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4种试剂盒提取病理组织切片中裂头蚴DNA效果的比较
被引量:
1
1
作者
蒙兴慧
陈艳
+3 位作者
李金福
胡月
刘巧霞
刘鉴
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期635-638,642,共5页
目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物...
目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物的亮度,评价4种市售商品试剂盒提取DNA的效果。结果 4种试剂盒提取裂头蚴有虫组织白片DNA的结果:试剂盒1提取DNA的浓度、纯度及提取率最高,提取成本也最高且耗时较短;试剂盒2的提取效果与试剂盒1相近,提取成本较低且时间最短;试剂盒3的提取效果介于试剂盒2与试剂盒4之间,成本最低但时间长达26h;试剂盒4提取效果最低,PCR产物条带也最暗,提取成本较低但耗时较长。4种试剂盒提取HE染色片DNA的结果:试剂盒1与试剂盒2提取的效果相近,两者成本较高耗时较短,试剂盒3与试剂盒4的提取效果相近,两者成本低耗时长,试剂盒3与试剂盒4的提取效果均低于试剂盒1和试剂盒2的提取效果。结论 4种商品试剂盒均能满足裂头蚴感染有虫组织的DNA提取,其中试剂盒2更适用于快速提取。
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关键词
猬裂头蚴
DNA提取
病理组织切片
商品试剂盒
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职称材料
虫种特异性基因检测小鼠无虫病理组织裂头蚴感染的可行性研究
被引量:
1
2
作者
胡月
陈艳
+3 位作者
李金福
蒙兴慧
刘巧霞
刘鉴
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期357-360,365,共5页
目的研究用细胞色素C氧化酶1基因(cox1)及内转录间隔区1(ITS-1)特异性序列检测小鼠无虫病理组织中裂头蚴感染的可行性。方法 6~8周龄昆明小鼠20只,采用随机抽签法分为感染组(15只)和未感染组(5只),感染组小鼠经口感染蛇源裂头蚴(5条/只)...
目的研究用细胞色素C氧化酶1基因(cox1)及内转录间隔区1(ITS-1)特异性序列检测小鼠无虫病理组织中裂头蚴感染的可行性。方法 6~8周龄昆明小鼠20只,采用随机抽签法分为感染组(15只)和未感染组(5只),感染组小鼠经口感染蛇源裂头蚴(5条/只),未感染组不作任何处理。感染后第14天剖杀小鼠,取感染组小鼠皮下含裂头蚴肌肉组织(含虫组织)、去除裂头蚴肌肉组织(无虫组织)及未感染组小鼠相应部位肌肉,制作组织切片,苏木精-伊红染色法(HE)染色后观察。用改良的蛋白酶K消化法提取未染色肌肉组织切片的DNA,PCR扩增cox1(2对引物,对应cox1-1和cox1-2片段)和ITS-1序列。选取从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1进行克隆并测序,与Gen Bank中猬裂头蚴序列(KJ418421、KF990161、GQ999947)进行比对。以猪囊尾蚴感染的小鼠肌肉组织同法制作切片并提取DNA,评价cox1和ITS-1 PCR扩增的特异性。结果感染组含虫组织DNA经1次PCR即可扩增出414 bp(cox1-1)、151 bp(cox1-2)、822 bp(ITS-1)的条带。感染组无虫组织DNA第1次PCR未扩增出条带,以第1次PCR产物为模板再次PCR,扩增出相同大小的3条条带。未感染组DNA第1次和第2次PCR均未扩增出条带。序列比对结果显示,从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1序列与KJ418421、KF990161、GQ999947序列的同源性分别为98.2%、99.1%、99.1%。猪囊尾蚴感染组织DNA没有扩增出条带。结论以cox1和ITS-1序列为靶序列进行重复PCR,能鉴定小鼠无虫病理组织裂头蚴感染。
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关键词
裂头蚴
无虫组织
基因检测
内转录间隔区1
细胞色素C氧化酶1
猬迭宫绦虫
原文传递
题名
4种试剂盒提取病理组织切片中裂头蚴DNA效果的比较
被引量:
1
1
作者
蒙兴慧
陈艳
李金福
胡月
刘巧霞
刘鉴
机构
贵州省教育厅贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期635-638,642,共5页
