中国6省2005年麻疹病毒分离株分子特征分析

研究2005年我国6省麻疹暴发、流行的野毒株基因型特征和分子流行病学,为进一步的麻疹防治策略提供科学依据.用RT-PCR方法,从2005年6省分离的48株麻疹病毒株中扩增出核蛋白(nucleoprotein, N)基因C末端676个核苷酸片段.再对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,并以C末端456个核苷酸片段构建基因亲缘性关系树,进行核苷酸、氨基酸同源性分析.6省分离的48株麻疹病毒均为H1基因型,其中两株为H1b亚型, 其余为H1a亚型.48株野毒株的核苷酸同源性为95.1%～100%(核苷酸差异为0～22bp),氨基酸同源性为92.7%～100%;与我国疫苗株S191的核苷酸同源性为88.7%～92.5%,氨基酸同源性为88.0%～91.2%.其中Shaanxi05-1和Yunnan05-1,Anhui05-2和Ningxia05-9的N末端456个核苷酸的同源性为100%;Hebei05-19、Anhui00-2和Liaoning02-2,Hebei05-1和Chongqing04-3的核苷酸的同源性为100%.引起2005年我国6省麻疹暴发流行的野毒株为H1基因型,并以H1a为绝对优势亚型.各省之间存在相同毒株引起的传播链,不同年份之间存在相同麻疹野毒株的持续循环传播.同时提示,有必要进一步研究由核苷酸变异引起的氨基酸变异及中和抗原位点等生物学性状的改变,可能影响麻疹病毒的毒力和传播力.

2003-2007年中国风疹病毒基因特征分析

本研究用Vero细胞或Vero/SLAM细胞从我国10个省(直辖市、自治区,下同)2003～2007年风疹暴发和散发病例的咽拭子标本中分离到57株风疹病毒,用RT-PCR方法扩增了57株风疹病毒E1基因1107个核苷酸的片段,并对该PCR产物进行序列测定和分析。结果提示,在基于WHO基因定型靶序列739个核苷酸片段构建的基因亲缘关系树上,其中55株风疹病毒株属于1E基因型,相对于其他国家的1E基因型,形成一个独立分支;另外2株风疹病毒属于2B基因型。57株风疹病毒大部分核苷酸的突变为无义突变,氨基酸序列高度保守,除了2株风疹病毒在E1蛋白血凝抑制和中和位点区域第212位氨基酸由Thr变为Ser,其他病毒株均无重要抗原位点的改变;所有我国已分离到的1E基因型风疹病毒在E1蛋白第338位氨基酸共享突变位点(Leu338→Phe338),而其他基因型以及其他国家的1E基因型风疹病毒在该位点均未发生突变,提示该氨基酸(Phe338)可能是我国1E基因型风疹病毒所特有。2003～2007年在我国10个省均分离到1E基因型,而2B基因型只在2006年从四川省的越南输入病例中分离到,提示1E为绝对优势基因型,2B基因型为输入基因型。与1979～1984年和1999～2002年我国流行的风疹基因型不同,发生了基因型的更替,近年我国风疹的流行是由1E基因型为主的风疹野病毒的多个传播链引起。

检测人血清中SARS冠状病毒IgG抗体的ELISA方法建立及其应用

为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法 ,利用PQE30表达系统在大肠杆菌M1 5中分段高效表达了SARS病毒N蛋白。通过金属鏊合亲和层析纯化了目的蛋白N - 1和N - 2 ,Westernblot结果显示 ,两个表达蛋白均具有较好的抗原性。然后将N - 1和N - 2蛋白共同包被 ,建立了检测人血清中SARS病毒IgG抗体的间接ELISA法。用此方法检测 1 2 0例临床诊断为SARS的病人和 2 4 4个不同年龄组正常人血清IgG抗体 ,结果 1 2 0例SARS病人的第一份血清IgG抗体总阳性率为 6 0 0 % ,发病第 0～ 7、8～ 1 0、1 1～ 1 4、1 5～ 2 7和 2 8天后的血清中 ,SARS病毒IgG抗体阳性率分别为 0、1 1 1 %、6 0 0 %、6 0 5 %和 70 3% ;而 2 4 4份正常人血清检测结果均为阴性 ,包括 1 0 0份1 4岁以下儿童血清也未发现假阳性。结果表明 ,利用大肠杆菌表达的N蛋白完全能够替代全病毒灭活抗原 ,所建立的间接ELISA方法简单 ,价格低廉 ,能保证生物安全 ,对SARS可疑病例的确诊和排除具有重要的实际应用价值 ,可用于SARS高危人群的血清流行病学监测 ,SARS疫情的控制和预防 。

