扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子-β1、α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的观察扁蒴藤素对肺纤维化模型小鼠肺组织形态及转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用气管内注射博来霉素溶液制备小鼠肺纤维化模型。将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、扁蒴藤素组及吡非尼酮组,每组8只。正常组和模型组给予等量生理盐水腹腔注射,扁蒴藤素组给予1 mg/kg扁蒴藤素溶液腹腔注射,吡非尼酮组给予50 mg/kg吡非尼酮溶液腹腔注射。给药体积10 mL/kg,每日1次,连续28 d。取肺组织行HE及Masson染色,评估小鼠肺组织病理学变化及胶原沉积;免疫组化和Western bot检测小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白的表达。结果HE及Masson染色显示,扁蒴藤素组小鼠肺泡炎及肺纤维化评分低于模型组(P<0.05,P<0.01);免疫组化及Western blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠TGF-β1及α-SMA蛋白表达明显升高;与模型组比较,扁蒴藤素组和吡非尼酮组小鼠肺组织TGF-β1及α-SMA蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论扁蒴藤素可改善模型小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1及α-SMA蛋白表达有关。

香砂六君合半夏泻心汤对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力影响

目的探讨香砂六君合半夏泻心汤对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力的调控作用及其作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组10只和造模组40只,造模组采取一次性腹腔注射80 mg/kg链脲佐菌素联合高脂高糖不规则饮食以建立糖尿病胃轻瘫模型,造模成功的大鼠随机分为造模组、莫沙必利组以及香砂六君合半夏泻心汤组,每组10只,连续灌胃给药8周。每2周测定各组大鼠体质量和随机血糖,给药8周后测定各组大鼠胃排空率和小肠推进率,Western blot法检测胃窦组织c-kit蛋白表达,免疫组化法检测胃窦组织Cajal间质细胞(ICC)变化和α-SMA蛋白表达,Masson染色法观察胃平滑肌纤维化情况,ELISA法检测血清中胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、P物质(SP)、生长抑素(SS)、胆囊收缩素(CCK)含量。结果给药8周后,与造模组比较,香砂六君合半夏泻心汤组体质量和胃排空率升高,胃窦组织中ICC数量增加,c-kit蛋白表达升高而α-SMA蛋白表达降低,纤维化程度明显减轻,血清中GAS和MTL含量降低,SP和CCK含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论香砂六君合半夏泻心汤对糖尿病胃轻瘫大鼠有一定的胃排空促进作用,其作用机制可能与调节胃肠激素紊乱和改善胃平滑肌病变等相关。

类风湿关节炎中相关促炎因子和抑炎因子的研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种常见的自身免疫性疾病,其发病机制目前尚不明确。炎症因子作为RA中调节滑膜炎症的主要介质,以不同形式参与RA的进展,成为RA治疗的潜在靶点。根据炎症因子的功能将其分为促炎因子和抑炎因子,常见的促炎因子有肿瘤坏死因子-α、白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-23、IL-1β、γ干扰素等;抑炎因子主要有IL-4、IL-10、IL-13等。目前,多种药物获批用于RA治疗,深入研究RA相关细胞因子及其在RA中的作用机制,可为RA药物的研发提供新思路。

阅读教学如何发挥学生的主观能动性

兴趣是学生最好的老师，小学生一旦有了课外阅读的兴趣，就能最大限度地调动他们的内驱力，主动自觉地大量阅读，语文阅读能力就会很快得到提高。“读书破万卷，下笔如有神”是我国古代文人读书经验的总结。让学生多读书，读好书，与书交朋友，既是语文教师应尽的责任，也是语文课程标准对语文教师提出的要求。

“痹痛方”对胶原诱导关节炎模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响

目的:观察痹痛方对胶原诱导关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响,探讨痹痛方治疗类风湿关节炎的抗炎作用机制。方法:将50只DBA/1小鼠随机分为5组,每组10只,分别为空白对照组、模型组和痹痛方小、中、大剂量组。除空白对照组外,其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型。造模成功后,痹痛方小、中、大剂量组分别予痹痛方0.108、0.432、1.728g/kg灌胃,模型组和空白对照组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续灌胃28d。末次灌胃后处死小鼠并取材,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中白介素-6(IL-6)、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达,实时荧光定量法(RT-PCR)检测小鼠关节组织中炎症因子IL-6、IL-10、IL-23和干扰素γ(IFN-γ)、干扰素γ受体1(IFN-γR1)、IFN-γR2 mRNA的表达,免疫印迹分析法(Western Blot)检测小鼠关节组织中IL-6和IL-10蛋白的表达,苏木精-伊红染色法(HE)观察关节组织形态变化,免疫组织化学法(IHC)检测小鼠关节中IL-6的表达。结果:干预结束后,模型组小鼠血清中IL-6、IL-17、TNF-α表达,关节组织中IL-6、IFN-γR1 mRNA和IL-6蛋白表达均较空白对照组明显升高(P<0.001,P<0.01)。HE染色和IHC显示模型组小鼠关节腔界限不清晰,腔内狭窄,大量炎性细胞浸润,可见大量的IL-6阳性细胞表达。痹痛方各剂量组小鼠血清中IL-6水平,关节组织中IL-6、IL-10、IFN-γR1 mRNA和IL-6蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01,P<0.001);痹痛方小剂量和大剂量组小鼠关节组织中IL-23 mRNA表达明显低于模型组(P<0.05);痹痛方小剂量和中剂量组小鼠关节组织中IL-10蛋白表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。病理结果示,痹痛方各剂量组小鼠关节炎症减轻,IL-6表达减少。痹痛方各剂量组之间比较,血清中IL-17、TNF-α,关节组织中IL-6、IL-10、IL-23、IFN-γR1 mRNA和IL-6、IL-10蛋白的表达均有统计学差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论:痹痛方可减轻胶原诱导关节炎模型小鼠关节炎症,其可能的作用机制为抑制IL-6为主的炎症因子的表达,同时升高抑炎因子IL-10的表达。

