血清降钙素原检测在恶性肿瘤患者感染诊断中的应用价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)检测在恶性肿瘤患者感染诊断中的临床价值。方法将入选病例依据培养结果分为细菌组、真菌组和阴性组,采用ELISA方法检测患者血清PCT水平。结果细菌感染组血清PCT水平明显高于真菌感染组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);血清PCT阈值分别为0.25ng/mL和0.5ng/mL时,88例细菌组PCT阳性率分别为84.1%(74/88)和63.6%(56/88),真菌组的阳性率均为10.5%(4/38),P<0.05。结论 PCT是有效诊断细菌感染的辅助指标,在鉴别细菌感染和真菌感染时取PCT阈值0.25ng/mL更具临床意义。当PCT<0.25ng/mL时,应考虑真菌或病毒感染。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统的性能验证探讨

目的探讨毅新博创Clin-TOF-I基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)分析性能验证方法,使之满足实验室对临床常见病原微生物的检测需要,为临床提供及时准确的鉴定结果。方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共167株,包含常见的革兰氏阳性及阴性杆菌67株、革兰氏阳性及阴性球菌45株、真菌33株,厌氧菌10株、苛养菌12株,所有菌株均经VITEK2 XL、Clin-TOF-II鉴定,必要时进行细菌16S rDNA验证。采用该质谱检测系统推荐的方法对以上菌株进行鉴定,完成准确度验证试验;选取标准菌株10株,采用该质谱检测系统对10株菌株每天进行质谱鉴定3次,连续鉴定3d,从而验证鉴定结果的重复性,即完成精密度验证。结果毅新博创质谱对标准/质控菌株的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对常见革兰氏阳性及阴性杆菌的种水平鉴定符合率95.5%;对常见革兰氏阳性球菌的种水平鉴定符合率为100%;对真菌的种水平鉴定符合率为90.9%;对苛养菌的种水平鉴定符合率为100%;对厌氧菌的种水平鉴定符合率为100%。精密度验证试验结果重复性为100%。结论MALDI-TOF MS系统在革兰氏阳性及阴性杆菌、革兰氏阳性及阴性球菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度均符合规定要求,验证通过。

2019年至2021年血液病住院患者血流感染病原菌分布及耐药性分析

目的:分析解放军总医院血液病住院患者血流感染病原菌的分布特点和耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据。方法:对2019年至2021年血液病和非血液病住院患者送检的血培养及药敏结果进行回顾性分析,用VITEK-2微生物分析仪进行微生物鉴定和药敏试验。结果:血液病患者血培养阳性标本病原菌以革兰阴性杆菌为主(71.2%),其次是革兰阳性菌(26.8%)、真菌(2.0%);主要病原菌有大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌等;主要革兰阴性菌对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南敏感率较高;主要革兰阳性菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率较高;葡萄球菌属未发现万古霉素、替加环素和利奈唑胺耐药株;分离的真菌对二性霉素B和伏立康唑的敏感率高。对血液病和非血液病患者血流感染的病原菌进行比较,发现血液病患者铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌构成比高于非血液病患者,凝固酶阴性葡萄球菌和白色假丝酵母菌明显低于非血液病患者(P<0.05)。血液病患者大肠埃希菌对碳青霉烯类药物、喹诺酮类药物等的耐药率高于非血液病患者,差异有统计学意义(P<0.05);肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌对碳青霉烯类、喹诺酮类等抗菌药物的耐药率均低于非血液病患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:革兰阴性菌是引起本院血液病住院患者血流感染最主要的病原菌,以大肠埃希菌最为常见,与本院非血液病患者病原菌分布结果大致相同。革兰阴性菌对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感率高,革兰阳性菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率高。本研究发现血液病患者大肠埃希菌对碳青霉烯类药物、喹诺酮类药物等的耐药率高于非血液病患者,在临床诊治中应加强对碳青霉烯类药物和喹诺酮类药物的关注和监控,及时进行病原菌和耐药性监测、正确选用抗菌药物、及早控制血流感染,对预后非常重要。

