氟非尼酮通过调控mTOR信号通路抑制百草枯中毒致肺纤维化的作用及机制研究

目的研究氟非尼酮(AKF-PD)对百草枯(PQ)中毒致肺纤维化的影响及其mTOR信号通路的调控作用,探讨氟非尼酮对百草枯中毒致肺纤维化的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、PQ组、PQ+AKF-PD组、AKF-PD组。通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组肺组织形态变化,分光光度法检测SOD、MDA、HYP含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析TGF-β1、E-Cadherin、α-SMA蛋白表达水平;将肺上皮细胞(HPAEpiC)分为对照组、PQ组、PQ+AKF-PD组、AKF-PD组,用百草枯诱导肺上皮细胞发生上皮间质转化,给予1 mmol/L氟非尼酮干预24 h后,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖活力,ELISA试剂盒检测炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,Western blot检测肺纤维化程度相关蛋白TGF-β1、ECadherin、α-SMA的表达水平以及mTOR信号通路相关蛋白mTOR和S6K1的磷酸化水平。结果与对照组相比,PQ组大鼠肺组织炎症反应明显,MDA、HYP含量以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而SOD含量以及E-Cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与PQ组相比,PQ+AKF-PD组大鼠肺组织炎症反应明显减轻,MDA、HYP含量以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平显著降低(P<0.01),而SOD含量以及E-Cadherin表达水平显著升高(P<0.01);与对照组相比,PQ组细胞增殖活力显著下降(P<0.05),炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著升高(P<0.01),TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平以及mTOR和S6K1的磷酸化水平显著增加(P<0.01),E-Cadherin的蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与PQ组相比,PQ+AKF-PD组细胞增殖活力显著升高(P<0.05),炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著降低(P<0.01),TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平以及mTOR和S6K1的磷酸化水平显著降低(P<0.01),而E-Cadherin的蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论AKF-PD可能通过抑制mTOR信号通路,减轻百草枯诱导的炎症反应和肺纤维化程度。

mTOR信号通路在肺纤维化中的作用研究进展

肺纤维化是由肺泡上皮细胞的持续损伤和病理损伤的修复引起的肺部疾病,其特征为连续的急性肺损伤以及随后的瘢痕形成和终末期肺病[1]。肺纤维化引起肺功能丧失,严重影响人体呼吸功能,表现为干咳和急性呼吸窘迫。随着肺损伤的加重和病情的不断恶化,患者的呼吸功能不断衰竭,最终导致死亡。肺纤维化包括继发性因素造成的肺纤维化和不明原因导致的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)。据统计,IPF的发病率和死亡率逐年上升,且预后很差,诊断后5年生存率为30%甚至更低,其死亡率高于大多数肿瘤[2]。肺纤维化的发病机制非常复杂,目前尚无有效的治疗药物和方法。近年有两种用于治疗特发性肺纤维化的靶向新药获得美国食品药品管理局(FDA)的审批,分别为吡非尼酮和尼达尼布,但其确切作用机制尚未完全明确。越来越多的研究发现在肺纤维化过程中出现mTOR信号通路过度活化,抑制该信号通路可通过减少细胞外基质的表达和抑制上皮间质转化等多种促纤维化途径抑制纤维化形成。现有研究证实mTOR信号通路的改变与自噬、炎症、细胞存活和生长的失调密切相关,从而导致肺纤维化的发生[3]。本文综述了mTOR信号通路在肺纤维化中作用的研究进展,以阐明mTOR信号通路在肺纤维化中的作用机制。

气相色谱-质谱的代谢组学方法研究血必净注射液对百草枯中毒大鼠的治疗作用

本研究采用基于气相色谱-质谱(GC-MS)的非靶向代谢组学方法,观察百草枯中毒大鼠血浆中的代谢变化及血必净注射液(XBJ)的治疗效果。通过化学计量学方法,在百草枯中毒组和对照组之间共鉴定出7种差异代谢物,其中5种代谢物质在XBJ处理后受到明显回调,改变的代谢途径包括能量代谢、氨基酸代谢、脂肪酸代谢和糖代谢。研究结果表明,基于GC-MS的代谢组学可以揭示百草枯中毒潜在的生物标志物,且XBJ可通过调节多种代谢途径发挥治疗作用。

代谢组学方法研究橙黄决明素对高脂血症大鼠血浆游离脂肪酸的影响

本文以高脂血症大鼠为模型,通过气相色谱-质谱(GC-MS)分析平台检测正常对照组、高脂血症组、橙黄决明素组、阿托伐他汀组中血浆脂肪酸的含量,运用统计学方法分析各组间游离脂肪酸的差异,探讨橙黄决明素对高脂血症大鼠血浆脂肪酸含量变化的影响。本实验成功建立了高脂血症大鼠模型,且四组之间的脂肪酸含量均存在不同程度的差异,其中模型组相比较于正常对照组C14∶0、C16∶1、C18∶1、C20∶0、C20∶1、C22∶6、C22∶0有显著性差异(P<0.05);橙黄决明素组中C14∶0、C20∶4、C20∶5、C20∶0、C22∶6的含量对比阿托伐他汀组和模型组要更接近正常对照组。实验结果表明,C14∶0、C20∶0、C22∶6三种脂肪酸含量变化与高脂血症代谢异常有关,且橙黄决明素在一定程度上可以调节高脂血症的脂肪酸代谢。