猪苓多糖通过JAK2-STAT3通路抑制N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基诱导的GES-1细胞上皮间充质转化

目的研究猪苓多糖抑制胃黏膜上皮细胞(GES-1)间充质转化的作用和机制。方法应用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基(MNNG,40μmol·L^(−1))诱导GES-1细胞间充质转化模型,造模同时给予猪苓多糖(1.25、2.50、5.00、10.00 mg·mL^(−1))处理24、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力;造模同时给予猪苓多糖(5.00 mg·mL^(−1))处理48 h后,实时定量PCR(qRT-PCR)法检测猪苓多糖对N-cadherin、Snail、Twist、Fibronection及Vmention mRNA表达的影响;Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetin、Vimentin、STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2蛋白表达。裸鼠分别sc经MNNG 40μmol·L^(−1)处理48 h后的GES-1细胞(5×10^(7)·mL^(−1),0.2 mL)、胃癌细胞SGC7901(5×10^(7)·mL^(−1),0.2 mL,阳性对照),1个月后观察各组成瘤及体质量情况,注射局部进行HE染色后行组织病理学观察,验证GES-1细胞经MNNG处理后是否达到肿瘤阶段。结果与模型组比较,随猪苓多糖浓度的增加,GES-1细胞增殖能力逐渐上升,到达5 mg·mL^(−1)时增殖能力最高,差异显著(P<0.01、0.001);猪苓多糖组N-cadherin、Snail、Twist、Fironetion及Vimentin的mRNA表达均显著下降(P<0.05、0.01、0.001);猪苓多糖组E-cadherin蛋白表达显著上升(P<0.05),N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetion、Vimentin及通路蛋白STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2表达显著下降(P<0.05、0.01、0.001)。对照组和MNNG处理的GES-1组未见瘤体形成,阳性对照SGC7901组注射后1周左右局部出现瘤体,1个月瘤体长至6 cm左右;MNNG处理的GES-1组裸鼠精神较差,体质量明显减轻,SGC7901组裸鼠状态差,体质量大幅减轻;对照组和MNNG组病理染色显示为正常的皮肤组织,阳性对照组显示为肿瘤组织。结论猪苓多糖可能通过抑制JAK2-STAT3通路干预MNNG诱导的GES-1细胞上皮间充质化。

化痰消瘀方治疗胃癌前病变的分子机制研究

目的:基于网络药理学预测和胃癌前病变(PLGC)大鼠模型验证的方法,探讨化痰消瘀方治疗胃癌前病变的分子机制。方法:利用网络药理学技术筛选化痰消瘀方治疗胃癌前病变的关键活性成分及其作用靶点,并进行蛋白质间相互作用分析,GO功能富集和KEGG通路富集。建立PLGC大鼠模型,给予化痰消瘀方干预治疗12 w,苏木精-伊红染色法观察大鼠胃黏膜组织的病理学改变,AB-PAS染色法观察大鼠胃黏膜组织的肠上皮化生病理改变,免疫组化法对预测结果中PI3K/Akt信号通路的相关蛋白表达进行分析。结果:网络药理学结果显示:化痰消瘀方含有98个活性成分,作用于129个靶点,主要涉及酶结合、药物反应、细胞凋亡调控等生物学途径以及PI3K/Akt、TNF等信号通路。动物实验验证结果显示:与模型对照组比较,化痰消瘀方干预治疗后可改善PLGC大鼠胃黏膜组织病理学改变,并减轻肠上皮化生等病理改变,PI3K/Akt信号通路中相关蛋白p-Akt、p-PI3K、mTOR表达下调,PTEN表达上调。结论:化痰消瘀方通过多成分、多靶点、多通路共同作用治疗PLGC,其中PI3K/Akt信号通路是其作用的主要通路之一。

基于血清代谢组学探讨香砂六君合半夏泻心汤治疗糖尿病胃轻瘫大鼠的作用机制

目的:采用血清代谢组学探讨香砂六君合半夏泻心汤治疗糖尿病胃轻瘫大鼠的作用机制。方法:除正常组外,其余大鼠给予腹腔注射链脲佐菌素及高脂饲料喂养建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型。大鼠模型成功建立后随机分为模型组、莫沙比利组(1.56 mg·kg^(-1))及香砂六君合半夏泻心汤组(9.3 g·kg^(-1))。给予药物干预8周后,测定各组大鼠胃残留率;收集大鼠血清样本,采用GC-MS技术对血清样本进行高分辨质谱检测,应用PLS-DA多元模式进行血清代谢轮廓的比较以及生物标志物的鉴定,运用MetPa数据库分析相关代谢通路。结果:与正常组相比,模型组的胃残留率显著升高(P<0.01);香砂六君合半夏泻心汤组和莫沙必利组的胃残留率较模型组明显降低(P<0.05)。血清代谢组学结果显示:正常组和模型组的代谢轮廓具有明显的差异,香砂六君合半夏泻心汤组的代谢轮廓趋近正常组,并对血清中N-乙酰天门冬氨酸、葡萄糖-1-磷酸、塔格糖、3-6脱水-D-半乳糖、木糖醇和脯氨酸等13个生物标志物具有明显的回调作用,并筛选出2条相关的代谢通路。结论:香砂六君合半夏泻心汤对糖尿病胃轻瘫大鼠有一定改善胃动力作用,其作用机制可能与通过回调多种血清代谢产物的含量及调控多条代谢通路等相关。