血液病患者中段尿培养病原菌分布特点及耐药性分析

目的探讨解放军总医院第五医学中心(南院区)2016年至2019年血液科住院患者中段尿培养病原菌分布特点和耐药性分析,为临床经验用药提供依据。方法选取我院2016年1月至2019年12月血液科住院患者送检的中段尿标本,采用梅里埃VITEK 2全自动微生物分析系统进行细菌鉴定和药敏试验,将筛选出的118例阳性标本进行病原菌分布及耐药性分析。结果118例阳性标本中,革兰阴性杆菌占58.48%、革兰阳性球菌占35.60%、念珠菌占5.92%。病原菌以大肠埃希菌(31.36%)、屎肠球菌(17.80%)、肺炎克雷伯菌(12.71%%)、粪肠球菌(11.86%)多见。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株分别占48.60%、40.00%。大肠埃希菌对呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星和美罗培南的敏感率较高,为82.90%~97.20%;对左氧氟沙星、环丙沙星、头孢唑啉的敏感率较低,只有32.40%。21株屎肠球菌中,耐万古霉素屎肠球菌占38.10%,对替加环素、利奈唑胺的敏感率均为100%。屎肠球菌的耐药率高于粪肠球菌。结论血液病患者泌尿系统感染病原菌种类较多,大肠埃希菌和屎肠球菌是感染的最主要病原菌,不同病原菌耐药率有差异,但屎肠球菌感染率较多且对万古霉素的耐药比率偏高,应该引起血液科临床医师高度重视。临床应积极进行清洁中段尿培养及药物敏感试验,根据药敏结果合理选择抗菌药物进行治疗。

MALDI-TOF MS用于耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性分析的研究

目的探索基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)进行同源性分析在临床实验室应用的可行性。方法以多位点序列分型(MLST)方法对95株CRKP分型结果为标准,采用MALDI-TOF MS技术对上述95株CRKP分析后的聚类分析结果进行一致性比较,观察Microflex TM质谱仪对CRKP的分型能力。结果Microflex TM质谱仪聚类分析结果显示95株菌分为2大类,5个亚类。其中Ⅰb和Ⅰc亲缘关系较近,Ⅰa与Ⅰb、Ⅰc较远;与MLST结果相比较,ST1、ST15分布在Ⅰb亚类中;ST1198、ST152、ST1030、ST1254分布在Ⅱa亚类中;ST2260、ST2928分布在Ⅱb亚类中,其余87株ST11型分布在各亚类中。结论MALDI-TOF MS聚类分析结果与MLST结果并不一致,MALDI-TOF MS应用于同源性分析还需更详细的研究。

肺癌患者合并下呼吸道感染病原学特征及药物敏感性分析

目的探讨我院肺癌患者合并下呼吸道感染的病原菌分布特征及药物敏感性情况,为临床合理应用抗菌药物提供参考依据。方法从我院病历管理系统中收集2020~2021年肺癌合并下呼吸道感染患者的临床病历资料,对患者临床特征、病理分型、病原菌特征、药物敏感性及临床抗感染治疗等情况进行了回顾性分析。结果肺癌合并下呼吸道感染的76例患者中,肺部CT检查结果显示肺部炎症占89.5%;病理分型以非小细胞肺癌为主;共分离出病原菌120株,其中革兰阴性菌91株,占75.8%,革兰阳性菌20株,占16.7%,真菌9株,占7.5%;76例患者中9例为混合感染,发生率为11.8%,以真菌混合革兰阴性菌感染为主。克雷伯菌属和铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的敏感率均在93.0%以上,对左氧氟沙星和环丙沙星的敏感70.0%~93.3%;主要革兰阳性菌对奎奴普丁/达福普汀、利福平、万古霉素、利奈唑胺的敏感率均为100%;有69.7%的患者经抗感染治疗得到缓解或控制,根据药敏试验结果调整经验用药进行针对性治疗的患者占30.3%。结论我院肺癌合并下呼吸道感染的病原菌以革兰阴性菌为主,以克雷伯菌属和铜绿假单胞菌最为常见。不同病原菌对不同抗菌药物敏感性不同,临床可选用哌拉西林/他唑巴坦等药物对革兰阴性菌进行经验性治疗,可选用奎奴普丁/达福普汀、利福平、万古霉素、利奈唑胺等药物对革兰阳性菌进行经验性治疗。临床医师应结合患者情况综合评定是否经验性使用碳青霉烯类药物,并根据药物敏感性试验结果进行针对性治疗,及时控制感染,改善患者预后,提高肺癌患者的救治成功率。