1996年延边地区无菌性脑膜脑炎病因病毒的分离及初步鉴定

吉林省延边地区１９９６年６月发生无菌性脑膜脑炎流行，在全地区２１６万人口中，发病人数约５～６千人，死亡２人，为历史上所罕见。从病人脑脊液和粪便标本中分离到多株病毒，分离率较高（分别达到５２．４％和６６．７％）。用ＷＨＯ提供的ＲＩＶＭ肠道病毒组合血清进行中和定型，不能确定型别。ＲＴ－ＰＣＲ结果表明为肠道病毒。病人早期血清特异性ＩｇＭ抗体阳性率７２．０％，证明所分离的病毒为此次无菌性脑膜脑炎暴发流行的病因。此病毒为肠道病毒，有可能是肠道病毒的一个新型别或变异株。

华北地区2003年流动人口麻疹抗体水平及其影响因素分析

目的了解华北地区2003年流动人口麻疹抗体水平及其影响因素。方法华北地区5个省（自治区、直辖市．下同）共送检血清标本646份，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测麻疹IgG抗体。结果麻疹抗体总阳性率为95．4％，几何平均倒数滴度（GMRT）为1974．5。不同年龄组、不同省、不同免疫史人群麻疹抗体阳性率差异无显著的统计学意义；但小年龄组（20～24岁）与高年龄组（≥30岁）、有免疫史与无免疫史人群麻疹抗体GMRT差异有显著的统计学意义。疫苗免疫和自然感染产生的麻疹抗体水平差异可能是导致这一现象的主要原因。结论流动人口尤其是小年龄组人群纳入计划免疫管理对控制麻疹有重要意义。

乳胶凝集法检测麻疹IgM抗体的应用

为了筛选敏感、特异、快速和经济的麻疹IgM抗体检测方法 ,比较了IgM抗体捕捉乳胶凝集法 (IgM PA)、IgM抗体捕捉酶联免疫吸附试验 (ELISA)法和IgM抗体间接ELISA法检测麻疹血清IgM抗体的优越性。用IgM PA法和两种ELISA法共检测 12 5份麻疹可疑病例和 30份正常儿童血清。结果表明 :三种方法检测 30名健康儿童血清均为阴性。检测 12 5份麻疹可疑病例血清 ,IgM PA检出阳性 80份 ,阳性检出率 6 4%;两种ELISA法检出阳性 75份 ,阳性检出率 6 0 %;两者差异无显著的统计学意义。IgM PA法检测可疑麻疹病人的敏感性为 10 0 %,特异性为 90 %。此方法操作简便 ,成本较低 ,适宜于地区和县级疾病预防控制机构应用。

2005年中国3个县1～6岁儿童人肠道病毒71型血清流行病学调查

目的了解2005年中国3个县儿童人肠道病毒71型(Human Enterovirus 71,HEV71)抗体水平及HEV71在儿童中的自然感染状况,为预防控制手足口病(Hand-foot-mouth Disease,HFMD)在儿童中的流行提供依据。方法利用2005年9月进行儿童麻疹抗体水平调查时,在3个省各1个县共371名1～6岁儿童中所采集的血清标本,使用中和试验检测血清HEV71中和抗体,并对检测结果进行统计学分析。结果儿童HEV71中和抗体阳性164人,阳性率为44.2%。抗体阳性率分布与儿童年龄和所在地区有关,1岁儿童抗体阳性率最低,随着年龄的增长,抗体阳性率升高,各年龄抗体阳性率差异有显著的统计学意义(x2=25.73,P<0.05)。3个县儿童HEV71中和抗体阳性率不同,但差异无显著的统计学意义(x2=0.11,P>0.05)。抗体几何平均滴度1岁较低,2、3岁升高,4～6岁下降。3个县儿童HEV71中和抗体水平构成一致,以抗体阴性或低抗体水平为主。结论2005年以前3个县儿童曾发生HEV71感染;1～6岁儿童尤其是≤3岁儿童,HEV71中和抗体阳性率低,是HEV71导致HFMD的易感人群,应加强预防由HEV71引起的HFMD在≤3岁儿童中的流行或传播。

