瑶药白九牛生药学研究

目的:对不同产地的白九牛药材进行系统的生药学鉴别研究。方法:采用原植物基原鉴定、性状鉴别、显微鉴别、TLC鉴别、常规检查等方法进行研究。结果:鉴定了白九牛药材的基原,描述了药材性状、茎横切面和粉末显微特征,建立薄层色谱鉴别方法,水分测定值为6.7%~10.4%,总灰分为2.8%~5.4%,浸出物为8.9~14.9。结论:研究结果可为白九牛的鉴定和质量标准的制定提供科学依据。

基于DNA条形码的金槐系统发育和变异位点分析

目的:对来自不同居群的金槐资源的核糖体内转录间隔区2(ITS2)和叶绿体基因片段psbA-trnH、rbcL、matK进行系统发育分析,探索不同地理来源的金槐资源的遗传多样性。方法:用聚合酶链式反应(PCR)扩增获得金槐ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK的核酸序列,用邻接法(NJ)构建系统发育树,用Kimura 2-Parameter(K2P)模型分析遗传距离,用MEGA和BIOEDIT软件进行多重比对分析。结果:ITS2序列为278~279 bp;psbA-trnH为289 bp;rbcL为673 bp;matK为786~792 bp。ITS2和psbA-trnH都存在3个变异位点,rbcL没有变异位点,matK有13个变异位点。采用ITS2序列构建的系统发育树将金槐样品资源分为2个大类群,百宝实生树聚为一类,其余25份资源聚为一类。对于psbA-trnH序列,28份金槐资源的PCR扩增成功率为100%。psbA-trnH序列聚类结果显示,28份金槐资源可分为3个大的类群。庙头嫁接/实生树、枧塘嫁接树、文桥嫁接树、咸水实生树和大圩嫁接树组成一个类群;绍水实生树单独组成一个类群;其余21份资源组成一个类群。基于matK序列建立的发育树可将26份金槐资源分为2个类群,其中咸水实生树单独为一个分支,其余25份金槐资源聚为一支。对金槐的rbcL序列的聚类结果无法将28份资源区分开。基于ITS2+psbA-trnH+rbcL+matK组合序列构建的系统发育树可将金槐资源分为4个大类群,祁阳实生/嫁接树、道县实生树,庙头嫁接/实生树、永岁嫁接树、绍水实生树、石塘实生树、咸水实生树、枧塘实生树、文桥嫁接树、秧塘嫁接树、湘漓实生树聚为一支;文桥实生树聚为一支;大圩实生树聚为一支;其他金槐资源聚为一支。结论:系统发育和变异位点分析为金槐资源的进化研究、道地性评价奠定了理论基础,变异位点的分析可用于相关资源的鉴定。结果也表明将不同基因片段组合对植物进行鉴定,效果更佳。