二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞癌发生过程中基质金属蛋白酶动态变化

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)在肝细胞癌形成过程中动态变化及作用方法采用二乙基亚硝胺(DENA)诱癌建立大鼠肝癌模型.应用明胶酶谱法测定诱癌过程中癌变发生的三个阶段6个时相肝组织中MMP-2和MMP-9的表达及活性.结果肝癌发生过程中基质金属蛋白酶呈持续升高的趋势,至早期癌变期及肿瘤演进期(16wk～24wk)MMP-2,MMP-9的表达呈一个较高的平台(分别为167350±20436和237754±32675),且发现MMP-2的活性形式表达显著增加.结论 MMPs的表达不同与肝星状细胞的激活和肝细胞癌形成有关,而与肿瘤的结节数及大小无关.

Batimastat对大鼠原发性肝癌生长侵袭转移的影响

目的了解基质金属蛋白酶抑制剂对肝癌生长和侵袭转移的影响及其机制。方法通过腹腔注射BB-94对二乙基亚硝胺建立的大鼠原发性肝癌模型进行治疗,观察BB-94对肝癌的生长和侵袭转移的抑制作用,并应用明胶酶谱法研究BB-94治疗后基质MMP-2和MMP-9的表达情况及对其活性形式的影响;探讨BB-94影响肝癌生长和侵袭转移的机制。结果 BB-94对肿瘤生长、侵袭转移均有明显的抑制作用,治疗组与对照组肝脏肿瘤质量为(3.6±0.4)g vs(4.1±0.4)g(P<0.001);并能延长其生存期;对酶原形式的MMP-2和MMP-9无影响,而使MMP-2活性形式的表达量显著降低,治疗组和对照组分别为28.5±19.8 vs 42.8±20.1(P<0.05)。结论BB-94可通过降低活性形式MMP-2的表达来抑制肝细胞癌的生长和侵袭转移。

基质金属蛋白酶的生物学特性及其在肝癌浸润转移中的作用

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族是一簇 Zn^(2+)依赖性蛋白酶,其主要功能是降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分,在生理及病理过程中发挥着重要作用,如胚胎发育、创伤修复、血管再生、结缔组织病、牙周病及肿瘤的浸润和转移过程等.近年来 MMPs 在各种恶性肿瘤的转移和浸润中的作用成为研究热点.我们就其生物学特性及在肝癌浸润转移中的作用作一综述.1

大鼠肝细胞癌发生过程中MMP-2表达的动态变化与意义

目的研究肝癌形成过程中MMP-2表达的动态变化,探索MMP-2在肝癌形成过程中的生物学作用。方法采用二乙基亚硝胺建立70只诱发大鼠肝癌模型,应用RT-PCR及明胶酶谱法测定诱癌过程中癌变发生的3个阶段6个时相肝组织中MMP-2激活以及其mRNA的表达。结果 酶原形式的MMP-2和其mRNA在诱癌过程中均呈上升趋势,至早期癌变期及肿瘤演进期(16—24周)MMP-2的表达呈一个较高的平台,积分灰度值达到167350+20436,且出现MMP-2的活性形式表达。结论 肿瘤形成过程中MMP-2的表达升高与肿瘤的形成有关,而与肿瘤的结节的大小、数目无关,MMP-2可望成为诊断肝癌的新的指标。

供体特异性体内免疫状态的定量检测

背景:由于免疫反应的复杂性,目前的免疫学检测方法均有其局限性,虽然各种检测技术精确程度不断提高,但是单一指标不足以判断机体复杂的免疫状态。建立一种在多指标基础上的联合评估模式来监测移植后受体免疫状态是当前需要解决的难题。目的:建立具有供体抗原特异性的体内免疫状态定量检测方法,探索该方法的流式检测技术参数、荧光染色条件、输注细胞数及确定最佳测试时间点。方法:取C57及BALB/c小鼠脾脏制备脾细胞单细胞悬液,分别用不同浓度活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色后制备1∶1混合细胞悬液,按混合细胞输注C57→BALB/c小鼠皮肤移植排斥模型,分别于输注后1,2,4,10h,1,2,3,6d应用流式细胞仪检测外周血两种荧光细胞的比例变化,同时设未移植BALB/c小鼠为对照,探索CFSE荧光染色条件、输注细胞数及确定最佳测试时间点,按公式计算供体特异性细胞杀伤率。结果与结论:供体特异性体内免疫状态定量检测方法流式检测设定在淋巴细胞门,两种细胞CFSE的染色浓度差控制在20倍左右,输注细胞总数在一定范围内对结果没有影响,输注细胞后2～4h为最佳检测时间点。提示体内细胞毒性试验是一种简单、准确、稳定的免疫状态体内定量监测方法,可以全面反映小鼠皮肤移植后受体的免疫状态。

