胸苷激酶基因治疗胃癌的体外实验

将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）导入恶性肿瘤细胞，随后可应用药物丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ， ＧＣＶ）选择性杀死肿瘤细胞．构建了含胸苷激酶与潮霉素磷酸转移酶（ｈｐｈ）融和基因（ＨｙｔＫ）的真核表达载体ＬＸｐｓｐ－ＨｙｔＫ．以脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）为介导，将这种质粒与仅含潮霉素Ｂ基因的质粒ＬＸＳＨ 分别转染胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３，用６０ Ｕ／ｍ ｌ潮霉素Ｂ进行筛选，得到了可稳定传代的阳性克隆，分别命名为ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 和ＢＧＣ－Ｈｙ．三种细胞的生长曲线无明显差别．用不同浓度的ＧＣＶ 分别作用于ＢＧＣ－ＨｙｔＫ， ＢＧＣ－Ｈｙ 及ＢＧＣ－８２３，０．０２～２００ μｇ／ｍ ｌ 的ＧＣＶ 对ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 细胞有明显的杀伤作用（ＩＣ５０＝ ０．０２ μｇ／ｍ ｌ），而对另外两种细胞几乎无毒性作用（ＩＣ５０＞ ２００μｇ／ｍ ｌ）．２０ μｇ／ｍ ｌＧＣＶ 作用９６ ｈ 后，仅存在２０％ 的ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 就可使周围的大部分ＨＳＶ－ｔｋ－ 的肿瘤细胞死亡，说明存在较显著的“旁观者效应”

三链DNA与基因治疗

一些脱氧寡聚核苷酸可与ＤＮＡ双螺旋序列特异性地结合形成三链ＤＮＡ，从而在转录水平及复制水平上调控基因表达。人们对于这种新的基因治疗策略—反基因技术，在用于治疗肿瘤及病毒性疾病等方面已有了广泛的研究，但要将其应用于临床仍面临许多亟待解决的问题。