酿酒酵母丙酮酸脱羧酶基因的克隆及表达

目的酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)丙酮酸脱羧酶 (PDC)基因的克隆和表达。方法利用PCR技术从酿酒酵母的总cDNA中钓取出PDCsc基因 ,构建其高效表达质粒 ,利用Ion和ompT蛋白酶缺陷株EscherichiacoliBL2 1 (DE3)进行表达。结果扩增出长约 1 7kb的PDCsc基因 ,成功构建其表达质粒pSC -2 2b ,对转化菌株的SDS -PAGE分析结果显示 :该基因获得高效表达 ,表达蛋白占细胞总蛋白的 1 8 6 %。结论成功构建高效表达PDCsc基因的工程菌株 。

丙酮酸脱羧酶及其在手性合成中的应用

主要介绍了酿酒酵母和移动单孢中丙酮酸脱羧酶的结构、性质及其在手性合成中的应用 ,包括反应的机理。

E-钙粘素在大鼠阿霉素肾病模型中的表达及其意义

目的动态观察E-钙粘素(E-cadherin)在大鼠阿霉素肾病模型中肾小球内的表达,探讨其变化在肾小球疾病中的作用。方法采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素(浓度2 mg/ml,剂量7.5 mg/kg)建立阿霉素肾病模型,生化检测白蛋白变化,尿液检测24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾小球形态学改变,免疫组化检测肾组织E-cadherin和纤维连接蛋白(FN)的表达。结果阿霉素肾病组大鼠肾脏肾小球形态于第4周时出现微小病变,第8周时为局灶阶段性硬化;并且肾病组大鼠均出现大量蛋白尿、低蛋白血症,肾病组与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);E-cadherin在肾小球足细胞的表达随着肾小球病变的加重而逐渐减少;FN在肾小球内的表达随着肾小球病变的加重而逐渐增加;E-cadherin和FN在肾组织内的表达呈负相关(r=0.926,P<0.001)。结论阿霉素肾病组大鼠肾小球E-cadherin表达减少和FN表达增加在不同阶段表达的变化可能参与了肾小球硬化的发生发展过程。

分析持续质量改进在医务人员手卫生管理中的应用价值

目的观察持续质量改进在医务人员手卫生管理中的应用效果。方法选取该院的2018年5月—2019年3月80名医务人员,将40名未采用持续质量改进而采用常规手卫生管理措施的医务人员作为对照组;将40名采用持续质量改进的医务人员作为研究组。分析研究组与对照组医务人员在手卫生管理中的知晓情况,同时对比两组医务人员的手卫生执行情况。结果采用不同管理措施管理后,研究组医务人员在手卫生知识知晓率、手卫生正确率以及手卫生依从性中均显著高于对照组(P<0.05);且研究组医务人员在接触患者前后、无菌操作前以及接触血液后的手卫生执行率均高于对照组(P<0.05)。结论持续质量改进在医务人员手卫生管理中具有良好的临床效果,能够有效提高医务人员的手卫生意识与执行情况。

基质金属蛋白酶-9在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达

目的:动态观察基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinase-9,MMP-9)在阿霉素肾病大鼠肾小球内的表达,探讨其变化在肾小球疾病中的作用。方法:采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素(浓度2mg/ml,剂量7.5mg/kg)建立阿霉素肾病模型,生化检测白蛋白变化,尿液检测24h尿蛋白定量,光镜下观察肾小球形态学改变,免疫组化检测肾组织MMP-9和纤维连接蛋白(FN)的表达。结果:阿霉素肾病组大鼠第4周时出现出现大量蛋白尿、低蛋白血症,与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);电镜下可见肾小球足突广泛融合;第8周部分肾小球发生局灶性硬化;MMP-9在肾小球足细胞的表达随着肾小球病变的加重先增加后减少;FN在肾小球内的表达随着肾小球病变的加重而逐渐增加。24h尿蛋白定量与MMP-9表达呈负相关,与FN表达成正相关,肾小球MMP-9与FN表达呈负相关。结论:阿霉素肾病组大鼠肾小球MMP-9和FN在不同阶段表达的变化可能参与了肾小球硬化的发生发展过程。

银杏叶注射剂指纹图谱的研究

目的 建立银杏叶药材、中间体及其注射剂中间体的指纹图谱。方法 以芦丁为内标物 ,采用 HPL C法分析银杏黄酮苷。结果 银杏叶药材、中间体及注射剂的指纹图谱有较好的相关性 ,所有共有峰的参数符合国家药品监督管理局关于有关中药注射剂的技术要求。

