粒连接构建重组质粒pEGFP-F1L,经测序和酶切验证的阳性重组子转染HEK-293t细胞进行表达,通过荧光显微镜观察和Western blotting对融合蛋白的表达进行鉴定。结果:PCR产物长度为1 029 bp,与F1L基因片段长度相符;阳性重组质粒pEGFP-F1L转染HEK-293t细胞可观察到明显绿色荧光,表达的融合蛋白大小约65 ku,与预期相符。结论:试验成功构建了pEGFP-F1L真核表达载体。
关键词
羊口疮病毒
F1L基因
真核表达载体
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
羊口疮病毒F1L基因真核表达载体的构建及鉴定
蒋尊
安红艳
孙创奇
葛佳仪
梁倩
鲜思美
《贵州畜牧兽医》
2024
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