氨基酸定点突变提高灵芝蛋白LZ-8热稳定性的研究

通过氨基酸定点突变技术提高灵芝免疫调节蛋白LZ-8的热稳定性。通过分子动力学模拟结合温度因子预测对LZ-8氨基酸突变位点进行理性设计,在毕赤酵母X33菌株内构建并表达LZ-8突变体蛋白,采用HeLa细胞生长抑制实验和差示量热扫描分析检测并比较了LZ-8突变前后生物学活性及热力学参数。结果显示,LZ-8 N-端α螺旋为理论预测的温度敏感区域,在该区域进行F8W和R9K氨基酸双位点突变,突变后的LZ-8热稳定性提高,相变温度Tm上升0.92℃,相转变焓值ΔH提高23.14 kJ/mol,但突变后LZ-8生物学活性基本不变,LZ-8和LZ-8突变体对HeLa细胞生长抑制的IC50值分别是2.238μg/mL和2.407μg/mL。通过理性设计氨基酸突变位点,获得了稳定性提高但生物学活性不变的灵芝免疫调节蛋白LZ-8的突变体。

71m跨悬挑钢箱梁施工技术

介绍了南京奥体中心主体育场71m悬挑钢箱梁的拼装、焊接和吊装施工技术。

372m跨斜双拱施工技术

介绍南京奥体中心主体育场跨度372m、倾斜45°钢拱拼装、焊接和吊装施工技术。

厦门会展中心二期张弦结构预应力施工技术

厦门会展中心二期屋面结构体系采用张弦梁结构,其预应力施工具有一定的难度。对预应力施工方案及施工前期的一些准备工作,如施工仿真模拟计算、张拉工装的设计进行详细介绍。结合仿真计算结果和现场监测结果,提出了此类结构的预应力施工技术和特点。