口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立

【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。

高校校园国防文化培育探索

随着时代的发展与国际国内形势的变化,国家安全问题更加错综复杂,高校国防文化教育的重要性凸显。北京科技大学经过多年探索与实践,构建了“一个核心,三个平台,三个抓手”高校校园国防文化培育模式,全方位、多要素提高大学生的使命与担当意识。

风电机组复杂工况下振动抑制模糊控制策略

复杂地形特定区域风力湍流强度大,风电机组频繁触发振动超限故障,执行停机保护,发电量损失严重。为了减少风电机组停机故障次数,提高风电机组运行稳定性,文章对风电机组特定地域、强湍流风等复杂工况下的运行特性进行分析,并基于模糊控制的理论,提出一种基于特定场址复杂工况下的振动抑制模糊控制方法。该方法通过建立振动识别算法进行振动工况分级,在此基础上基于模糊控制算法进行振动抑制,相较常规停机或分扇区控制,该模糊控制策略避免了机组频繁启停,保证了发电量,提升了机组运行稳定性。以3.x MW机组为研究对象,使用Bladed软件进行仿真分析,并在风电场进行实验验证,结果表明,采用该振动抑制模糊控制方法能使风机快速穿越特定地域、强湍流风等复杂工况,机舱前后加速度均方根最大值降低23.87%,有效提高了机组的可靠性。

PCOS不孕合并代谢综合征发生情况及其与促排卵结局的关系分析

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者合并代谢综合征(MS)发生情况及其与促排卵结局的关系。方法:选取2020年1月至2023年4月收治的PCOS不孕患者225例作为研究对象,统计MS的发生情况。根据患者是否发生MS分为MS组和非MS组,比较两组临床资料,并分析MS与促排卵结局的关系。结果:共纳入225例PCOS不孕患者,31例患者合并MS,占比为13.78%;MS组BMI(≥24kg/m^(2))、腰围(≥88cm)、收缩压(≥130mmHg)、舒张压(≥85mmHg)、FPG(≥126mg/dL)、TG(≥150mg/dL)、FINS、HOMA-IR水平高于非MS组,HDL-C(≥59mg/dL)水平低于非MS组(P<0.05);MS组排卵率、临床妊娠率低于非MS组(χ^(2)=6.745;χ^(2)=5.292,P<0.05);采用二元Logistic分析,年龄(≥30岁)、腰围(≥88cm)、MS(是)、FINS、HOMA-IR、雌二醇(E2)、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)均为影响PCOS不孕患者促排卵结局的独立危险因素(P<0.05)。结论:PCOS不孕患者MS发生率较高,其促排卵结局与MS具有一定的相关性,且促排卵结局受年龄、腰围、MS、FINS、HOMA-IR、E2、T、AMH等因素的影响。

妊娠期高血压患者血清ficolin-3、Angptl4水平变化及其临床意义

目的:探讨妊娠期高血压患者血清纤维蛋白胶凝素-3(ficolin-3)、血管生成素样蛋白4(Angptl4)水平变化及其临床意义。方法:选取2020年5月至2022年5月在本院接受治疗的102例妊娠期高血压患者作为观察组,根据患者病情,分为高血压组(37例)、轻度子痫前期组(42例)和重度子痫前期组(23例);另选取同一期间102名孕检健康孕妇作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清ficolin-3、Angptl4水平。采用Pearson相关系数分析血清ficolin-3与Angptl4的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线检测血清ficolin-3、Angptl4对妊娠期高血压的诊断价值;采用Logistic回归分析妊娠期高血压发生的危险因素。结果:与对照组比较,观察组血清ficolin-3、Angptl4水平均明显降低(P<0.05)。高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清ficolin-3、Angptl4水平逐步降低(P<0.05)。观察组患者血清ficolin-3与Angptl4呈正相关(r=0.527,P<0.001)。血清ficolin-3、Angptl4联合诊断妊娠期高血压的ROC曲线下面积(AUC)大于单独诊断的AUC(Z=2.595,P=0.009;Z=5.201,P<0.001)。与对照组比较,观察组血小板计数(PLT)明显降低,血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板聚集率(PagT)明显升高(P<0.05)。血清ficolin-3低表达、Angptl4低表达、PLT低水平、MPV高水平、PDW高水平、PagT高水平是妊娠期高血压发生的危险因素(P<0.05)。结论:妊娠期高血压患者血清ficolin-3、Angptl4水平均降低,且与妊娠期高血压病情严重程度相关,检测两者水平变化可对妊娠期高血压进行准确评价。

