热休克转录因子1对视网膜色素上皮细胞抗氧化和抗衰老的调控作用

目的探讨热休克转录因子1(HSF1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)抗氧化和抗衰老的作用。方法利用成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除人ARPE-19细胞系中HSF 1基因,构建并获得2种HSF1缺失ARPE细胞株(ARPE/Hsf1-/-),分别命名为H8、H9细胞株。取野生型、H8和H9细胞株,应用DHE探针染色结合流式分析技术测定细胞内活性氧簇(ROS)含量,应用流式细胞分析方法测定细胞周期;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定不同培养时间点细胞活力值;采用结晶紫染色实验测定细胞相对存活率;采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验检测衰老细胞比率;采用Western blot法检测各细胞株中热休克蛋白(HSP)70、HSP27、聚集素(CLU)、p53、p21和白细胞介素(IL)-1β蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR法测定各细胞株中p53、p21、IL-6、IL-8、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)mRNA表达水平。比较各细胞株在不同热休克处理条件下和HSP90抑制剂IPI504处理下热休克反应相关蛋白相对表达量,比较各细胞株不同浓度H_(2)O_(2)处理后相对存活率,比较各细胞株经或未经ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理后p21蛋白相对表达量。结果基因测序显示H8和H9细胞株成功携带突变基因,Western blot检测结果显示H8、H9细胞株不表达HSF1蛋白,HSF1在ARPE-19细胞中被成功敲除。与野生型细胞株相比,H8、H9细胞株中的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);各细胞株HSP90蛋白相对表达水平总体比较,差异无统计学意义(F=0.29,P>0.05)。在不同热休克刺激和IPI504诱导下野生型细胞株中HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著低于相应处理的野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株相比,H8和H9细胞株培养24、48、72和96 h的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与野生型细胞株比较,H8和H9细胞株G1期细胞百分比显著升高,细胞周期抑制因子p53、p21的mRNA和蛋白相对表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),SA-β-gal染色阳性细胞比率显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.001);衰老相关炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、MCP1 mRNA相对表达量显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.001)。H8和H9细胞株ROS含量明显高于野生型细胞株,差异均有统计学意义(均P<0.001);H8和H9细胞株经NAC处理后p21蛋白相对表达量较未经NAC处理明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。H8和H9细胞株200、400、600、800μmol/L H 2O 2处理条件下细胞相对存活率明显低于野生型细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论敲除HSF1可下调HSP的表达,激活ROS/P53/P21通路,诱导RPE细胞衰老,并增加RPE对氧化应激刺激的敏感性。HSF1在RPE细胞中可能具有抗衰老和抗氧化调控作用。

中医特色慢性鼻窦炎慢病管理模式探析

近年来我国慢性鼻窦炎发病率呈逐年上升趋势,由于其病程长、反复发作、迁延难愈,给患者的日常生活和工作带来了严重影响,属重大社会公共卫生问题,对该病进行有效的慢病管理十分必要。中医药辨证论治慢性鼻窦炎具有一定优势,依托中医整体观、辨证论治、三因制宜、治未病思想等进行慢病管理,有助于实现疾病的精准治疗,依托体质辨识、中医康复疗法、中医外治法等,使预防和治疗疾病的方式多样化。构建合理的慢性鼻窦炎的慢病管理体系,对于提高慢性鼻窦炎患者的生活质量至关重要。目前我国有关慢性鼻窦炎的慢病管理工作相对缺乏,因此探索具有中医特色的慢性鼻窦炎慢病管理模式,具有重要意义。

抽水蓄能电站导水机构取消预装的实践与探索

抽水蓄能电站导水机构安装精度要求高,一般分为预装和正式安装,工期较长,本文通过总结江苏句容抽水蓄能电站1号机组导水机构安装经验,提出取消导水机构预装,采取直接安装的方法,在保证安装质量的同时,可以有效节约工期,节省人力物力财力资源投入,供类似工程管理参考。

