宫内发育迟缓对猪胎盘细胞增殖、凋亡及抗氧化基因和蛋白表达的影响

[目的]本试验旨在探讨宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)对猪胎盘细胞增殖、凋亡及抗氧化基因和蛋白表达的影响。[方法]从刚分娩的母猪中选择正常初生重(normal birth weight,NBW)和IUGR仔猪对应的胎盘各5个,分为对照组和宫内发育迟缓组。采用免疫组化法检测胎盘细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,采用TUNEL法检测胎盘细胞凋亡,采用荧光定量PCR检测胎盘NRF2、HO-1、NQO1、SOD1、SOD2、GCLC和GCLM基因的表达,用Westen blot(WB)检测胎盘抗氧化蛋白NRF2和HO-1的表达。[结果]对照组可以观察到较强的PCNA染色,宫内发育迟缓组PCNA染色较弱。IUGR组和对照组凋亡细胞指数分别为19.63%与12.56%,IUGR组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,与对照组相比,宫内发育迟缓猪胎盘NRF2、NQO1、SOD1、SOD2、GCLC、GCLM mRNA的表达量显著降低(P<0.05),HO-1 mRNA的表达在正常猪胎盘和宫内发育迟缓猪胎盘组间差异不显著(P>0.05)。WB结果显示,对照组与宫内发育迟缓组NRF2和HO-1蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。[结论]IUGR会降低猪胎盘细胞增殖,增加猪胎盘细胞凋亡且降低猪胎盘抗氧化基因的表达。

细胞自噬相关信号通路分子在猪卵巢黄体形成与退化过程中的表达

为了研究细胞自噬相关信号通路分子在猪卵巢黄体发育与退化过程中的表达,本试验以猪卵巢为对象,分别采集卵泡期卵巢(F)、早期黄体(E)、中期黄体(M)和晚期黄体(L),应用Western blot检测LC3-B、p-Akt、Akt、p-JAK2、JAK2、p-STAT3及STAT3的表达,应用免疫组织化学技术检测STAT3在卵巢中的细胞定位。Western blot结果显示,LC3-B在早期及中期黄体表达量较高(P<0.01);p-Akt在卵泡期卵巢的表达量高于黄体期(P<0.05),且黄体发育的不同时期差异不显著(P>0.05);p-JAK2在早期黄体表达量较高(P<0.05);p-STAT3在晚期黄体表达量显著升高(P<0.01)。Akt、JAK2与STAT3的表达量在整个卵巢周期无显著差异(P>0.05)。免疫组化结果显示,STAT3主要定位在猪卵巢卵泡的颗粒细胞、膜细胞和黄体的类固醇生成细胞中。结果表明,猪黄体细胞的自噬可能受多种信号通路的协同调控,为进一步研究黄体形成和退化的分子机制提供依据。