雪茄特征香韵净油制备分离研究

为开发雪茄特征香韵净油,以古巴碎叶为对象,通过对比石油醚提取、超临界萃取和亚临界萃取三种制备工艺对雪茄烟叶净油挥发性成分、感官品质和提取率的影响,选取亚临界萃取工艺并优化其工艺条件,同时采用分子蒸馏技术对亚临界萃取烟叶净油进行组分分离。研究结果如下:(1)综合考虑挥发性成分、感官品质和提取率等因素,确定采用亚临界萃取工艺制备雪茄烟叶净油;(2)进行单因素考察实验,确定亚临界萃取工艺条件为,料液比1:15、夹带剂添加量0.75 mL/g、萃取温度40℃、萃取时间30 min、萃取次数3次,此条件下雪茄烟叶净油提取率为4.55%;(3)亚临界萃取雪茄烟叶净油经过分子蒸馏分离,得到4级轻组分和重组分,根据感官评吸和GC-MS分析,分子蒸馏工艺可设定为60℃和100℃两个温度梯度,得到作用效果不同的2个轻组分。本研究可为雪茄特征香韵净油制备和雪茄废弃烟叶的高价值利用提供一定参考。

两种雪茄烟分段烟气香气成分及香气特征差异分析

为探究雪茄烟前、中、后3段烟气的差异性,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对长城2号和蒙特4号两种雪茄烟分段烟气香气成分进行检测,结合感官评价和气味贡献权重对雪茄烟香气特征进行研究,并基于偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法筛选雪茄烟中关键差异香气成分。结果表明:抽吸过程中烟支变短、截留效果减弱,雪茄烟烟气中香气成分的数量和释放量整体呈增加趋势;在雪茄烟气味贡献权重中,随着抽吸的进行,长城2号的豆香和木香减弱、咖啡香增强,蒙特4号的豆香减弱、辛香增强,这些气味的权重变化与感官评价结果具有一致性;长城2号中引起香气特征变化的有γ-己内酯、糠酸、苯乙酮、苯乙酸、2,6-二甲基吡嗪等12个关键差异香气成分,蒙特4号中引起香气特征变化的有雪松醇、2-甲基丁醛、4-乙烯基愈创木酚、愈创木酚、γ-壬内酯等11个关键差异香气成分。该研究结果反映了雪茄烟抽吸过程中烟气成分变化规律,并解释了抽吸过程中风味变化的原因。

基于SHS-GC-MS和GC-IMS的对两种雪茄烟挥发性香味成分的分析与研究

【目的】为明确雪茄烟挥发性香味成分,比较不同雪茄烟挥发性香味成分的差异性。【方法】采用静态顶空-气质联用仪(SHS-GC-MS)和气相色谱离子迁移谱(GC-IMS)两种分析检测技术,对长城2号和蒙特4号两种雪茄烟的挥发性香味成分进行检测,并结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)方法分析了两种雪茄烟的香味主要差异成分。【结果】(1)从嗅香来看,两支雪茄烟的主体香韵均为较为明显的晾晒烟特征香气和蜂蜜样的甜香。蒙特4号的花香、木香和可可香气更加明显一些,长城2号的甜香和膏香则相对较强,并稍带果甜,香气比较厚实浓郁。(2)通过SHS-GC-MS分析检测技术从长城2号雪茄烟中鉴定出18种挥发性香味成分,从蒙特4号中鉴定出30种挥发性香味成分;蒙特4号中异龙脑、乙酸异龙脑酯、α-柏木烯、罗汉柏烯等成分的含量明显高于长城2号;而3,5-二甲基苯酚和6-甲基-5-庚烯-2-酮两种香味成分仅存在于长城2号中。(3)GC-IMS在两种雪茄烟中共鉴定出47种成分,包括了3种酸类、4种酯类、12种酮类、10种醛类、11种醇类、2种杂环类和5种烯烃类成分;运用PCA和PLS-DA的分析方法发现两种雪茄烟的香味特征成分在模型中实现了显著分离,香味成分差异显著。以变量重要性排序(VIP)>1.0为标准,其主要差异成分为环己酮、2,3-丁二酮、2-戊酮、苯甲醛、反式-2-戊烯醛二聚体、双戊烯。【结论】SHS-GC-MS与GC-IMS两种分析检测技术的结合可以检测出两款雪茄烟更多的挥发性香味成分,辅以嗅香评价、统计学分析方法可以实现不同雪茄烟的差异性分析。