纤维连接蛋白在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达

背景:纤维连接蛋白表达增加在肾间质纤维化疾病进展过程中发挥着的重要作用。目的:观察纤维连接蛋白在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。方法:72只大鼠随机等分为对照组、假手术组和模型组。模型组建立单侧输尿管梗阻模型;假手术组仅开腹游离左侧输尿管;对照组不做任何处理。结果与结论:与对照组及假手术组比较,模型组大鼠梗阻时间越长,肾小管间质损害程度越重,纤维化越明显,肾组织中纤维连接蛋白、基质金属蛋白酶9和转化生长因子β1表达即明显增多,且随着梗阻时间延长,肾组织中纤维连接蛋白、基质金属蛋白酶9和转化生长因子β1表达呈持续增加趋势,至造模后第14天达到高峰,与同期对照组、假手术组相比差异有显著性意义(P<0.01),说明在大鼠肾纤维化形成过程中,纤维连接蛋白的蛋白表达在肾损伤早期即显著增加,并随肾间质纤维化程度加重而逐步升高,从而促进肾纤维化的发生。而基质金属蛋白酶9的高表达可能是加重肾间质损害的因素之一。

利用重组F26G酶实现呋甾皂苷向螺甾皂苷的体外生物转化

用BamHⅠ和XbaⅠ两种限制酶酶切质粒 pKG2 7,获得了编码F2 6G(F2 6G :furostanolgly coside 2 6 O β glucosidase)的cDNA ,然后将其重组到表达载体 pET 2 2b上而得到pET 2 2b CSF2 6G ,利用大肠杆菌E .coliBL2 1进行表达 ,用胞内可溶蛋白进行酶反应 ,通过TLC、HPLC分析证明重组菌表达出高活性的F2 6G酶 。

E-钙粘蛋白和MMP-9在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达及其意义

目的观察E-钙粘蛋白、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肾间质纤维化(R IF)大鼠肾组织中的表达,探讨E-钙粘蛋白、MMP-9在R IF中的作用。方法选用SD大鼠72只。随机分为正常对照组、假手术组和模型组,制备单侧输尿管梗阻UUO模型。采用病理及免疫组织化学等方法动态观察各组大鼠第1天、第3天、第7天、第14天肾脏组织学变化和E-钙粘蛋白、MMP在肾小管间质中表达情况。结果 UUO模型组大鼠肾小管间质损害明显,肾小管上皮细胞E-cadherin表达逐渐下调,于第14天达最低值。肾小管上皮细胞MMP-9表达上调,第3、7、14天与同期正常对照组、假手术组相比差异显著。肾小管上皮细胞E-钙粘蛋白表达量与肾小管间质损害程度呈负相关,MMP-9表达量与肾小管间质损害程度呈正相关。结论 E-钙粘蛋白表达下调、MMP-9表达上调、E-钙粘蛋白与MMP-9表达失衡可能是肾间质纤维化形成促进因素之一,并可能参与肾间质纤维化形成的全过程。

肝细胞生长因子对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏E-cd、FN和MMP-9表达的影响

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织中E-钙黏蛋白(E-cd)、纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法采用单侧输尿管结扎制造梗阻性肾病模型,将72只SD大鼠随机分为假手术组、UUO组和HGF组(UUO+HGF),分别于术后1、3、7、14 d观察各组肾组织病理改变,应用免疫组织化学方法检测各组肾组织中E-cd、FN、MMP-9的表达。结果与假手术组比较,UUO组及HGF组FN、MMP-9蛋白表达均增高,且UUO组明显高于HGF组;UUO组及HGF组E-cd表达均减少,且UUO组显著低于HGF组。结论 HGF可以通过调节肾组织E-cd、FN、MMP-9的表达,减轻肾小管-间质纤维化,而发挥肾保护作用。

ILK在微小病变型肾病大鼠模型中意义的研究

目的动态观察整合素连接激酶(ILK)在大鼠微小病变肾病模型中的表达变化,探讨其与肾小球疾病的关系。方法用一次性尾静脉注射盐酸阿霉素建立大鼠微小病变肾病模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,应用免疫荧光技术观察ILK在不同时间点模型大鼠肾组织的表达改变情况。结果两组各时间点24 h尿蛋白及血清白蛋白的变化比较均有统计学差异(P<0.01);第14、21、28天,模型组大鼠肾小球ILK表达荧光的形态计量均高于对照组(P<0.05)。模型组大鼠不同时间点肾小球中ILK的表达量与24 h尿蛋白量之间呈正相关(r=0.743,P<0.01)。结论ILK早期出现表达增加及分布异常,可能是导致蛋白尿的原因及判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标;在后期出现表达增加,可能是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。