麻疹野病毒H1基因型在中国流行的分析

为确定现阶段中国流行的麻疹野病毒本土基因型别 ,在 1995～ 2 0 0 2年用EB病毒转化的狨猴淋巴母细胞(B95a细胞 )从河南、山东、安徽、上海等 19个省 (自治区、直辖市 ,下同 )的麻疹爆发和散发病人的咽喉拭子或尿液标本中分离到麻疹病毒 15 6株。用逆转录 聚合酶链反应 (RT -PCR)从 15 6株麻疹病毒中扩增出核蛋白 (N)基因碳末端 4 5 0个核苷酸片段。通过对扩增产物的核苷酸序列测定和分析证明 ,15 4株为麻疹病毒H1基因型 ;2株属于A基因型 ,为沪191疫苗株。由此证实 ,H1基因型已在中国广泛流行 ,为中国麻疹病毒的优势基因型。H1是麻疹病毒型内变异最大的基因型。这 15 4株H1基因型麻疹病毒 ,除外Shanxi0 0 - 6和Hunan95 - 2 3株 ,可进一步划分为H1a和H1b两个亚组。H1a的 4 5 0个核苷酸和H1b的差异在 2 0 0 %～ 4 0 0 %。H1基因型的 4 5 0个核苷酸和A基因型代表株Edmonston的基因差异在 6 0 0 %～ 7 33% ;与H2基因型代表株China94 - 1的基因差异在 5 11%～7 5 6 % ;与其它 17个基因型代表株的最大差异在 11 5 6 %。在中国开展麻疹病毒监测和建立麻疹病毒毒株库及基因数据库 ,对加速麻疹控制及未来消除麻疹都十分必要。

中国2013年麻疹/风疹实验室网络的运转与监测

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2013年麻疹/风疹实验室网络(Measles/Rubella Laboratory Network,M/RLN)的运转状况。方法分析中国2013年麻疹监测报告管理信息系统中实验室数据和全国M/RLN监测数据,评价中国2013年M/RLN运转的各项指标。结果 1血清学检测:中国2013年共采集散发麻疹疑似病例(Measles-like Illnesses,MLIs)74 296例的血清标本,占中国散发MLIs的97.30%;实验室确诊的散发麻疹病例26 686例,占散发MLIs的34.02%;中国2013年报告MLIs爆发157起,实验室证实麻疹爆发108起,风疹爆发26起。2病毒学监测:中国2013年M/RLN从29个省(自治区、直辖市,下同)分离到2325株麻疹病毒,其中2217株为H1a基因亚型,13株为A基因型,47株为D9基因型,45株为D8基因型,3株为B3基因型。2013年从17个省分离到187株风疹病毒,其中103株为1E基因型,84株为2B基因型。3质量控制:作为世界卫生组织(World Health Organization,WHO)西太平洋区麻疹参比实验室,中国疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)病毒病预防控制所国家麻疹/风疹实验室通过了2013年WHO的职能考核和现场认证。8个省级CDC麻疹/风疹实验室(Measles/Rubella Laboratory,M/RL)(包括新疆、北京、河北、四川、黑龙江、宁夏、广东和广西)通过了2013年WHO专家组的现场认证;32个省级(包括新疆生产建设兵团)CDC M/RL,全部通过了由M/RLN组织的血清标本复核和WHO组织的职能考核。结论中国2013年M/RLN运转良好,MLIs的实验室诊断比例和病原学检测比例进一步提高,为麻疹和风疹的鉴别诊断和病原学监测提供了良好的技术平台,同时也积累了大量的本土麻疹/风疹病毒流行株和输入株的基因背景资料,为在中国实现消除麻疹的目标提供了重要的和实验室技术支撑。