利用多位点序列分型方法对CRKP分型的初步研究

目的调查我院耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)分子分型特征,分析其同源性,为院内感染控制提供依据。方法收集我院2017年10~12月,经改良Hodge实验(modified Hodge test,MHT)筛选为阳性的肺炎克雷伯菌95株。采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,通过PCR扩增和核酸序列分析获得7对管家基因序列,将结果在MLST网站进行比对获得序列型(sequence type,ST)。结果 95株CRKP可分为9个序列型,分别为ST1、ST11、ST15、ST152、ST11030、ST1198、ST1254、ST2260、ST2928。其中ST11型占91. 6%(87/95),为我院主要流行序列型。结论我院重症医学科、ICU、内科监护病均房存在ST11耐药菌的流行,MLST可用于临床CRKP的分子分型。

恶性肿瘤及血液病患者血流感染的病原菌分布及耐药性分析

目的研究恶性肿瘤及血液病患者血流感染的病原菌分布及耐药性,为临床早期诊断和正确使用抗菌药物治疗提供依据。方法采用BacT/Alert 3D全自动血培养仪进行血培养,用VITEK-2微生物分析仪进行微生物鉴定和药敏试验,对2009-2011年的5173例恶性肿瘤及血液病住院患者的血培养及药敏结果进行回顾性分析。结果从5173份血培养标本中分离病原菌568株,其中革兰阴性菌388株占68.3%,以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主,革兰阳性菌159株占28.0%,以屎肠球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,真菌21株占3.7%,以热带假丝酵母菌为主;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的敏感率均为100.0%,铜绿假单胞菌对阿米卡星及哌拉西林/他唑巴坦敏感率高;葡萄球菌属对万古霉素、利奈唑胺的敏感率均为100.0%,屎肠球菌对利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀敏感率均>95.0%。结论血培养检出的病原菌种类多、耐药率高、危害程度大;血液病及恶性肿瘤患者免疫功能低下、抵抗力差;因此,及时进行病原菌及耐药性监测、正确选用抗菌药物、及早控制血流感染,对预后非常重要。

消化道肿瘤患者真菌感染的临床特点及耐药性分析

目的探讨消化道肿瘤患者真菌感染的种类分布及耐药性,为其预防及诊治提供理论依据。方法回顾性分析2013年1-12月消化道肿瘤患者真菌感染的种类分布及耐药性,病原菌培养、鉴定和药敏试验严格按照《全国临床检验操作规程》进行,采用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果 87例真菌感染患者感染部位以下呼吸道为主,占80.5%,其次为消化道占17.2%;送检标本中共检出真菌90株,其中以白色假丝酵母菌为主,占64.4%,其次为热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌,分别占13.3%、11.1%;真菌感染患者中53例发生二重感染,发生率60.9%,发生二重感染的细菌主要以肺炎克雷伯菌和鲍氏不动杆菌为主,分别占28.3%、24.5%;克柔假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌对伊曲康唑的耐药率较高,分别为71.4%、60.0%,白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌对伏立康唑、两性霉素B的敏感性高,无耐药菌检出。结论消化道肿瘤患者以下呼吸道真菌感染最多见;二重感染的发生率较高,检出真菌主要为白色假丝酵母菌,细菌主要肺炎克雷伯菌;对晚期肿瘤下呼吸道感染患者应及时进行病原学检测,根据检验结果合理应用敏感抗菌药物进行治疗,有效地控制医院感染。