以FSH受体的配体结合部位作为抗原进行主动免疫对大鼠生殖的影响

目的重组表达FSHR抗原主动免疫SD大鼠，探讨FSHR免疫抑制对大鼠卵巢功能的影响，以构建免疫异常导致的卵巢早衰（POF）大鼠模型。方法以FSHR分子N端配体受体结合区片段为靶位，制备重组抗原，同时针对免疫原性预测位点人工合成3段肽，以佐剂为对照，免疫大鼠，免疫后检测血清中的FSHR抗体滴度。在体外利用免疫荧光技术检测抗血清对卵丘复合体中FSHR的识别能力：并且研究FSHR主动免疫后卵巢对PMSG反应性的变化；检测血清FSH和雌激素水平，并与雄鼠交配，观察FSHR主动免疫对窝仔数的影响。结果主动免疫后血液中产生高滴度水平的抗体，在免疫周期后持续6周无明显下降。主动免疫产生的抗体可以与颗粒细胞特异性结合：同时，卵巢对促性腺激素的反应性降低。重组蛋白免疫组的大鼠动情周期紊乱，发情期缩短，血液FSH水平上升，而雌激素水平降低，与正常雄性交配窝仔数下降。结论人工制备大鼠的FSHR免疫原，主动免疫大鼠，导致大鼠血液出现高水平的FSHR抗体，可以与卵巢颗粒细胞上的FSHR特异结合，导致其对促性腺激素的反应性降低，进而引发大鼠出现卵巢早衰的症状。

hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4在大肠杆菌中的表达及纯化

目的:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达hCGβ-(CTP)_4、hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4融合蛋白,并对蛋白进行分离纯化。方法:将pBSMR-(CTP)_4中的(CTP)_4基因片断克隆入表达载体pET-28a(+),得到表达质粒pET-28a(+)-(CTP)_4。将PCR获得的补体C3d-P28 DNA序列以头尾串连的方式构建四聚体。将(C3d-P28)_4基因片断克隆入pBSMR-(CTP)_4,得到pBSMR-(CTP)_4-(C3d-P28)_4,进一步得到表达质粒pET-28a(+)*(CTP)_4-(C3d-P28)_4。将表达质粒pET-28a(+)-(CTP)_4和pET-28a(+)-(CTP)_4- (C3d-P28)_4分别转化入大肠杆菌BL21(DE3),表达融合蛋白hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4。采用Ni-NTA-resin和凝胶过滤方法纯化蛋白。结果:菌株经IPTG诱导后检测到目的基因的表达产物, SDS-PAGE和Western blot结果显示融合蛋白的分子量分别为27kD和40kD左右。结论:在BL21 (DE3)中成功表达了hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4融合蛋白,并确立了纯化方法,为进一步研究其免疫原性和应用于抗肿瘤疫苗奠定了基础。

移动单孢菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及表达

目的克隆与表达移动单孢菌(Zymomonas mobilis)丙酮酸脱羧酶(Pyruvate decarboxylase,PDC)基因。方法利用聚合酶链反应(PCR)技术从移动单孢的基因组DNA中扩增出PDCzm基因,构建其高效表达质粒,利用Ion和ompT蛋白酶缺陷株Escherichia coli BL21(DE3)进行表达。结果扩增出DNA碱基对数目约1.7 kb的PDCzm基因,成功构建其表达质粒pZM 22 b,对转化菌株的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)分析结果显示:该基因获得高效表达,表达蛋白占细胞总蛋白的37.9%。结论成功构建高效表达PDCzm基因的工程菌株,为实现利用PDCzm进行的生物转化奠定了基础。

基层医院感染管理工作存在的问题与对策

目的:分析基层医院医院感染管理存在的问题,正确指导基层医院预防和控制医院感染的措施和方法。方法:根据本地区医院感染管理质量控制中心制定的考核标准,对30家基层医院感染管理质量进行监督、检查,对检查中存在的问题提出改进措施。结果:基层医院医院感染管理工作形势化,医务人员对医院感染管理意识淡薄、知识缺乏,在许多环节上存在隐患。通过采取综合性控制措施,进行持续质量改进,在医院感染管理制度的建立、医院感染监测、消毒、灭菌、标准预防与手卫生、重点部门建设、医疗废物管理等方面有了很大的改善。结论:基层医院领导应转变观念,加大人、财、物投入,提高基层医院感染管理水平,预防和控制医院感染的发生。

