目的筛选高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中差异表达长链非编码RNA(lncRNA),分析其作用。方法将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。对照组正常饲养4周,模型组给予4.5%高糖腹膜透析液腹腔注射4周(1 m L/kg、1次/d...目的筛选高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中差异表达长链非编码RNA(lncRNA),分析其作用。方法将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。对照组正常饲养4周,模型组给予4.5%高糖腹膜透析液腹腔注射4周(1 m L/kg、1次/d)。取两组壁层腹膜组织,进行HE染色,并采用Western blotting法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,结果均提示转分化模型建立成功。采用芯片技术筛选模型组与对照组差异表达lncRNA,应用生物信息学方法分析lncRNA芯片结果,采用RT-PCR法进行验证。结果芯片筛选结果显示,两组差异表达(≥2倍、P<0.05)lncRNA共757条,差异表达mRNA共1 431条。差异表达倍数较大(>5倍),长度为500~2 000 nt,表达丰度在1 000以上的2个上调和2个下调的lncRNA分别为ri|4732442J12|PX00051O23|2580、NONMMUT055611、NONMMUT002253、NONMMUT064302。差异表达lncRNA功能与细胞膜结合蛋白组成、膜蛋白基因转录、炎症防御反应、信号转导通路等有关;差异表达mRNA可能参与真核生物翻译过程、膜蛋白合成等途径。模型组NONMMUT002253、NONMMUT064302相对表达量低于对照组,ri|4732442J12|PX00051O23|2580、NONMMUT055611相对表达量高于对照组(P均<0.05),结果与芯片检测结果基本一致。结论高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中存在差异表达lncRNA,差异表达lncRNA参与腹膜间皮细胞转分化的形成。展开更多
目的探讨TOLL样受体4(TLR4)信号通路在大鼠脓毒症性急性肾损伤(sepsis-induced AKI,S-AKI)中的作用机制,及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制造脓毒症模型。将SD大鼠...目的探讨TOLL样受体4(TLR4)信号通路在大鼠脓毒症性急性肾损伤(sepsis-induced AKI,S-AKI)中的作用机制,及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制造脓毒症模型。将SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham组,S组)、脓毒血症组(CLP组)和NAC干预组(NAC+CLP组),每组18只,分别在术后6、12和24h观察以下各指标:苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色光镜下观察各组大鼠肾脏组织结构改变,免疫组化染色(SP法)检测TLR4动态表达水平,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)水平动态变化。结果与CLP组比较,NAC+CLP组肾脏组织结构改善,TNF-α、IL-1为表达水平下降。肾组织免疫组化染色显示TLR4主要在肾小管细胞胞质表达,肾小球几乎不表达,CLP组较S组表达增强,NAC+CLP组表达则较CLP组减弱。结论NAC对S-AKI具有保护作用,其机制可能为抑制TLR4信号通路,降低血清前炎症介质TNF-α、IL-1水平,进而抑制炎症反应;调节TLR4信号通路可成为防治S-AKI的新靶点。展开更多