恶性血液病患者血流感染病原菌分布与耐药性分析

目的了解恶性血液病患者血流感染的病原菌分布特点及耐药性,为临床合理选用抗菌药物、有效控制感染提供依据。方法收集2012年1月-2013年10月医院恶性血液病患者送检的血培养标本3 609份,采用Bact/ALERT 3D全自动血培养仪及其配套的血培养瓶、VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析仪,对分离出的病原菌及药敏结果进行回顾、整理、分析。结果恶性血液病患者送检的3 609份血培养标本中254份阳性,阳性率为7.0%;共分离出病原菌261株,革兰阴性菌173株占66.3%,前3位为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌,革兰阳性菌71株占27.2%,前3位为表皮葡萄球菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌,真菌7株占2.7%,以热带假丝酵母菌为主;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的耐药率较低,均<20.0%,铜绿假单胞菌对美罗培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、左氧氟沙星等的耐药率均<10.0%;葡萄球菌属及屎肠球菌对喹奴普汀/达福普汀、利奈唑胺的耐药率均为0。结论恶性血液病患者血液中分离病原菌种类繁多,耐药性严重,及时有效进行病原菌及耐药性监测十分必要。

白血病患者化疗后多发性曲霉菌骨髓炎的诊治

目的探讨黄曲霉菌引起急性淋巴细胞白血病患者化疗后多发性骨感染的试验诊断和治疗方法,总结免疫低下患者多发性曲霉菌骨髓炎的诊治措施。方法通过行C型臂透视引导下椎间隙穿刺活检术对患者进行取材做真菌培养,根据真菌培养菌落特点和镜下形态鉴定致病真菌,采用MIC方法进行真菌体外药敏试验,根据药敏试验结果进行治疗并进行文献复习。结果从患者腰椎间隙内采集的血性液体标本经培养、鉴定为黄曲霉菌,对伏立康唑、卡泊芬净有较低的MIC值,分别为0.25、0.03μg/ml;随后选用伏立康唑和两性霉素B脂质体联合治疗有效;经检索中国期刊网全文数据库、美国国立图书馆PubMed数据库,未见有关白血病患者合并曲霉菌性骨髓炎的中文报道,国外报道文献4篇(4例),但未见曲霉菌属引起白血病患者多发感染的报道。结论血液系统恶性肿瘤化疗后合并黄曲霉菌造成的多发性骨感染极其罕见,且难诊断、难治疗,病死率极高,应引起足够重视;应尽快对感染部位进行穿刺取活检或抽取液体行病原菌培养及药敏试验,积极获取病原学证据;早期诊断和及时进行合理的抗真菌治疗是降低高病死率的关键。

临床少见丝状真菌的实验室诊断

目的通过对临床少见丝状真菌的分离和分析鉴定,探讨尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉、茄病镰刀菌等临床不常见丝状真菌的实验诊断方法,为临床明确诊断真菌感染种类提供科学依据。方法从临床标本培养出的5株真菌用形态学方法未能作出准确鉴定,通过聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法分析核糖体转录间隔区域ITS和ITS2序列,在NCBI网站应用Blastn对获得的基因序列进行同源性分析及利用Gen Bank中的系统发育软件自动生成系统发育树,以确定丝状真菌的种。结果 r DNA-ITS序列分析结合形态学分析,5株菌均可鉴定到种的水平,鉴定结果分别是:尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉和茄病镰刀菌。结论传统形态学方法,极易受检验人员经验水平影响,对于罕见菌株甚至不能作出鉴定,利用真菌的ITS序列的特异性,可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种水平。