腹泻仔猪病原性大肠埃希菌毒力因子分布与耐药性分析

为了探索仔猪大肠埃希菌性腹泻的发病机制、大肠埃希菌毒力因子变迁以及与耐药性可能存在的关系,在直肠棉拭采集浙江省规模猪场腹泻仔猪病料,经细菌分离纯化、形态学结合PCR鉴定以及小鼠致病性试验得到124株病原性大肠埃希菌基础上,应用PCR分析其毒力因子,采用K-B法及耐药性专用软件Whonet测定并分析其对抗菌药物的耐药性,最后,通过Logistic分析分离株毒力因子与耐药性的相关性。结果表明:菌毛阳性分离株(F4+和F41+)占总菌株数的7.26%(9/124),首次检测到毒力因子EAST1、PAA和AIDA-I,其中EAST1检出率高达19.68%(24/124),而PAA和AIDA-I阳性率较低,分别为4.84%(6/124)和2.42%(3/124);分离株对苯唑西林(100%)、复方新诺明(97.6%)、利福平(97.6%)、多西环素(96%)、羧苄西林(93.5%)、氨苄西林(93.5%)、阿莫西林(93.5%)耐药严重;链霉素与氨苄西林(75.45%)、恩诺沙星(65.45%)、复方新诺明(78.18%)、庆大霉素(63.64%)、多西环素(96%)、氟苯尼考(50.91%)间交叉耐药明显。分离菌株100%呈多重耐药,其中以14～16耐药最多(43.31%);阿莫西林/克拉维酸(P=0.046)和多西环素的耐药性(P=0.020)与大肠埃希菌黏附与脱落病变eae(E.coli attaching and effacing)基因显著相关,多黏菌素B(P=0.004)和氯霉素的耐药性(P=0.013)与EAST1显著相关。结合以往资料,我们认为大肠埃希菌毒力因子已发生明显改变,耐药性更趋严重,且二者之间存在相关性,需深入研究以更好制订大肠埃希菌病有效防控措施。

变应性鼻炎的鼻痒发病机制初探

鼻痒作为变应性鼻炎(AR)的主要症状之一严重困扰患者的生活,但目前仍没有完全根治鼻痒的治疗方法,因此,明确AR鼻痒发病机制尤为重要。近年来,AR的神经免疫机制引起许多学者的关注,其中瞬时感受器电位香草酸受体1型(TRPV1)是神经免疫机制的核心要素,在AR鼻痒的发病机制中发挥着重要的桥梁作用。该文综合近年来瘙痒生理病理学机制的研究进展,同时聚焦AR鼻痒的神经传导通路,并从与AR鼻痒有关的免疫细胞(肥大细胞和嗜碱性粒细胞)、介质及信号受体、痒感传入神经(三叉神经),以及基于TRPV1离子通道剖析AR鼻痒的神经-免疫联动调控网络机制等进行综述,期望为AR鼻痒的临床治疗提供系统的理论依据。

房地产企业供应链金融发展研究

2016年至今,我国楼市进入明显的分化阶段,三、四线城市仍面临严峻的去库存压力,一、二线城市房价过高的问题依旧显著。为控制房价过快上涨,我国出台了一系列调控政策,加之中美贸易战以来带给中国经济的冲击,房地产开发企业面临巨大的资金压力,在当前政策约束和经济下行压力的大背景下,龙头房地产企业纷纷试水供应链金融模式。文章主要分析了房地产企业供应链金融融资、运作模式以及风险关注,以期为房地产企业供应链金融的发展提供一定的理论借鉴。

心钠素水平在婴幼儿肺炎时的变化

用放射免疫分析方法测定50例婴幼儿肺炎极期,22例肺炎恢复期,20例肺炎合并心力衰竭患儿血浆心钠素(ANP)浓度,发现肺炎极期时血浆ANP浓度明显高于肺炎恢复期,肺炎合并心力衰竭时其值更高,故血浆ANP浓度可作为临床判断和诊断肺炎心衰和肺炎疗效观察的指标。

油气尾矿开采税费优惠探讨

在国际国内原油供给日趋紧张的情况下；资源劣化的油气尾矿的生产就提到了议事日程而减轻油气尾矿开采企业的税收负担，调动企业的积极性也显得非常重要建议国家在增值税、所得税、资源税和隐形费用等方面给油气尾矿开采企业予政策支持。