中国流行的麻疹病毒基因型和亚型趋势分析

目的分析中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)1993～2006年本土麻疹病毒基因型和基因亚型的流行趋势。方法依据全国麻疹实验室网络监测数据库、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家麻疹实验室病毒学监测数据库,分析中国麻疹病毒分子流行病学资料。结果1993～2006年,从29个省(自治区、直辖市,下同)分离到748株麻疹病毒,其中743株为H1基因型,1株为H2基因型,1株为A基因型,3株为疫苗相关A基因型。在H1基因型中,684株为H1a基因亚型,50株为H1b基因亚型,9株为H1c基因亚型。从29个省分离到H1a基因亚型(西藏、湖北省未开展),H1b基因亚型只从10个省分离到,H1c基因亚型在1993～1994年从4个省分离到。自2000年以来,H1a基因亚型逐年成为优势流行亚型,并呈上升趋势;H1b基因亚型逐年转为弱势,其传播于2006年被阻断;而H1c基因亚型的流行自1995年已经消失。结论通过对1993～2006年中国29个省流行的麻疹病毒分子流行病学的系统研究,阐明了在麻疹控制和加速控制阶段中国流行的麻疹野病毒的基因变异规律,以及病毒基因型别在地域和年代上的分布,证实H1基因型是中国近14年麻疹病毒流行的绝对优势本土基因型,其中H1a逐渐成为中国近几年流行的绝对优势基因亚型。

中国2009年麻疹/风疹实验室网络运转情况分析

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2009年麻疹/风疹实验室网络(Measles/Rubella Laboratory Network,M/RLN)的运转状况。方法分析麻疹监测报告管理信息系统中的实验室数据和全国2009年M/RLN监测数据,评价中国M/RLN运转的各项指标。结果①血清学检测:全国2009年共采集散发疑似麻疹病例(Measles-like Illnesses,MLI)血清学标本44691份,标本采集率66.83%;实验室确诊的散发麻疹病例29272例,占散发MLIs的43.77%。全国2009年共报告疑为麻疹爆发414起,经证实322起为麻疹爆发,33起为风疹爆发。麻疹爆发中经血清学证实的占95.03%;采集病原学标本的爆发占30.43%。②病毒学监测:2009年27个省(自治区、直辖市,下同)疾病预防控制中心(CDC)麻疹实验室共送检277株麻疹病毒,经证实除D9基因型、D4基因型、d11基因型各一株外,其余274株均为我国本土的H1a基因亚型;9个省CDC麻疹实验室共送检53株阳性风疹病毒,均为1E基因型。③质量控制:同时作为世界卫生组织(WHO)西太平洋区麻疹参比实验室的中国CDC病毒病预防控制所国家麻疹实验室(National Measles Laboratory,NML),2009年通过了WHO的职能考核和现场认证;湖北、江苏、安徽、湖南、海南、福建、新疆、重庆、贵州、云南、内蒙古和河南12个省级CDC麻疹实验室通过了WHO专家组的现场认证;31个省CDC麻疹实验室通过了由NML组织的血清标本复核和WHO组织的职能考核。结论中国2009年M/RLN运转良好,为MLIs的实验室诊断和麻疹病毒的监测提供了良好的技术平台,同时也获得了本土麻疹/风疹流行株,积累了中国麻疹和风疹野病毒基因的背景资料,为中国制定消除麻疹的策略提供参考,也为2012年消除麻疹奠定了良好的实验室基础。

中国2003年流行的麻疹野病毒分子流行病学分析

目的为了解不同省(自治区、直辖市,下同)2003年流行的麻疹野病毒是否存在基因型或亚型的差异.方法对2003年15个省分离的107株麻疹病毒进行了分子流行病学研究,对同一年份不同省流行的麻疹野病毒的基因特征及分子差异做了进一步的分析.用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)从107株麻疹病毒中扩增出核蛋白(nucleoprotein,N)基因羧基(COOH)末端450个核苷酸片段.通过对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,构建基因亲缘性关系树,进行遗传距离分析.结果106株为麻疹病毒H1基因型;1株属于A基因型,为沪191(S191)疫苗株.106株H1基因型毒株分成2个亚型,101株为H1a,5株为H1b基因亚型.2003年H1b亚型主要流行于海南、四川、上海、贵州省;而H1a在全国广泛分布;未发现H1c基因亚型,该亚型1993～1994年曾是北京、山东、河北、湖南省流行的优势毒株.对比2003年与1993～2002年流行的麻疹病毒基因亚型,H1a呈上升趋势,H1b亚型在所有H1基因型中的比例由1995～2002年的24.3%下降到2003年的4.7%,而H1c亚型逐渐消失.对2003年分离的病毒进行省内和不同省间遗传距离的比较证明,各省内的毒株变异范围在0%～6.1%(0～27个核苷酸差异);各省间的变异范围在0%～4.3%(0～20个核苷酸差异);省内差异最大值大于省间差异.结论中国最近11年来流行的麻疹病毒基因亚型趋势为:H1a呈上升趋势,逐渐成为优势亚型;H1b亚型逐年降低转为弱势;H1c亚型逐渐消失.2003年麻疹变异毒株呈散在分布,无明显地域性.同时表明,中国的麻疹流行是由H1a和H1b中的许多不同病毒株造成的多个传播链引起的.讨论了在中国继续开展麻疹病毒分子流行病学监测的必要性和紧迫性,并展望了分子流行病学监测对于中国控制和消除麻疹的应用前景.