口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立

【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对206份已知血清型田间及实验室样品的符合率试验,O、A、AsiaⅠ型和阴性样本的符合率分别为92.45%、91.66%、92.75%、100%定型准确率94.58%。试剂盒在4℃下可保存6个月。【结论】本试验研发的口蹄疫病毒胶体金定型诊断试剂盒是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。

田间玉米茎秆往复切割试验台!

为了研究影响玉米茎秆切割力和切割功耗的诸因素,设计了田间玉米茎秆往复切割试验台。该试验台可以更换不同形状刀片,切割速度0~2.5 m/s可调,削切角0°~35°可调。通过试验得出的切割力随时间变化曲线求出切割功耗,并分析切割刀片形状、刀片开口角度、切割速度及削切角对切割力和切割功耗的影响。试验结果表明:该试验台数据采集误差不超过1.12%,最大切割力和切割功耗随着切割速度和切割角的增大而减小,锯齿刀的切割力比光滑刀的切割力小,削切角在20°左右时较其他角度的切割力小。

O型口蹄疫病毒免疫层析试纸条检测方法的建立

为建立一种快速、准确检测O型口蹄疫病毒(FMDV)抗原的胶体金免疫层析方法,将兔、豚鼠抗O型FM-DV多抗用DEAE-Sephose层析柱纯化。胶体金标记O型豚鼠口蹄疫抗体,形成金标探针并将其喷涂于玻璃纤维上。兔抗O型FMDV抗体和羊抗豚鼠IgG分别标记于硝酸纤维素膜上作为检测带和质控带,各部件按顺序装配形成快速诊断试纸条。如果待检样品中含有O型FMDV,它将与玻璃纤维上的胶体金探针和兔抗O型FMDV抗体形成夹心复合物,并在检测带被固定,沉集反应形成肉眼可见的红色条带。在田间试验中,53份试验样本分别用试纸条和反向间接血凝试验进行检测,2种方法的阳性率分别为95.45%和90.91%。评价试验证实,本研究建立的胶体金免疫层析方法简便、快速,具有良好的特异性和敏感性,非常适于基层兽医实验室诊断时使用。

检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用

目的:建立一种快速、简便的检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,用其标记纯化的AsiaⅠ型口蹄疫抗体后包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的AsiaI型口蹄疫抗体和纯化的羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜按顺序组装成胶体金快速诊断试纸条,通过系列实验验证其灵敏度、特异性、重复性及稳定性。结果:研制的AsiaⅠ型口蹄疫快速检测试纸条对AsiaⅠ型口蹄疫病毒的检测灵敏度为0.116mg/L,对阳性样品进行重复性试验3次检测结果完全相同。交叉反应证实该方法与其他血清型口蹄疫抗原和猪水疱病抗原(SVD)无交叉反应。检测田间样品,GICA与反向间接血凝的定型的符合率为96.87%。稳定性实验证实试纸条可保存12个月。结论:建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。

Internet/Intranet应用系统开发平台的研究与实现

构造企业级的Ｉｎｔｒａｎｅｔ平台是Ｉｎｔｅｒｎｅｔ应用的一个重要方面．本文以我们承担的８６３ 项目“Ｉｎｔｅｒｎｅｔ／Ｉｎｔｒａｎｅｔ应用系统开发平台”为背景，详细探讨了构造Ｉｎｔｒａｎｅｔ平台的关键技术和实现方案．