基金
贵州省科技厅社会发展攻关项目支助[黔科合SY字(2014)3024号]~~
文摘
目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物的亮度,评价4种市售商品试剂盒提取DNA的效果。结果 4种试剂盒提取裂头蚴有虫组织白片DNA的结果:试剂盒1提取DNA的浓度、纯度及提取率最高,提取成本也最高且耗时较短;试剂盒2的提取效果与试剂盒1相近,提取成本较低且时间最短;试剂盒3的提取效果介于试剂盒2与试剂盒4之间,成本最低但时间长达26h;试剂盒4提取效果最低,PCR产物条带也最暗,提取成本较低但耗时较长。4种试剂盒提取HE染色片DNA的结果:试剂盒1与试剂盒2提取的效果相近,两者成本较高耗时较短,试剂盒3与试剂盒4的提取效果相近,两者成本低耗时长,试剂盒3与试剂盒4的提取效果均低于试剂盒1和试剂盒2的提取效果。结论 4种商品试剂盒均能满足裂头蚴感染有虫组织的DNA提取,其中试剂盒2更适用于快速提取。
关键词
猬裂头蚴
DNA提取
病理组织切片
商品试剂盒
Keywords
plerocercoid
DNA extraction
histopathological slice
commercial kit
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
虫种特异性基因检测小鼠无虫病理组织裂头蚴感染的可行性研究
被引量:
1
2
作者
胡月
陈艳
李金福
蒙兴慧
刘巧霞
刘鉴
机构
贵州省教育厅贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期357-360,365,共5页
基金
贵州省科技厅社会发展攻关项目[黔科合SY字(2014)3024号]~~
文摘
目的研究用细胞色素C氧化酶1基因(cox1)及内转录间隔区1(ITS-1)特异性序列检测小鼠无虫病理组织中裂头蚴感染的可行性。方法 6~8周龄昆明小鼠20只,采用随机抽签法分为感染组(15只)和未感染组(5只),感染组小鼠经口感染蛇源裂头蚴(5条/只),未感染组不作任何处理。感染后第14天剖杀小鼠,取感染组小鼠皮下含裂头蚴肌肉组织(含虫组织)、去除裂头蚴肌肉组织(无虫组织)及未感染组小鼠相应部位肌肉,制作组织切片,苏木精-伊红染色法(HE)染色后观察。用改良的蛋白酶K消化法提取未染色肌肉组织切片的DNA,PCR扩增cox1(2对引物,对应cox1-1和cox1-2片段)和ITS-1序列。选取从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1进行克隆并测序,与Gen Bank中猬裂头蚴序列(KJ418421、KF990161、GQ999947)进行比对。以猪囊尾蚴感染的小鼠肌肉组织同法制作切片并提取DNA,评价cox1和ITS-1 PCR扩增的特异性。结果感染组含虫组织DNA经1次PCR即可扩增出414 bp(cox1-1)、151 bp(cox1-2)、822 bp(ITS-1)的条带。感染组无虫组织DNA第1次PCR未扩增出条带,以第1次PCR产物为模板再次PCR,扩增出相同大小的3条条带。未感染组DNA第1次和第2次PCR均未扩增出条带。序列比对结果显示,从感染组无虫组织DNA扩增的cox1-1序列与KJ418421、KF990161、GQ999947序列的同源性分别为98.2%、99.1%、99.1%。猪囊尾蚴感染组织DNA没有扩增出条带。结论以cox1和ITS-1序列为靶序列进行重复PCR,能鉴定小鼠无虫病理组织裂头蚴感染。
关键词
裂头蚴
无虫组织
基因检测
内转录间隔区1
细胞色素C氧化酶1
猬迭宫绦虫
Keywords
Plerocercoid
Worm-free tissue
Gene detection
Cytochrome C oxidase 1
Internaltranscribed spacer 1
Spirometra erinacei
分类号
R383.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
4种试剂盒提取病理组织切片中裂头蚴DNA效果的比较
蒙兴慧
陈艳
李金福
胡月
刘巧霞
刘鉴
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
下载PDF
职称材料
2
虫种特异性基因检测小鼠无虫病理组织裂头蚴感染的可行性研究
胡月
陈艳
李金福
蒙兴慧
刘巧霞
刘鉴
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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