榛叶饲喂育肥猪试验

榛叶饲喂育肥猪试验甘孜州畜牧业科学研究所蒋忠荣榛为桦木科榛属，在甘孜州康定、泸定等县分布较集中，资源丰富，以川榛、藏刺榛为主。在夏季枝叶茂盛期榛叶产量可达９万ｋｇ／ｈａ以上，全州每年开发量在７０００万ｋｇ以上。据分析，榛叶干物质中粗蛋白质达１７．８２...

津田芜菁泛素结合酶BrUBC11基因的克隆及表达分析

为阐释津田芜菁Br UBC11基因的表达特性,克隆了津田芜菁UBC11基因的全长c DNA序列,命名为Br UBC11,Gen Bank登录号为KM396887。其c DNA全长685 bp,ORF区全长447 bp,编码148个氨基酸的开放阅读框;亚细胞定位结果显示,Br UBC11-GFP定位于细胞核内,表明Br UBC11蛋白可能在细胞核中发挥其功能。荧光定量PCR检测Br UBC11在芜菁不同组织中的表达结果表明,该基因在花瓣中表达量最高,花蕾中次之,具有组织特异性。而且Br UBC11在芜菁白色根皮中的表达受长波紫外线(UV-A)诱导。研究结果显示,在芜菁中,UBC11属于多功能基因,具有潜在的参与花发育和UV-A信号转导相关途径的功能。

四川省主要有毒植物的生态分布

通过收集资料、走访调查、实地采样、制作标本鉴定等方法,对四川省有毒植物的生态分布进行了调查分析。调查显示,省内主要有毒植物分属3 4科、6 0属、9 2种;主要分布在甘孜、阿坝、凉山、雅安、乐山、绵阳等地,其中棘豆属、瑞香狼毒和橐吾属的植物在川西北高原牧区已成为优势种,分别约占牧区草场面积的1 0%、2%、2.7%。紫茎泽兰在全省分布已超过8 1万hm2,占全省土地面积的0.1 6%,以凉山、攀枝花尤为严重。

藏猪生长激素基因核苷酸多态性分析

本文应用PC R方法,体外扩增了藏猪5个个体的生长激素(GH)基因64～2022位之间1959 bp的片段(包含完整的5个外显子和4个内含子),并进行了序列测定。结合网上下载的猪GH基因同源区段序列进行比较分析,结果表明:藏猪GH基因有较丰富的核苷酸多态性;检出的24个核苷酸突变位点中有6个发生在外显子区,外显子2内有4个突变位点,导致2个氨基酸变异,外显子3和外显子4内各有一个突变位点,特别是外显子4内这个突变位点引起了1个氨基酸变异;单核苷酸转换(21个位点)大于颠换(5个位点)。

川西北高寒草甸对火烧干扰的短期响应

2011年9月对道孚县灌丛草甸火烧后的植物群落特征与土壤环境进行了调查研究。结果表明,火烧对高寒草甸植物群落有显著的负面作用(P<0.05),灌丛的盖度、高度、株丛数、基围和生物量均显著减少(P<0.05),草本植物群落的盖度、高度和生物量也显著减少(P<0.05);火烧对植物群落地上部分的生长有显著的抑制作用(P<0.05),但有利于草本植物地下根系的生长,且火烧使高寒草甸草本植物群落的丰富度和多样性指数提高。高寒草甸土壤理化性质和土壤微生物的变化表现为:土壤微生物生物量碳、土壤微生物生物量氮、10-20cm土层容重和速效磷明显增加(P<0.05),而土壤pH值和全钾显著下降(P<0.05)。