人骨髓来源多能成体祖细胞与人肝细胞体外直接共培养向肝样细胞分化的实验研究

目的探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性。方法直接共培养:将CFSE荧光(绿色)标记的ZHJ-MAPCs与L02(密度均为1×104/ml)按照各50%比例混合行直接共培养。5 d后用SABC-Cy3免疫荧光(红色)双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察ZHJ-MAPCs表达ALB,AFP,CK-18的情况。并设阳性对照(单独培养的L02细胞)和阴性对照(单独培养未经诱导的ZHJ-MAPCs)。结果在共培养第5天检测ALB和CK18时出现较多胞浆内呈黄色荧光的阳性细胞即向肝细胞分化的ZHJ-MAPCs,而在检测AFP时阳性细胞较少。结论ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02行直接共培养能够诱导其向成熟肝样细胞定向分化。

荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞体内示踪方法

背景:利用荧光染料标记活细胞体内示踪的方法较多,但是应用荧光染料浓度差异实现不同细胞体内示踪的方法目前仍不成熟。目的:观察不同浓度荧光活性染料CFSE标记的小鼠脾细胞体内示踪情况,建立稳定的单染料差异浓度标记活细胞的体内示踪方法。方法:取C57BL/6J及BALB/c小鼠脾脏制备脾细胞单细胞悬液,分别用不同浓度CFSE染色后制备1∶1混合细胞悬液;锥虫蓝染色鉴定细胞活性;将染色的混合细胞输注BALB/c小鼠后不同时间点,流式细胞仪检测小鼠外周血两种荧光细胞的比例。结果与结论:CFSE标记的小鼠脾细胞活力良好,荧光显微镜下见全部细胞标记后均发绿色荧光,形态正常,CFSE标记阳性率为95%。CFSE染色时,在浓度相差20倍时流式直方图才显示为两个完全独立的峰,即CFSE低浓度用0.3μmol/L高浓度用6μmol/L。异基因的C57BL/6J脾细胞在输注1d后就快速消失,而同基因BALB/c脾细胞能够在BALB/c小鼠外周血中长期存在,但是两种细胞荧光强度均未见降低,说明荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞进行体内示踪是一种稳定的示踪方法。

行政事业单位固定资产管理改革的思考

本文认为,行政事业单位以收付实现制为基础的固定资产管理体制已无法客观、完整、充分地反映和披露单位的固定资产会计信息,固定资产也不能得到很好的管理与监控。改革目前我国预算管理体制,改变行政事业单位固定资产管理与监控的方法,提高行政事业单位固定资产的使用效率与效益势在必行。行政事业单位固定资产管理改革主要是创新财务管理制度,建立以权责发生制为基础的会计核算制度和固定资产使用的折旧报废制度,以推动行政事业单位固定资产管理的规范化和科学化。

公允价值的职业判断

会计职业判断是指会计人员在会计实务中面临不确定会计事项时，根据国家现行会计法律、法规，运用自身掌握的专业知识和积累的职业经验，对不确定会计事项进行分析、判断、选择和决策，它贯穿于会计确认、计量、报告和披露的全过程。新企业会计准则最大的特点是引入了公允价值计量模式。由于我国经济发展的市场化程度不高，很多资产还没有形成活跃的交易市场，

对投资性房地产后续计量在上市公司执行情况的思考

我国财政部于2006年2月15日首次发布了《企业会计准则第3号——投资性房地产》,该项准则于2007年正式实施。本文采用实证统计的方法对投资性房地产后续计量的执行情况进行分析,针对其中存在的问题提出了自己的看法。

人骨髓间充质干细胞亚群ZHJ-MAPCs特征表型及细胞遗传学分析

目的:对经过CD45,血型糖蛋白-A免疫微磁珠体外负分选纯化并传代培养的ZHJ-MAPCs进行体外部分细胞学鉴定,了解其特异性标志物表达及增殖、传代过程中的遗传学稳定性。方法:实验于2004-01/12在珠江医院中心试验室完成。①原代冻存的ZHJ-MAPCs经复苏培养、传代。②利用流式细胞仪对其进行CD29,CD44,CD34和HLA-DR流式细胞分析,以对照管作为空白定标,计算10000个细胞,记录标本的阳性细胞百分率。③分别在传代至第6代和第13代时进行细胞核型分析了解细胞核型变化。④细胞计数及细胞活力检测方法:细胞数/mL=四个大方格总数/4×104×稀释倍数。细胞存活率=5g/L锥虫蓝染色阴性细胞/100个细胞/高倍镜×100。结果:①流式细胞仪检测结果:流式细胞仪检测ZHJ-MAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%。②细胞核型分析结果:ZHJ-MAPCs在增殖传代过程中表现出非正常二倍体特征,染色体干系数目在第6,13代均为55～58条,占80%,染色体数介于超二倍体和亚三倍体之间,镜下见细胞均发生染色体变异,且变异形态多样。结论:①ZHJ-MAPCs具有骨髓间充质干细胞的特征及较高的纯度。②ZHJ-MAPCs在增殖传代过程中表现出非正常二倍体特征,染色体数介于超二倍体和亚三倍体之间,染色体变异形态多样。

