上海妇女乳腺癌危险度评价模型的初步研究

目的:筛选上海妇女患乳腺癌的危险因素,初步建立符合上海乳腺癌危险度评价模型,探讨乳腺癌低、中、高危险人群区分的分界点;并用该模型评估上海女性具备特定危险因素下患乳腺癌的机率。方法:采用Logistic回归法筛选乳腺癌的危险因素,以此建立乳腺癌危险度评价模型。判别分析评价模型;计算ROC曲线下面积观察此效能,并利用ROC曲线寻找乳腺癌低、中、高危险性的合适分界点。结果:乳腺癌调查人群可能的主要危险因素有:文化程度、乳腺疾病、乳腺疾病手术史、粗粮、蔬菜食品、雌激素药品、缺乏锻炼及熬夜。危险度评价模型预测低、中、高危人群,以预测概率值P≤0.076判为低危险性人群,预测概率值P≥0.243判为高危险性人群,0.076<预测概率值P<0.243判为中危险性人群。结论:该模型可评估上海女性具备特定危险因子情况下患乳腺癌的机率,为建立筛查标准提供一定依据。

乳腺浸润性导管癌ER、PR、CerbB-2、Ki-67表达与临床病理及预后的关系

目的观察乳腺浸润性导管癌患者生物学特征与临床病理及生存率的相关性,探讨这些生物学特征在临床诊断及预后中的价值。方法收集临床资料,采用免疫组化检测女性原发性乳腺浸润性导管癌324例患者的ER、PR、CerbB-2、Ki-67的表达状况,与患者的临床病理学如病理类型和组织学分级等因素相结合进行比较,并结合随访资料分析上述指标与患者预后的关系。结果乳腺浸润性导管癌术后生物学指标中,乳腺癌组织分级与CerbB-2、Ki-67阳性表达正相关(P=0.0498,P=0.0404);pTNM分期与CerbB-2、Ki-67阳性表达正相关。单因素生存分析显示ER、PR、CerbB-2和Ki-67阳性表达是乳腺癌复发的影响因素,而CerbB-2阳性表达对总生存率的影响有统计学意义(P<0.001)。多因素Cox模型分析显示CerbB-2、Ki-67阳性表达是影响乳腺癌复发的独立因素,而CerbB-2、Ki-67阳性表达是影响生存期的独立因素。结论CerbB-2、Ki-67指标与乳腺癌的组织学分级相关,CerbB-2、Ki-67阳性表达和乳腺癌pTNM分期相关。影响乳腺癌患者预后的独立因素有ER、PR、CerbB-2、Ki-67,其中CerbB-2、Ki-67阳性表达是预后不良的指标,ER、PR阳性表达是预后良好的指标。

siRNA抑制Ki-67表达对乳腺癌MCF-7/ADR细胞阿霉素耐药性的研究

目的采用Ki-67RNA表达载体干扰沉默Ki-67基因,检测其对乳腺癌MCF-7/ADR细胞株Ki-67mRNA及蛋白表达的影响,观察沉默ki-67基因前后乳腺癌细胞株对阿霉素敏感性改变。方法体外合成靶向Ki-67siRNA表达载体,应用脂质体法瞬时转染Ki-67高表达的乳腺癌细胞株MCF-7/ADR,应用RT-PCR和Western印迹法检测转染后Ki-67mRNA及蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖活性及转染前后细胞对阿霉素敏感性的变化。结果 Ki-67siRNA载体转染后24 h可显著抑制乳腺癌MCF-7/ADR细胞株的Ki-67mRNA和蛋白表达及细胞的增殖活性。Ki-67siRNA组阿霉素IC_(50)值为(6.3±0.9)μg/ml。结论 Si-Ki-67能够有效抑制Ki-67基因的表达,降低乳腺癌细胞的增殖能力,沉默Ki-7表达能部分逆转阿霉素耐药现象。

LKB1通过增强间隙连接细胞通讯增加乳腺癌细胞对顺铂的敏感性

目的研究LKB1对乳腺癌细胞顺铂化学敏感性的作用及机制。方法构建LKB1高表达的稳定转染细胞MDA-MB-231/LKB1及其空载对照细胞MDA-MB-231/VEC。RT-PCR、Western印迹法检测细胞间隙连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43和Cx50的核酸、蛋白水平表达;免疫荧光实验对Cx43进行胞内表达定位;染料传输实验评估间隙连接细胞通讯功能;细胞毒实验检测顺铂杀伤乳腺癌细胞的"旁观者效应"及计算顺铂的半数抑制浓度。结果 LKB1增加了间隙连接蛋白Cx43的核酸及蛋白水平表达(P<0.01),但对Cx26、Cx32及Cx50的表达水平无明显影响。LKB1增加了细胞膜上Cx43的表达,增强了细胞传递荧光黄染料的能力,并使顺铂对细胞的旁观者杀伤效应增强。LKB1也增加了细胞对顺铂的敏感性,MDA-MB-231、MDA-MB-231/VEC和MDA-MB-231/LKB1的半数抑制浓度分别为22.46、24.72、6.55 nmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LKB1通过增强乳腺癌细胞的Cx43表达及间隙连接细胞通讯功能增强了顺铂的旁观者杀伤效应,并增加了细胞对顺铂的敏感性。