青藏高原细粒棘球绦虫的分子鉴定与遗传变异分析

为了探索青藏高原细粒棘球绦虫的遗传变异特点与系统发生关系,为该地区细粒棘球蚴病的分子诊断、流行病学和防控研究提供基础资料。本研究对采自青藏高原的43株细粒棘球蚴的线粒体ND5基因全序列进行测序及分析,共鉴定出42个分离株属于细粒棘球绦虫G1型,1个西藏绵羊分离株属于细粒棘球绦虫G6型。G1型分离株中,共有43个变异位点,分为27个单倍型,单倍型多样性为0.940±0.028,核苷酸多样性为0.001 93±0.001 14,单倍型之间的平均遗传距离为0.002 6。单倍型网络图以H9为优势单倍型,其余单倍型围绕它呈辐射状。单倍型歧点分布分析呈单峰,中性检验得到显著的负值。结果表明青藏高原细粒棘球绦虫流行的主要基因型为G1型,且种内变异较小。

牦牛球虫病的流行病学调查

通过采集甘孜州气候、生态环境迥异的半农半牧区康定县和纯牧区色达县不同乡镇的共计500头份牦牛粪样,对牦牛球虫感染情况进行调查:球虫平均感染率为30.00%(150/500),其中康定县的平均感染率为31.95%(54/169),色达县的平均感染率为29.00%(96/331);公牛粪样球虫阳性率为26.38%(43/163),母牛粪样球虫阳性率为31.75%(107/337);成年牛(3岁以上)粪样球虫阳性率为16.22%(42/259),犊牛及青年牛(3岁以下)粪样球虫阳性率为44.81%(108/241);从牦牛感染球虫的种类来看,单一感染(62/150)小于混合感染(88/150);共检出9种球虫,分别为牛艾美耳球虫(24.00%)、柱状艾美耳球虫(12.00%)、邱氏艾美耳球虫(16.00%)、亚球形艾美耳球虫(18.03%)、巴西艾美耳球虫(8.27%)、加拿大艾美耳球虫(6.67%)、椭圆艾美耳球虫(9.33%)、怀俄明艾美耳球虫(3.30%)和奥博艾美耳球虫(2.40%)。

基于线粒体12S基因对青海地区细粒棘球蚴种群遗传多态性研究

本研究旨在分析青海地区细粒棘球蚴的种群基因多态性,为细粒棘球蚴病的防控提供基础资料。对采自青海地区的42株细粒棘球蚴(33株采自绵羊肝脏,9株采自绵羊肺脏)进行了线粒体12S基因的全序列测序并构建了NJ系统发生树。结果显示:在本研究样品的线粒体12S基因序列中共检测出5种单倍型(即H1～H5),其中以单倍型H5为主(占32株),并且系统发生树分析支持这一结果。单倍型多样性(H)和核苷酸多样性(Pi)分别为0.418、0.000 66,与E.granulosus G1(AF297617)的12S基因序列的核苷酸相似性达到99.86%以上。采自青海地区的42株细粒棘球蚴均鉴定为E.granulosus sensu stricto(基因型G1-G3),在检测出的5种单倍型中,单倍型H1～H4是本地区特有的单倍型。

基于线粒体12S基因对青藏高原细粒棘球蚴种群遗传结构的研究

目的分析青藏高原细粒棘球蚴的种群遗传结构,为细粒棘球蚴病的防控提供基础资料。方法对采自青藏高原来自不同地区(青海、西藏、四川)不同宿主(人、绵羊、牛)的58株细粒棘球蚴进行了线粒体12S基因的全序列测序,结合已报道的青海地区42个细粒棘球蚴绵羊株的12S全序列进行种群遗传结构分析。结果本次研究56个分离株鉴定为Echino-coccus.granulosus sensu stricto(基因型G1–G3);分析98个青藏高原地区分离株12S序列,包含15个核苷酸变异位点,共检测出13个单倍型(ES1～ES13),单倍型多样性(Hd)和核苷酸多样性(Pi)分别为0.381、0.00092。3个地域种群中,四川种群的核苷酸多样性最高(0.001353),种群内遗传距离最大(0.00135)。分子变异分析(AMOVA)显示,种群内的遗传变异大于种群间的遗传变异。构建单倍型NJ树和贝叶斯树显示,ES10和ES11形成一个有别于其他单倍型的单倍型类群。单倍型网络显示,单倍型ES1是优势单倍型,其它单倍型围绕它成辐射状,未发现有地理聚类。基因流(Nm值)和遗传分化指数(FST值)显示各地域种群间未形成显著的遗传分化。结论青藏高原细粒棘球绦虫的基因型为G1-G3型;青藏高原细粒棘球绦虫种群内及种群间都存遗传多样性,其中四川种群的遗传变异性最大;青藏高原细粒棘球绦虫种群内变异是种群变异的主要来源;种群未形成地理聚类,遗传分化不明显。