浅谈幼儿园户外自主游戏的问题与组织策略

本文围绕幼儿园户外自主游戏的问题与组织策略展开讨论。首先,指出了当前户外自主游戏存在的问题,包括区域规划不合理、游戏材料单一、活动时间不充足和游戏过程主导权过于集中。接着,探讨了如何采取有效的组织策略来解决这些问题,包括合理利用资源创设游戏基本区域、收集开放性低结构游戏材料、保证充裕的游戏时间、促进幼儿的自主选择权、建立公共规则以及给予适当的支持与回应。通过这些策略的实施,可以促进幼儿的全面发展和积极参与,提升幼儿园户外自主游戏的质量和效果。

郑州市不同类型医养结合养老机构老年人孤独感分析

目的:探讨不同类型医养结合养老机构老年人孤独感现状及其影响因素。方法:对入住郑州市不同类型医养结合养老机构老年人的孤独感及其相关影响因素进行问卷调查和分析。结果:412名调查对象的孤独感评分为(41.90±7.22),属于一般偏上孤独感。多重线性回归分析结果显示,学历(β=-0.975,P<0.05)、有无医保(β=-1.183,P<0.05)以及ADL评分(β=-0.088,P<0.05)是老年人孤独感的独立影响因素。结论:各养老机构应提供有利于老年人身心健康的服务,从而降低其孤独感,提升其生存质量。

以固相溶血试验检测新城疫血清抗体的研究

通过血清学抗体的检测不仅可以了解鸡群的免疫状态,考察现行的免疫程序,监测疫苗接种的效果,以确定最佳的免疫方法和程序,使鸡群始终保持良好的抗病状态,从而达到有效防制该病的目的。

汉中发展绿色水利旅游的"三招"

山清水秀、鸟语花香的汉中市共有大中小型水库330座,具有得天独厚的自然景观和人文景观.近年来,按照市委、市政府发展绿色产业、建设绿色汉中的战略部署,水利工程管理部门紧紧依托自身优势,大力发展绿色水利旅游业,已将自身的资源优势变成效益优势.目前石门、南湖、红寺湖、南沙河等水利旅游景区建设已初具规模,成为汉中绿色建设中一道靓丽的风景线.

从“感觉神经肽P物质-肥大细胞”联动变化探究穴位埋线治疗变应性鼻炎的机制

目的探讨揭示神经肽P物质(SP)与肥大细胞(MC)的联动变化关系,阐释穴位埋线调节变应性鼻炎(AR)神经源性炎症的机制。方法选取小鼠肥大细胞P815(MCp815)行体外培养,采用SP进行浓度升阶梯干预,初始质量浓度选取0.1 nmol/L,以3为基准倍数,逐渐升高干预质量浓度即0.3、0.9、1968.3 nmol/L。每种干预质量浓度同时设置3个培养基,采用CCK-8法检测MCp815增殖倍数,计算3个培养基的增殖倍数均值。结果SP干预质量浓度与MCp815增殖倍数呈正相关,即SP质量浓度越高,MCp815增殖倍数均值越大,且在低倍质量浓度(0.1、0.3、0.9 nmol/L)时增殖速度最快,进入2.7 nmol/L质量浓度后曲线上升率变缓;高倍质量浓度虽也呈现上升态势,但从218.7 nmol/L开始,曲线逐渐进入平台期,656.1 nmol/L达到增殖巅峰,即使质量浓度再次增加,增殖倍数也不会随之变大。结论SP可以促进MCp815增殖,二者为正相关关系,但在SP质量浓度达到656.1 nmol/L时,达到平台期。研究进一步表明穴位埋线可通过抑制SP进一步下调MC的增殖,从而减轻鼻腔黏膜炎性反应,最终实现治疗作用。

基于物联网的小型智能移动灌溉系统研究

国内外常用的大棚灌溉系统多为铺设管道灌溉,成本高,灵活差,不适合小型的农作物种植规模。结合农机现代化的发展趋势,文章主要针对小型大棚灌溉方式设计了一种智能移动灌溉系统。该系统基于成熟的物联网技术,并利用物联网云平台和价格低廉但功能齐全、稳定性高的网关控制技术以及无人驾驶小车技术,提高了小型农作物浇灌的灵活性和便利性。