信息安全模型研究

随着网络技术迅速发展和不断应用 ,信息安全特别是网络安全成为人们研究的重点问题 .本文重点分析了一些典型的信息安全模型 ,采用形式化的安全模型开发方法 ,在构建信息安全系统中起到了重要作用 .考虑到在分布计算环境和移动计算环境的需求 。

一种虚拟私有网络的设计与实现

VPN技术是解决网络安全问题的一条有效途径·在分析了VPN技术的特点和IPSec规范原理的基础之上 ,提出了一种VPN系统设计模型·不同于一般VPN系统模型 ,该模型考虑了群组通讯和QoS的需求·着重讨论了具体实现中的Linux内核重构、密钥更新、基于策略的信息过滤以及QoS控制等关键技术·VPN产品能否被广泛接受主要取决于以下两点 :一是VPN方案能否以线路速度进行加密 ,否则将会产生瓶颈 ;二是能否调度和引导VPN的数据流到网络上的不同管理域·

基于波动方程的目标导向观测系统设计方法研究

本文提出了复杂构造地区的目标导向观测系统的设计方法.使用波动方程正演模拟来指导并在二维声波方程的一阶速度-应力方程中应用交错网格有限差分法实现.使用了四阶精度的差分算子和完全匹配层吸收边界条件.通过分析理论模型的模拟结果,展示了如何将地面地震响应与地下目标构造匹配.通过分析桥口地区实际地质模型的模拟结果,指出波动方程正演模拟在小断块、小背斜增生的复杂地区中相对于传统方法更精确,图像更清晰,更利于分析和指导观测系统设计.跟踪目标区的反射同相轴并得到其到达地面的接收范围来约束炮检距的范围,通过比较不同道距的模拟记录并综合考虑成本和任务目标来选取最佳道距.最终获得了实际效果达到设计要求的观测系统参数.

基于自适应遗传算法的风电机组变桨控制参数自寻优方法

当前,风力发电机组变桨系统采用传统PID参数整定方法,整定效率低、精确度和适应性差。为此,文章提出一种基于自适应遗传算法的风力发电机组变桨控制参数自寻优方法,包括变增益变桨PID参数自寻优和塔架加阻参数自寻优。其首先阐述了变桨控制系统基本原理;接着基于遗传算法根据风力发电机组不同机型对约束条件进行规划设计,涉及初始种群选择、自寻优算法约束及适应度函数设计;最后对传统参数整定方法与自寻优参数整定方法的响应曲线、仿真及现场运行结果进行对比分析。结果表明,相较传统方法整定的PID参数,自寻优变桨参数下发电机转速波动约降低10%,塔底My疲劳载荷约降低2%,对整定效率、精确度及适应性具有较好的改善效果。

口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳试纸条诊断方法的建立

为建立一种快速、简便、直观的口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳免疫层析的方法,作者选择2种不同颜色的单分散胶乳,将纯化的Asia 1/China/05流行毒株兔抗体制备蓝色免疫胶乳;将纯化的O/China/99流行毒株兔抗体制备红色免疫胶乳。将2种免疫胶乳分别喷涂于不同玻璃纤维上,晾干叠加制成彩色胶乳反应垫。再分别将纯化的Asia 1/YN/BSh/58/B和AV99(L)标准毒株的豚鼠抗体固定于同一硝酸纤维素膜的不同区域上作为2条检测带。最后组装成口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳试纸条。通过对阳性参考样品的检测,结果显示试纸条有很好的灵敏度,可检测到病毒含量为3.90×104 LD50;在检测与口蹄疫临床症状相似病原,如猪水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原时无交叉反应,特异性好;不同批次间、同一批次内的试纸条,在检测阴、阳性参考样品时,结果完全一致,说明试纸条重复性好;试纸条对检测已知血清型的74份田间样品的符合性试验中,O型、Asia 1型样品的阳性符合率分别为95.24%、96.30%,阴性样品符合率为100%。本试验研发的口蹄疫O、Asia 1分型彩色胶乳试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,而且可以通过不同颜色进行定型检测,适合国内流行的口蹄疫病原型别的分型检测。