县域医疗卫生共同体背景下石河子市慢性病患者共病现状及影响因素分析

目的:分析石河子市慢性病患者共病现状及影响因素,为县域医疗卫生共同体资源的合理配置和慢性病共病的精准防治提供数据支撑。方法:于2022年8月采用分层整群抽样方法筛选50996例慢性病患者作为研究对象,组间比较采用卡方检验、使用分层模型对慢性病患者共病现状的影响因素进行二分类logistic回归分析、采用网络分析法对共病模式的复杂性进行可视化分析。结果:慢性病患者中,共病患者13801例(27.1%),女性慢性病患者的共病风险高于男性(OR=1.081,P<0.001);随着年龄的增长,共病风险增加(OR=1.026,P<0.001);病程增加,共病风险降低(OR=0.936,P<0.001);农村慢性病患者的共病风险低于城市(OR=0.891,P<0.001);交互作用发现,随病程的延长,农村慢性病患者的共病风险高于城市(OR=1.124,P<0.001)。慢性病患者共病网络中,高血压节点加权度最高,对患其他慢性病的影响力最大;农村慢性病患者共病网络边数多于城市,网络直径小于城市。结论:石河子市慢性病患者共病现状较为严重,年龄、性别和病程是慢性病共病的重要危险因素,农村慢性病患者的共病风险随病程增加而高于城市,共病网络更加复杂。县域医疗卫生共同体内需优化各层级医疗卫生机构的资源结构并进行合理配置,以改善日益严峻的慢性病患者共病的防控形势。

E-钙粘素及相关蛋白的研究进展

E-钙粘素介导上皮细胞的同型相互作用,在形态发生、信号转导、细胞极性及组织细胞完整性的维持中起着重要作用。E-钙粘素介导的黏附功能紊乱将导致细胞间粘连松散,与肿瘤侵袭转移密切相关,与肾脏疾病的相关性也越来越受到重视。其相关蛋白在疾病的发生、发展过程中,也起了不可忽视的作用,现就E-钙粘素及相关蛋白的研究进展做一综述。

神经外科术后死亡病例死亡与手术间隔的影响因素分析及对策

目的:通过分析某医院神经外科术后死亡的76例病例死亡与手术间隔的相关影响因素,探讨降低术后死亡率的对策。方法:对2016-2019年某医院神经外科术后死亡的76例患者进行回顾性分析,找出病例特点及死亡与手术间隔的相关因素。结果:1.患者年龄、手术中出血量、术后感染和感染治疗时间、入院和死亡时CRP异常均与死亡和手术间隔有相关性(P<0.05);2.急诊手术术前占床时间过长(平均6.8小时)可能也是患者术后死亡的一项因素。结论:加强手术患者术前、术中和术后管理,控制术中出血量、预防术后感染可降低术后死亡率,同时降低术前占床时间也是降低神经外科手术死亡率的一个因素。

新疆生产建设兵团某医院医共体信息化建设实践

1引言紧密型县域医疗共同体(以下简称医共体)建设是整合县域医疗资源、提升县域诊疗能力、建立健全分级诊疗制度的有效形式,是国家政策导向,也是社会实践需求[1].在医共体运行过程中,信息系统的互联互通是医共体能够高效运作的必要条件.信息化先行,才能确保后续工作顺利开展,通过加强信息化建设,提供较为完整的信息服务,打通上下级、区域医疗机构之间的信息,实现"弯道超车".

践行兵团精神 蹚出医共体建设“石河子路径”

新疆维吾尔自治区石河子市位于天山北麓古尔班通古特沙漠南沿,因遍地干滩乱石而得名。过去这里风沙肆虐,鸟兽绝迹,经过中国人民解放军70多年的屯垦成边,昔日荒无人迹的砂石砾滩中,建起一座现代新城,从此兵团精神就像一粒种子,在这片土地上发芽、生根。如今,置身新时代,新疆生产建设兵团第八师石河子市医院管理者发扬“艰苦奋斗、开拓进取”的兵团精神,砺前行,不断推动石河子医疗卫生事业高质量发展,深入推进医共体建设,全面构建协同医疗服务网络,实现资源共享、优势互补、深度协作、共同发展的服务格局,全方位、全周期地保障石河子民众健康。