湖南和甘肃省2014年新生儿脐带血麻疹抗体水平调查

目的通过对我国部分地区新生儿脐带血麻疹免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)G抗体阳性率和抗体浓度的检测,为制定含麻疹成分疫苗(Measles-containing Vaccine,MCV)免疫相关策略提供参考。方法采用商品化酶联免疫吸附试验检测试剂盒对2014年湖南和甘肃省1044份新生儿脐带血麻疹Ig G抗体进行了检测和定量分析。结果新生儿脐带血麻疹Ig G抗体总阳性率为90.13%,平均抗体浓度为762.5毫国际单位/毫升(m IU/ml);湖南和甘肃省新生儿脐带血麻疹Ig G抗体阳性率和平均抗体浓度分别90.00%,747m IU/ml和90.26%,777m IU/ml,差异无统计学意义(χ2=0.72,P>0.05)。具有完全保护能力的高滴度(≥1000m IU/ml)麻疹Ig G抗体个体占43.01%。随产妇年龄增加,新生儿脐带血麻疹抗体浓度呈显著下降趋势(Spearman秩相关系数=-0.943,P<0.05)。乡村新生儿脐带血麻疹Ig G抗体阳性率和高浓度抗体比例均显著高于城镇新生儿(χ2=10.77,χ2=32.3;P均<0.05)。结论麻疹病例中<1岁婴儿构成比增加可能与出生后无麻疹抗体、抗体衰减较快和产妇生育年龄后移导致母传麻疹抗体滴度降低等因素有关,而≥15岁成人病例增加可能是由于MCV免疫后抗体水平衰减较快导致易感人群累积。应常规开展健康人群麻疹抗体水平监测,提高8月龄首剂MCV接种的及时性,适时对高危成年人群开展MCV补充免疫活动。

北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平调查

目的了解北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体水平，为控制先天性风疹综合征（CRS）提供科学依据。方法2006年6～8月随机抽取北京和重庆市各1个区作为调查点，对20～39岁育龄期妇女623人（北京市311人，重庆市312人）进行血清流行病学调查。结果北京和重庆市育龄期妇女风疹抗体阳性率分别为85．21％和78．53％，自然感染获得抗体阳性率分别为85．08％和77．89％；风疹抗体分布与年龄、地区有关，随着年龄的增长抗体阳性率和几何平均浓度有下降的趋势。结论制定科学的风疹疫苗使用策略和免疫程序，提高育龄期妇女的免疫力，是减少CRS发病的有效手段。

