氧化苦参碱通过TGF-β1/Smads信号通路对脓毒性休克大鼠心肌损伤的保护作用

目的 探究氧化苦参碱(OMT)通过TGF-β1/Smads信号通路对脓毒性休克大鼠心肌损伤的保护作用机制。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为7组(n=8):CON组、OMT组、CLP组、CLP+DEX组[CLP+地塞米松(DEX),10 mg/kg]和CLP+OM T-M组(CLP+OMT 52 mg/kg)、CLP+OMT-H组(CLP+OMT 26 mg/kg)、CLP+DEX组(CLP+OMT 13 mg/kg)。感染性休克模型由CLP诱导。由右侧颈总动脉测定大鼠心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左心室内压变化率(LVdp/dtmax)、左心室收缩末期压(LVESP)和通过插入心导管术测量左心室舒张末压(LVEDP)。取出心脏进行组织学分析,苏木精-伊红染色后,光镜下观察心肌组织病理变化。RT-PCR分析TNF-α和IL-1β的相对表达。蛋白质印迹分析TGF-β1和Smad2蛋白表达。通过放射免疫测定法测定心肌组织中TNF-α和IL-1β的水平。结果 与CON相比,OMT组的心功能参数,包括HR、MAP、LVSP、LVEDP和±LVdp/dtmax指数未受影响。在CON和OMT组之间未发现心肌组织的差异。心内膜完整,无水肿及纤维结缔组织增生。心肌条纹清晰,细胞核居中,未见血管舒张和炎性细胞浸润。心外膜在基质中表现出完整性,没有炎性渗出物。与CON相比,OMT组的心肌组织未见明显变化,均具有正常的形状和清晰的结构。CLP组的超微组织心肌组织受到显著损伤。与CLP相比,CLP+OMT组超微组织心肌组织损伤明显减轻。CLP+OMT-L组表现出最高水平的损伤。CLP+DEX组的超微组织心肌组织几乎正常。蛋白质印迹分析显示OMT对照心肌组织中TGF-β1和Smad2蛋白水平与CON组相似,但在CLP组中观察到显著更高(P<0.05)。然而,与CLP相比,CLP+OMT和CLP+DEX组的TGF-β1和Smad2蛋白水平显著降低(P<0.05)。放射免疫分析显示,与CON和OMT组相比,CLP组TNF-α和IL-1β蛋白水平显著升高(P<0.05)。与CLP组相比,发现CLP+OMT和阳性对照中TNF-α和IL-1β蛋白水平显著降低(P<0.05)。OMT对照和CON心肌组织中的TNF-α和IL-1β mRNA水平正常,CLP组的水平显著增加(P<0.05)。与CLP组相比,CLP+OMT和阳性对照中TNF-α和IL-1β mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论 OMT通过抑制TGF-β1/Smads信号通路,在治疗感染性休克诱导的心肌损伤方面表现出巨大的治疗潜力。

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