“互联网+中医体质辨识”变应性鼻炎中医特色慢病管理模式初探

互联网技术的发展为健康管理、预防带来诸多便利,中医体质辨识作为中医体系中一个重要部分已被广泛应用于慢病管理,但在变应性鼻炎管理中的应用相对缺乏。变应性鼻炎发病率在我国呈逐年上升的趋势,因其病程长、反复发作、迁延难愈,给患者的日常生活及工作带来了严重影响,是急需解决的社会公共卫生问题。建立“互联网+中医体质辨识”的中医特色慢病管理模式,通过现代科技与中医诊疗相结合,在中医基础理论的指导下为患者提供全方位、多角度的健康管理服务对于改善患者生活质量、减少复发具有重要作用,同时可促进变应性鼻炎临床科研工作及科研成果转化,或将成为未来变应性鼻炎诊疗新模式。

一种新型混合型有源电力滤波器的研究

提出了一种单相并联混合型有源电力滤波器电路结构。该电路由有源滤波器与基波串联谐振支路并联再与无源滤波电路串联构成,用于抑制非线性整流负载产生的谐波电流流入电源侧。在该电路中,无源滤波器分担大部分抑制谐波和无功补偿的任务,减少了有源滤波器的容量;有源电力滤波器用于改善无源滤波器的滤波效果和抑制它与系统阻抗可能发生的谐振。理论分析和实验结果表明,该混合型有源滤波器充分发挥了无源滤波器和有源滤波器各自的优点,改善了无源滤波器的滤波性能,同时使有源滤波器不再承受基波电压,因此最大限度地减少了有源滤波器的容量,从而使有源电力滤波器能够应用于大功率场合。

影响啤酒风味的几种主要物质及控制方法

影响啤酒风味的几种主要物质及控制方法蒋明君姜虹孙劲楠（齐齐哈尔明月企业集团有限公司）啤酒是一种营养丰富的清凉饮料，其风味由于所采用的原料、酿造方法、设备情况等方面的不同，口味有不同的风格。影响风味的因素很多，主要决定于风味物质及工艺控制的风味物质多少...

全面提升网点功能亟待解决的问题

近年来,农业银行围绕"面向三农,城乡联动"的市场定位,全面实施营业网点视觉形象工程建设,开展6S管理导入,执行统一的网点服务规范标准,全面提升网点服务软实力,营业网点功能比股份制改造前得到了明显提升,主要表现为:网点已由过去传统存贷款向零售、公司、中间业务并重发展;"连锁店"服务方式将零售业务向主动负债、产品销售、个人信贷方向转型;客户结构由单纯以大客户为主向高价值的大中小客户转变;收入结构由过去的利差收入为主转向利差收入和非利差收入并重。但由于农行营业网点同业竞争优势不明显,产品定位不准确,营销缺乏手段,业务流程冗余,管理链条长、经营机制滞后等情况仍然存在,制约着网点转型的效果,全面提升农行营业网点功能仍有很长的路要走。

一种新型混合型有源电力滤波器的研究

提出了一种单相并联混合型有源电力滤波器的电路结构。该电路由有源滤波器与基波串联谐振支路并联再与无源滤波电路串联构成,用于抑制非线性整流负载产生的谐波电流流入电源侧。在该电路中,无源滤波器分担大部分抑制谐波和无功补偿的任务,减少了有源滤波器的容量;有源电力滤波器用于改善无源滤波器的滤波效果,抑制它与系统阻抗可能发生的谐振。实验结果表明,该混合型有源滤波器充分发挥了无源滤波器和有源滤波器各自优点,改善了无源滤波器的滤波性能,同时使有源滤波器不再承受基波电压,最大限度地减少了有源滤波器的容量,从而使有源电力滤波器可应用于大功率场合。

在与变应性鼻炎比较中探索局部变应性鼻炎模型的建立

局部变应性鼻炎(local allergic rhinitis, LAR)是有别于变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)的鼻黏膜局部变态反应性疾病。虽然LAR流行率总体呈高发趋势,但目前对其研究和认识尚处于起步阶段。LAR动物模型是深化LAR发病机制、病理生理学及免疫学研究的必要手段。由于LAR与AR的发病机制既相似又各具特点,且AR动物建模方法相对较为成熟,故本文在与AR动物建模的联系与比较中,就LAR建模动物的选择、致敏原选择、建模流程、动物模型评价研究进展作一综述。