毛壳素靶向Hsp90抑制食管鳞癌细胞Eca109生长的机制研究

目的:探讨毛壳素对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及潜在作用机制。方法:采用不同浓度毛壳素处理Eca109细胞,CCK-8法、3D肿瘤成球实验、克隆形成实验检测毛壳素对食管鳞癌细胞增殖活力的影响,流式细胞仪检测毛壳素对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响,划痕愈合实验和Transwell实验检测毛壳素对迁移、侵袭的影响。分子对接、细胞热位移实验验证毛壳素与Hsp90的相互作用。蛋白免疫印迹法检测周期、凋亡、迁移侵袭及分子机制相关蛋白的表达变化。结果:毛壳素能显著抑制Eca109细胞的增殖活性,抑制成球能力和集落形成能力(P<0.01)。流式细胞仪检查结果显示,与对照组相比,毛壳素处理组G 2/M期的比例明显增加(P<0.001),凋亡率显著增加(P<0.01)。划痕愈合实验和Transwell实验结果表明,毛壳素处理组Eca109细胞的迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.01)。分子对接和细胞热位移实验显示毛壳素与Hsp90具有较强的结合能力。Western blot结果显示,毛壳素处理细胞后,周期相关分子CDK1表达下调,p-Histone H3上调,凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-3上调,迁移侵袭相关蛋白E-Cadherin上调,N-Cadherin和Snail下调,Hsp90客户蛋白p-EGFR、p-STAT3、p-AKT、p-ERK1/2表达下降。结论:毛壳素可能通过靶向Hsp90抑制其客户蛋白活性,从而抑制食管鳞癌细胞增殖。

毛萼乙素通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌细胞增殖的机制探讨

目的:探讨毛萼乙素(Eriocalyxin B,EriB)通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的机制。方法:CCK-8、软琼脂克隆形成实验检测EriB对结直肠癌细胞增殖活力的影响,流式细胞术检测EriB对结直肠癌细胞周期和凋亡的影响,无血清悬浮培养实验检测EriB对结直肠癌细胞干性的影响,Western blot检测周期、凋亡以及分子机制相关蛋白的表达变化,裸鼠皮下瘤实验体内检测EriB对结肠癌细胞生长增殖的影响,免疫组织化学染色检测小鼠皮下瘤组织Ki67的表达,SynergyFinder用于分析EriB对5-FU抗结直肠癌的协同作用。结果:与对照组相比,EriB处理显著抑制了结直肠癌细胞的存活(P<0.05或P<0.001),抑制干细胞球体数量(P<0.001)。流式细胞术检测结果表明,与对照组相比,EriB处理组S期和G2期细胞百分比增加(P<0.001),细胞凋亡增加(P<0.001)。Western blot结果显示,EriB处理细胞后,干性相关分子CD44、Sox2、Klf4表达下调,细胞周期相关蛋白CyclinA、Cdk2表达下调,凋亡相关蛋白ClPARP、Cl-caspase-3表达上调,Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、TCF4、CyclinD 1、c-myc表达下调。EriB与5-FU联合应用,经SynergyF inder分析,ZIP synergy得分大于+10,有协同作用。裸鼠异种移植瘤模型结果表明,与对照组相比,EriB处理显著抑制肿瘤生长,并减小裸鼠皮下异种移植瘤的体积(P<0.05)。免疫组织化学分析显示,EriB处理组显著降低了肿瘤组织中Ki67的表达。结论:EriB可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制结直肠癌细胞增殖。

麦冬多糖的提取分离及含量测定方法的研究进展

麦冬多糖具免疫活性、降血糖、抗心肌缺血、抗过敏、耐缺氧以及抗肿瘤和抗衰老等药理作用,对现代医学研究与应用有重大意义。现结合近年文献,对麦冬多糖的提取分离和含量测定进行了综述。