藏鸡和肉鸡种蛋皮质酮沉积与胚胎皮质酮代谢酶表达的差异分析

[目的]糖皮质激素(GC)对禽类的胚胎发育至关重要,其生物活性主要受细胞内的糖皮质激素代谢酶的调节。本研究比较了藏鸡和肉鸡种蛋内的皮质酮沉积水平以及胚胎卵黄膜、尿囊膜的皮质酮代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)和20-羟基类固醇脱氢酶(20-HSD)的表达水平差异。[方法]采用酶联免疫方法检测藏鸡和肉鸡种蛋蛋黄、蛋清内的皮质酮含量,用荧光定量PCR检测14胚龄藏鸡和肉鸡鸡胚卵黄膜、尿囊膜11β-HSD1、11β-HSD2、20-HSD基因的表达情况。[结果]藏鸡蛋蛋黄内皮质酮含量极显著低于肉鸡蛋黄内含量(P<0.01),而两者间蛋清内皮质酮含量没有显著差异(P>0.05)。14胚龄藏鸡卵黄膜11β-HSD2、20-HSD mRNA表达量显著或极显著低于肉鸡(P<0.05或P<0.01);藏鸡鸡胚尿囊膜11β-HSD1、11β-HSD2、20-HSD mRNA表达水平显著或极显著高于肉鸡(P<0.05或P<0.01)。除了藏鸡鸡胚20-HSD基因,同一品种的皮质酮代谢酶基因在卵黄膜上的表达量都高于尿囊膜内含量。[结论]藏鸡和肉鸡种蛋皮质酮沉积及卵黄膜、尿囊膜的皮质酮代谢酶的表达差异在一定程度上可解释品种间表现性状差异的原因。

畜禽用复方微量元素注射液中铜元素在猪体内的药物动力学研究

目的:明确畜禽用复方微量元素注射液中铜元素在猪体内的药物动力学参数.方法:猪单剂量肌注畜禽用复方微量元素注射液0.3mL/kg(铜210μg/kg),24h不同时间10次前腔静脉采血,火焰原子吸收法(AAS)测定猪血清中铜元素的浓度,采用3P97软件对数据进行分析.结果:铜在猪体内的药动学过程均符合开放型一室模型,最佳药时曲线方程为C=1.213 0e-0.145 5 t-1.213 0e-0.885 9 t.其主要药动学参数为:吸收半衰期(T1/2Ka)=0.744 1±0.213 4h,消除半衰期(T1/2Kel)=5.097 1±1.385 9h,达峰时间(Tm)=2.352 0±0.439h,达峰浓度(Cm)=0.706 9±0.068 8μg/mL,曲线下面积(AUC)=7.108 0±1.114 7μg.h/mL.结论:肌肉注射畜禽用复方微量元素注射液后,元素铜在猪体内吸收较快,消除也相对较快.

细粒棘球绦虫基因型与抗原研究进展

细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)是一种重要的人兽共患寄生虫。现已报道细粒棘球绦虫有10个基因型(G1～G10),我国仅发现G1和G6。细粒棘球绦虫六钩蚴阶段的Eg95,原头蚴阶段的EgFABP,成虫阶段的EgM9和Eg31分别被认为是最有前途的用于免疫保护的抗原。其中Eg95基因工程疫苗已经商业化生产,对羊免疫保护率达到了95%以上。

四川省牦牛标准化养殖调研报告

牦牛作为川西北地区牧民最主要的生产生活资料,具有不可替代的生态、社会、经济地位。然而,牦牛标准化养殖问题一直制约着牦牛产业的发展,为促进牦牛标准化养殖进程,本研究通过座谈、走访和问卷调查等形式对制约川西北牧区牦牛标准化养殖的主要问题进行了归纳。调研结果表明草畜矛盾、牧民养殖观念、养殖技术、加工技术、政策资金等都对牦牛的标准化养殖带来严重的影响,制约着牦牛产业的发展。同时,针对出现的问题提出了改进措施及建议,期望为政府政策制定者提供参考。