一种集成的可伸缩的网络安全系统

常用的网络安全技术有防火墙、VPN(virtual private network)和NAT(network address translation)等,它们的作用各异.但现有的一些网络安全系统未能将上述技术有机地加以结合,不能很好地兼顾系统执行效率,对系统内部缺乏细粒度的安全管理.针对上述问题,提出了一种集成的可伸缩的网络安全系统——NEUSec(NEUsoft security system),它在Linux环境下将包过滤防火墙、VPN和NAT技术有机地融合在一起,结合NAT和代理服务技术组成了可伸缩的虚拟代理服务器,提出了基于改进型Radix树的安全策略查找机制,采用RBAC(role-based access control)技术解决了系统内部安全管理的问题.与其他安全系统相比,NEUSec是一个较为全面的、可伸缩的、兼顾效率的网络安全系统,在实际应用中取得了较好的效果.

不同年龄2型糖尿病患者维生素D水平与糖尿病周围神经病变的相关性

目的探讨不同年龄组2型糖尿病患者25-羟维生素D[25(OH)D]与糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral disease,DPN)的相关性。方法选取589例2型糖尿病患者进行横断面研究,按年龄将入组患者分为青年组(24~44岁)、中年组(45~64岁)、老年组(≥65岁),收集所有患者年龄、性别、病程、吸烟史、家族史、体重指数(BMI)、空腹血糖、空腹胰岛素、三酯甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(Hb A1c),25(OH)D等临床资料,根据密歇根神经病变评分系统(MNSI)结合神经电生理检查诊断DPN,并进行统计学分析。结果 3组之间性别、体重指数、吸烟史、家族史、Hb A1c、TG、LDL-C、空腹血糖、空腹胰岛素差异均无统计学意义(P>0.05)。25(OH)D水平随2型糖尿病患者年龄的增加逐渐下降。青、中年组非DPN患者25(OH)D水平均较DPN患者显著升高(P=0.013;P=0.043),老年组患者DPN与非DPN组之间25(OH)D水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。二元Logistic回归分析显示低25(OH)D为青、中年2型糖尿病患者DPN的危险因素,在老年患者中差异无统计学意义(P<0.05)。结论 25(OH)D是青中年2型糖尿病患者DPN的保护因素,由于25(OH)D在老年组DPN患者中水平较低,未发现维生素D对老年DPN患者存在保护作用。

新电子神话─Jini技术

Jim技术被誉为自Java技术推出以来的又一“电子神话”。着重讨论了Jini技术的技术背景、技术原理和应用前景。

一种虚拟私有网络模型的实现

VPNR求是解决网络安全问题的一条有效途径。在分析了VPN技术的特点和IPSec规范原理的基础之上，提出了一种VPN系统设计模型，不同于一般VPN系统模型，该模型考虑了群组通信和QoS的需求。同时，还着重讨论了具体实现中的Linux内核重构、密钥更新、基于策略的信息过滤以及QoS控制等关键技术。最后，对VPN技术的推广与应用提出了自己的看法。

基于mobile agent的动态自适应网络安全模型的研究

计算机网络的迅速发展和广泛应用,对信息安全特别是网络安全带来了新的挑战。传统的安全模型和单一的安全手段,已不能适应复杂的网络结构、多变的入侵手段所带来的困扰。作者通过对多种典型的安全模型和技术分析后认为,网络安全是一种动态的安全。基于上述认识,本文提出了一种基于mobile agent的动态自适应安全模型,并详细介绍了该模型的基本结构、控制策略和原型的实现。