新形势下税制改革对优化产业结构的作用研究

我国这些年注重的是GDP的增长,而经济持续高速增长在很大程度上则依托了自然资源和劳动力的低回报,与发达国家相比,中国仍然是资源、能源密集型的经济增长方式状态,高消耗、高污染,低附加值的产业比重偏高,第二、第三产业中技术和知识密集的高附加值的产业比重偏低。加快培育和发展战略性新兴产业,转变经济发展方式,对我国税收制度的改革提出了新的要求。改革和完善现行分税制,合理地设计税制结构,降低流转环节的税赋,强化所得税的调节分配功能,科学地确定税费体系,改革行政支出结构,对于经济结构调整和转变经济发展方式具有重要作用。

试论现代远程开放教育初级阶段教学组织管理模式

现代远程开放教育是我国近几年来的一种新型办学模式,在其教学组织与管理中仍然按照传统的年级教学组织管理模式已不能适应学习者和教学管理者的需求。在远程开放教育的初级阶段,研究与实践专业教学组织管理模式是必然的选择;远程开放教育发展的高级阶段,是课程教学组织管理模式。

“多种媒体学习资料应用的研究与实践”课题研究报告

多种媒体学习资料应用的研究与实践课题,属于远程开放教育学习支持服务系统研究中的子课题,主要研究了远程开放教育学习支持服务系统中现有多种媒体教学资源组合应用的现状和存在的问题,为改进和强化多种媒体教学资源的建设寻找依据。在本课题研究中,主要运用文献研究法、调查研究法、实验研究法和问卷调查统计手段,对北京地区1999年以来参加远程开放教育的专科、本科学生和教师使用多种媒体教学资源学习和教学的情况进行调查、实验和研究。研究结果表明,在教师、学生、学习资源、传播媒体四要素中,学习资源与传播媒体天然地结合在一起,在远程开放教育中发挥着关键性作用;在今后一个时期,完善、规范和健全多种媒体教学资源的建设与运用,是现代远程开放教育的首要任务。

公允价值计量在税法中的应用

本文对公允价值的概念进行了界定,认为税收计量中已经应用了公允价值,并给出了相关证据,然后结合现行会计准则,从税法与会计规定协调的角度对公允价值在税收计量中的应用前景进行了展望。

完善税收制度 促进产业结构优化

内容税收制度应从总体安排上传导反映出公共利益与个人利益的一致性。因此在制定财政政策目标时,不能仅仅局限于确保年度或任期经济增长目标的实现,而应将重心放在国民经济可持续发展方面,应该从四个方面完善税收制度,促进产业结构优化。

一种恶性梗阻性黄疸介入治疗的新方法—经皮肝穿刺胆道内射频消融内支架置入术

目的探讨介入治疗恶性梗阻性黄疸的新方法:经皮肝穿刺胆道射频消融内支架置入术的临床经验。方法经临床筛选2例晚期恶性梗阻性黄疸患者,其中肝门部胆管癌1例,胰头癌1例。采用经皮肝穿刺胆道内肿瘤射频消融,然后置入相匹配的金属内支架。结果 2例患者均完成手术,血清总胆红素明显下降,其中一例CA-199降至正常,临床症状显著改善。结论经皮肝穿刺胆道内射频消融内支架置入术率先在国内开展,是一种安全可行的新的手术方式。相对于传统的介入治疗方式,射频消融能减少操作时肿瘤的出血,进一步阻止肿瘤的局部增长,从而延长内支架的通畅期和患者的存活期,改善患者生存质量。

远程开放教育办学组织结构模式的选择——以省(市)级电大开放教育学院为例

随着远程开放教育教学改革的逐渐深入,开放教育的发展及其功能、规模的不断拓展,对远程开放教育办学组织结构模式的选择,成为全国电大非常关心、但又难以厘清的基本问题。本文正是在这样一种历史背景下,通过对省(市)电大直属学院组织结构模式的分析,进而对远程开放教育办学组织结构模式的选择问题作以透视。

3D腹腔镜单孔胆囊切除手术:附2例报告

目的探讨借助"3D"腹腔镜系统完成单孔腹腔镜胆囊切除手术的可行性及临床经验。方法经临床筛选2例胆囊良性疾病患者,均有反复发作右上腹痛的病史,上腹部B超检查提示胆囊结石。手术均在"3D"腹腔镜系统辅助下经脐部单一操作孔进行操作。结果 2例患者均成功完成手术,手术时间分别为35 min及50 min,平均40 min。患者术后8 h可下床活动,术后第1天恢复正常饮食,第2天均出院,临床症状均消失。结论"3D"腹腔镜系统能够在单孔腹腔镜手术操作时很好地显露术区组织层次结构,特别是一些关键组织结构如"胆囊三角",提高了手术的安全性,有利于单孔腹腔镜胆囊切除术的进一步推广。

品管圈降低肝胆外科非计划再手术发生率的应用研究

目的降低肝胆外二科非计划再次手术发生率。方法综合运用品管圈的管理方法,分析影响非计划再次手术的主要原因,制定针对性措施实施过程改进。结果实施改进措施后,非计划再次手术发生率由1.12%降低至0.21%,达到目标值<0.5%(P=0.045),月平均住院日由14.32天缩短至10.52天(P<0.001)。结论品管圈管理方法的应用显著降低非计划再次手术发生率,缩短患者平均住院日,有利于提升手术质量,减少不良事件发生,保障患者生命安全。