中国2005年流行麻疹野病毒H_(1a)基因亚型血凝素基因和氨基酸特征分析

目的研究2005年引起中国麻疹流行的麻疹野病毒H1a基因亚型血凝素蛋白（HA）核苷酸和氨基酸特征及变异程度。方法从各省疾病预防控制中心麻疹实验室送检的2005年麻疹野病毒中选取4个H1a基因亚型代表株，并选取2004年河北省流行的1个Hh基因亚型代表株做对比分析。提取麻疹病毒核糖核酸（RNA），用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增出核蛋白（N）羧基末端（450nt）和HA蛋白编码区基因片段（1854nt），并对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析，与GenBank收录的1993～1994年中国优势基因型代表株、中国疫苗株沪191（S191）和长47（C47）HA蛋白和核蛋白羧基末端构建基因亲缘性关系树，分析HA蛋白基因的核苷酸／氨基酸的同源性。结果5株分离株全部为H1基因型的H1a亚型。5株H1a亚型毒株的HA与中国疫苗株S191相比有94～96个核苷酸差异，28～30个氨基酸差异；与C47有94～98个核苷酸差异，28～30个氨基酸差异。5株Hh亚型HA第719位核苷酸由G—A，导致第240位的丝氨酸（S）突变成天门酰胺（N），致使HA蛋白的1个N型糖基化位点丢失。结论该研究表明，麻疹野病毒H1a亚型株的HA蛋白的核苷酸／氨基酸，与1993～1994年流行株相比未发生明显变异。但与S191和C4，相比有较大基因变异，丢失了个别中和抗原位点，但大部分中和抗原位点未发生变异。中国使用的疫苗对现流行的麻疹野病毒仍然具有保护作用，但初免成功后是否绝大部分人具有终身保护还有待进一步病毒学和流行病学论证。2005年麻疹流行与病毒本身的基因突变无明显关联，而是由易感人群的积累和人口流动导致广泛的传播所致。

中国2007年麻疹／风疹实验室网络的运转与监测

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2007年麻疹/风疹实验室网络的运转情况。方法分析全国2007年麻疹/风疹实验室网络监测数据库、中国疾病监测信息报告管理系统数据库、中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家麻疹/风疹实验室血清学和病毒学监测数据库的资料,评价中国麻疹/风疹实验室网络运转的各项指标。结果①血清学监测:报告麻疹疑似病例102422例,有实验室诊断的53986例,占麻疹疑似病例的52.7%。②病毒学监测:从19个省(自治区、直辖市,下同)分离到麻疹病毒266株,除1株为A基因型外,其余均为H1基因型中的H1a基因亚型。从6个省分离到风疹病毒46株,均为1E基因型。③实验室网络质量控制:国家麻疹/风疹实验室通过了世界卫生组织(WHO)的职能考核和现场认证。30个省CDC麻疹实验室通过了国家麻疹/风疹实验室组织的职能考核和血清复核,11个省CDC麻疹实验室通过了现场认证考核。结论2007年中国麻疹/风疹实验室网络运转良好,为麻疹疑似病例的实验室诊断和麻疹流行状况监测提供了良好的技术平台,同时也获得了本地麻疹/风疹病毒流行株,积累了麻疹/风疹野病毒基因背景资料,为2012年消除麻疹奠定了实验室基础。

中国麻疹实验室网络的建立及运转

目的评价中国麻疹实验室网络建立的意义和建立初期运转情况。方法对2002～2004年中国麻疹实验室网络建立初期的各项运转指标进行评价。结果2001年，中国疾病预防控制中心（CDC）病毒病预防控制所国家麻疹实验室正式成立，并且在31个省（自治区、直辖市，下同）CDC建立了麻疹实验室，逐步建立了市（地区、州、盟，下同）级麻疹实验室，现已初步形成了一个包括国家麻疹实验室、31个省级CDC麻疹实验室、331个市级CDC麻疹实验室在内的麻疹实验室快速反应诊断系统。目前，已建立麻疹／风疹实验室的诊断标准，并为省、市级CDC麻疹／风疹实验室在监测方面提供培训和技术支持，组织对31个省级CDC麻疹实验室进行职能考核和血清复核等质量控制工作。31个省级CDC麻疹实验室和多数市级CDC麻疹实验室可开展常规的麻疹血清学检测。在血清学监测的基础上，省级CDC麻疹实验室开展了麻疹病毒学监测工作，1993～2004年通过省级CDC麻疹实验室网络的共同努力，在27个省共分离到366株麻疹病毒。结论中国三级麻疹实验室网络已经成功建立并运转良好，为疑似麻疹病例的实验室诊断和鉴别诊断提供了重要的技术支撑，为流行病学专家及时采取强化免疫措施，阻断麻疹病毒的传播，提供了重要的科学依据；建立了中国的麻疹病毒毒株库和基因数据库，为了解中国麻疹野病毒流行的基因型、病毒来源、基因变异情况和传播途径打下了基础；在评估人群对麻疹免疫力、疫苗免疫效果中起到了不可忽视的作用。