2012～2013年军事医学科学院附属医院主要病原菌分布及耐药性分析

目的：探讨军事医学科学院附属医院感染性疾病中主要菌群分布特点及耐药现状，为临床医师经验用药提供参考依据。方法回顾性分析近1年该院住院患者病原菌的感染情况。结果3815株病原菌中，革兰阴性杆菌占63．6％，革兰阳性菌占36．4％。最常见的细菌种类依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌和表皮葡萄球菌。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感，总耐药率为2％～5％。鲍氏不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为60％。肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替加环素和利奈唑胺耐药株。耐万古霉素屎肠球菌为9％，主要分布于呼吸重症监护、血液和肿瘤科。标本来源以痰标本为主。结论病原菌分布的科室较为集中与该院收治的患者病种有关；病原菌的检出以下呼吸道标本为主，种类繁多，细菌耐药现象较为普遍，耐万古霉素肠球菌、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌检出率较高。

急性白血病患者裂褶菌感染的实验室诊断研究

目的探讨裂褶菌及细菌引起急性髓性白血病造血干细胞移植患者多重感染的试验诊断和治疗方法,为临床诊断该菌感染及经验治疗提供科学依据。方法 2014年12月连续采集两次1例急性髓性白血病行造血肝细胞移植患者副鼻窦分泌物和副鼻窦清创术后坏死组织,进行真菌和细菌培养;采用法国生物梅里埃公司VITEK-2全自动微生物分析仪对细菌进行鉴定和药敏试验;采用肉汤稀释法(CLSI M38-A2)进行真菌体外药敏试验,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果该例患者副鼻窦清创术后组织块真菌培养结果为裂褶菌,其对伏立康唑有较低的MIC值;连续两次副鼻窦分泌物和术中留取的组织块细菌培养结果均为大肠埃希菌和嗜麦芽寡养单胞菌;产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢他啶等均为敏感,嗜麦芽寡养单胞菌敏感抗菌药物只有磺胺甲噁唑/甲氧苄啶。结论裂褶菌的感染少见,且难诊断,极易感染免疫低下的患者,及早进行病原学诊断,正确选用抗菌药物,是抗感染治疗成功与否的关键。

急性中毒合并感染患者的病原微生物分布特点及耐药性分析

目的 探讨急性中毒合并感染患者病原微生物分布特点及耐药情况,为其诊治和预防提供参考依据。方法回顾性研究2015-2020年急性中毒患者中毒种类和病原微生物感染等情况。结果 急性中毒最常见的是农药中毒,其次是药物中毒,患者感染部位以下呼吸道(69.8%)和泌尿道(18.2%)为主;1129株病原菌中,细菌占78.48%,真菌占21.52%。最常见病原菌种类依次为鲍曼不动杆菌、白色假丝酵母菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌;耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分离率较高,分别为80.6%和87.5%。药敏试验结果显示,非发酵鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物,如碳青霉烯类、头孢三代、头孢四代、β-内酰胺类复合物和氟喹诺酮类的耐药率均>70%;肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类、β-内酰胺类复合物的哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低,为8%~14%。常用抗菌药物中,头孢三代和四代、氟喹诺酮类对大肠埃希菌较为耐药,而对肺炎克雷伯菌则较为敏感。金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、粪肠球菌未发现对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药株。屎肠球菌中,VRE分离率为3.3%。真菌药敏结果显示,常见的假丝酵母菌属对两性霉素B和5-氟胞嘧啶的敏感率均为100%;氟康唑可作为除对氟康唑固有耐药的克柔假丝酵母菌外的假丝酵母菌属真菌的经验用药。结论 急性中毒患者以农药中毒为主,感染部位以下呼吸道为主,感染病原菌种类繁多,不同病原菌对抗菌药物耐药性存在差异。为提高急性中毒抢救成功率,必须重视中毒后相关细菌和真菌感染的诊断,并依据微生物鉴定和药敏试验结果,选择适宜抗生素和其他治疗药物,以达到最大限度挽救患者生命目的。