大黄酸对大鼠胎仔内脏发育毒性及致畸性试验

大黄酸临床应用于细菌感染性疾病、白血病、肝癌、便秘、浮肿等。本试验采用大鼠生殖Ⅱ阶段试验,即在SD大鼠怀孕第6~15d(致畸敏感期),每天通过灌胃给予剂量分别为87.5、175、350mg/kg三个剂量组的大黄酸制剂,同时设0.5%羧甲基纤维素钠(0.5%CMC)溶液作为阴性对照组。在怀孕第20天剖腹取胎。将一半胎鼠(226只)置于Bouin’s液中,固定两周作内脏检查,头部和腹部采用Wilson的Razo bladesection法,胸部采用西村的显微解剖法检查内脏畸形和变异情况。结果:对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组分别出现31例、79例、33例、7例内脏畸形。结论:与对照组相比,在内脏畸形发生率、各脏器畸形发生率、窝畸形发生率等方面的差异显著(P<0.05)。试验表明,大黄酸对大鼠胎仔的内脏发育有毒性和致畸性。

昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段多态性的快速检测

分析昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段多态性.用Chelex-100方法从昌台牦牛(n=100)全乳中提取基因组DNA,利用PCR对κ-酪蛋白基因第四外显子部分片段进行扩增,通过非变性PAGE及银染确定κ-酪蛋白基因重复片段多态性.结果显示昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段存在A和B两种等位基因,基因频率分别为0.094,0.906,B等位基因包含12 bp的重复片段.AB型个体17个,BB型个体73个.昌台牦牛κ-CN基因重复片段等位基因B为优势等位基因.

藏鸡胚胎HIF-2α和VEGF基因表达的组织特异性与相关性研究

研究旨在检测低氧诱导因子2α基因(Hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)和血管内皮生长因子基因(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在14胚龄藏鸡不同组织中的差异表达情况及两基因在不同组织中表达的相关性。低氧条件下孵化藏鸡种蛋至14胚龄时,取鸡胚肝脏、胸肌、腿肌、卵黄膜、尿囊膜、下丘脑6个组织;使用试剂盒从上述组织中提取总RNA,反转录后对各组织中HIF-2α基因、VEGF基因及内标β-actin基因进行实时荧光定量PCR检测;利用统计软件分析HIF-2α和VEGF基因在不同组织中的表达是否有差异及两基因相对表达量之间是否具有相关性。结果显示,HIF-2α基因在尿囊膜中表达最高,肝脏次之,其余四个组织中HIF-2α基因表达量较低且彼此间无显著差异。肝脏中出现VEGF基因特异性高表达,其余组织中VEGF基因表达量由高到低依次为腿肌、胸肌、尿囊膜、卵黄膜、下丘脑。尿囊膜组织中HIF-2α基因与VEGF基因表达量呈负相关,其他组织中两基因表达均不相关。研究发现尿囊膜和肝脏中HIF-2α基因高表达以及VEGF基因在肝脏中的高表达可能是藏鸡早期发育过程中应答低氧环境的重要机制之一。HIF-2α基因与VEGF基因在尿囊膜组织中表达呈负相关是藏鸡适应低氧环境的表现。

复方微量元素注射液对高原型藏羊淋巴细胞增殖的影响

为了探讨微量元素对高原型藏羊细胞免疫功能的影响,并筛选出增强藏羊细胞免疫的复方微量元素制剂的最佳剂量,笔者开展了本试验。将体重为13kg±1kg的高原型藏羊随机分成I组(对照组)、II组(低剂量组)、III组(中剂量组)、IV组(高剂量组),分别按0、0.1、0.2、0.4mL/kg肌肉注射复方微量元素制剂,并用MTT法测定注射后0、15、30、45、60d藏羊血清中的淋巴细胞增殖率。结果显示:与对照组相比,各试验组的淋巴细胞增殖率均显著或者极显著升高(P<0.05或P<0.01),说明复方微量元素制剂可显著提高高原型藏羊的细胞免疫功能,其中中剂量组(0.2mL/kg)的效果最好。