中国2010年麻疹/风疹实验室网络运转情况分析

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2010年麻疹/风疹实验室网络(Measles/Rubella Laboratory Network,M/RLN)的运转状况。方法分析2010年麻疹监测信息报告管理系统中的实验室数据和全国M/RLN监测数据,评价中国M/RLN运转的各项指标。结果①血清学检测:2010年全国共采集散发麻疹疑似病例(Measles-like Illnesses,MLI)血清学标本41273例,标本采集率74.69%;实验室确诊的散发病例25917例,占散发MLIs的62.79%。全国2010年共报告疑为麻疹爆发353起,经证实316起为麻疹爆发,16起为风疹爆发。确诊的麻疹爆发中,经血清学证实的占94.94%;采集病原学标本的占40.19%。②病毒学监测:2010年23个省(自治区、直辖市,下同)疾病预防控制中心(Center for Disease Control and Prevention,CDC)麻疹/风疹实验室共送检286株麻疹病毒,其中除1株为D9基因型,2株为D11基因型,2株为A基因型(疫苗相关病例)外,其余281株均为我国本土的H1a基因亚型。12个省CDC麻疹/风疹实验室共送检69株阳性风疹病毒,均为1E基因型。③质量控制:中国CDC病毒病预防控制所国家麻疹/风疹实验室(National Measles/Rubella Laboratory,NM/RL)作为世界卫生组织(World Health Organization,WHO)西太平洋区麻疹参比实验室,在2010年通过了WHO的职能考核和现场认证。同时西藏、新疆、广东、广西、辽宁、黑龙江、四川、青海、宁夏、甘肃、河北和北京12个省级CDC麻疹/风疹实验室,通过了WHO专家组的现场认证;31个省级CDC麻疹/风疹实验室,全部通过了由M/RLN组织的血清标本复核和WHO组织的职能考核。结论中国2010年M/RLN运转良好,为MLIs的实验室诊断、鉴别诊断、麻疹病毒和风疹病毒学的监测提供了良好的技术平台,同时也获得了本土麻疹/风疹流行株,积累了中国麻疹和风疹野病毒基因的背景资料,为中国制定消除麻疹的策略提供了重要的科学依据,也为中国消除麻疹奠定了良好的实验室网络技术支撑体系。

定量酶联免疫吸附试验在检测麻疹IgG抗体中的应用与比较

目的对定量酶联免疫吸附试验(ELISA)在麻疹病毒IgG抗体检测中的应用进行评价,并与传统的半定量ELISA方法做比较。方法收集2003年的92份山西省和内蒙古自治区健康成人血清,用德国维润公司定量ELISA试剂盒测定麻疹IgG抗体滴度。这些血清已经用半定量方法将抗体滴度分为阴性和1∶200、1∶800、1∶3200、1∶12800四个组。将两种方法测定的结果进行比较。结果定性测定结果分析发现,92份血清标本中,5份阴性,1份可疑,86份阳性,与传统半定量ELISA方法的一致率为96·74%,统计分析两实验结果差异无显著的统计学意义。定量测定结果分析发现,随着抗体滴度的增高,该组血清抗体国际单位(IU)也随之上升,均数也随之增高,抗体滴度分组与抗体IU呈明显的正相关,相关系数(rs)为0·963,P<0·000。可重复性检验证明该试剂的可重复性较好。结论定量ELISA方法在麻疹以及其它病毒血清学研究中的应用具有优势。

麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验试剂的比较和评价

目的对目前中国市场上已有的两种麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)试剂(德国Virion/Serion试剂和德国IBL试剂)进行比较和评价,筛选适用于2006年全国人群麻疹血清流行病学调查的试剂。方法以蚀斑减少中和试验(Plague Reduction Neutralization Test,PRNT)的检测结果为"金标准",分别用两种ELISA试剂检测52份麻疹IgG抗体组合血清,然后对试剂的定性和定量能力进行全面分析和评价。结果两种ELISA试剂均能正确的将13份PRNT结果为阴性的血清判定为阴性,特异度均为100%。两种试剂中,Virion/Serion试剂的敏感度为94.9%,与PRNT结果的相关性Kappa值为0.902,相关系数为0.878(P<0.01);IBL试剂敏感性为58.8%,与PRNT结果的相关性Kappa值为0.441,相关性系数为0.850(P<0.01)。结论Virion/Serion试剂的特异性、敏感性较好,有单孔IgG抗体定量能力,价格适中,适于在自动化工作平台工作站中开展大规模血清样本的检测。