贵州省荔波县黑猪品种资源保护与开发利用

近年来,贵州省荔波县内涌现出许多林下生态放养黑猪养殖场,由于受养殖技术水平不高、管理方式粗放、地方品种滥杂交等因素的影响,导致林下养殖经济效益不高,群众养殖积极性低迷,黑猪养殖产业逐步削弱,使荔波黑猪品种资源没有得到很好的保护和开发利用。为此,本文简述了荔波黑猪的体貌特征、生产性能、产业现状;分析了荔波黑猪品种资源开发的价值与优势;提出了加强荔波黑猪品种资源保护与开发利用的措施:强化政策扶持,加大保种和开发力度,加大宣传力度,提升特色养殖档次,持续推进科学饲养,以充分挖掘荔波黑猪品种资源开发和利用的价值,从而推进荔波黑猪养殖产业的发展和经济效益的提升。

贵州省荔波县生猪健康养殖技术要点

荔波县生猪养殖产业是现阶段增加脱贫群众收入的主要途径。做好生猪的饲养管理,切实提高生猪养殖的经济效益,是实施生猪养殖项目的最终目标。但荔波县受传统养殖观念的影响,当地的生猪养殖还存在着仔猪生长发育迟缓、存活率低、发病率高以及养殖环境污染等问题,影响到群众的生活生产,因此认真做好生猪的每一项管理工作至关重要。该文结合生猪饲养的实际情况,深度剖析荔波县生猪健康养殖技术要点,以期提高生猪养殖的效益,助力本地脱贫群众致富奔小康,为生猪养殖人员提供借鉴和参考。

香猪睾丸间质细胞 TAS 1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响

旨在探究 TAS1 R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头,采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中,利用qRT-PCR检测其对 TAS 1R3基因表达影响,运用qRT-PCR和Western blot检测 TAS1 R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1 ) 、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、 BECN1 和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响。结果表明,当 TAS 1R3基因被干扰后,相较于shRNA-NC对照组, TAS 1R1、 ERK 1、 ERK 2、 mTOR 基因mRNA表达量均极显著降低( P <0.01),自噬因子 BECN1 和 MAP 1LC3B表达量极显著升高( P <0.01)。Western blot结果表明当 TAS 1R3基因被干扰后,与 shRNA-NC 对照组相比,蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低( P <0.01),而自噬蛋白 Beclin 1 表达量极显著升高( P <0.01)。本试验通过将 TAS 1R3基因干扰载体转染至睾丸间质细胞,发现当 TAS 1R3基因被干扰后可通过影响 mTOR 基因的表达,调控其下游自噬因子的表达,提示 TAS 1R3基因与睾丸间质细胞的自噬密切相关,这为进一步研究 TAS 1R3基因通过调节自噬影响香猪生殖活动提供了借鉴。

3β-HSD在初情期从江香猪附睾中的特异性表达模式

3β-羟基甾脱氢酶(3β-HSD)特异性表达于从江香猪的附睾组织中,并且在初情期时表达量最高。而目前对3β-HSD在初情期附睾不同区段的研究未被报道,因此本实验以香猪不同区段的附睾组织作为实验对象,通过使用免疫组织化学(IHC)与蛋白质免疫印迹(WB)分析3β-HSD在初情期香猪附睾5个区段(Ⅰ-Ⅴ区)的具体表达位置和表达量。IHC结果显示3β-HSD定位于香猪附睾的5个区段,且主要定位于附睾管上皮周围的平滑肌、管腔内附睾液及管腔微绒毛中。WB结果显示3β-HSD在Ⅳ区的表达量最高,并且显著高于Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区及Ⅴ区。此外,Ⅲ区的表达量显著高于Ⅰ区,但3β-HSD在Ⅰ区、Ⅱ区和Ⅴ区的各组之间并无统计学差异。综上,本研究发现3β-HSD在初情期香猪附睾定位于附睾管管周平滑肌、管腔内附睾液及管腔微绒毛,表达量以Ⅳ区最高,并且以区段特异性表达。

从江香猪附睾发育中凋亡相关因子Caspase-3的表达模式

细胞凋亡可及时清除机体内多余和受损伤的细胞,以维持组织器官的稳定性。为探讨凋亡过程在公猪附睾发育过程中发挥的潜在作用,本实验以从江香猪为研究对象,利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)、免疫组织化学(IHC)和WesternBlot技术分析了附睾15d(初情前期)、30d(初情期)、60d(初情后期)和180 d(性成熟期)4个时期凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2的差异表达模式。qRTPCR结果显示:Casp3和Bax基因mRNA在从江香猪60d表达量最高,Casp3在15d表达量最低,15d和180 d差异不显著;Bax在180 d表达量最低,且15 d、60 d和180 d差异不显著;Bcl-2在60 d表达量最低,在15 d表达量最高,4个日龄段差异显著。免疫组化结果显示:Caspase-3蛋白在30 d主要表达在附睾管腔的微绒毛,而在180 d主要表达在管腔中的精子上。Western Blot结果显示:Caspase-3蛋白表达丰度依次为60 d>30 d>15 d>180 d,且各日龄段差异显著。综上,本实验发现不同日龄从江香猪附睾凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2表达具有差异性,这一变化可能与附睾不同时期上皮细胞层细胞、微绒毛和精子的凋亡相关基因蛋白的差异表达有关,推测附睾内的凋亡过程参与了附睾功能的生理调节。

谷氨酸通过T1R1/T1R3-ERK1/2通路调节香猪睾丸间质细胞自噬相关基因表达

【目的】探究L-谷氨酸刺激对香猪睾丸间质细胞自噬的影响,为进一步研究味觉受体T1R1/T1R3通过雷帕霉素靶蛋白(mTOR)调控下自噬对雄性生殖的影响提供理论依据。【方法】选取30日龄的健康从江香猪分离培养睾丸间质细胞,采用不同浓度L-谷氨酸刺激睾丸间质细胞T1R1/T1R3,探究激活T1R1/T1R3对睾丸间质细胞自噬相关基因(TAS1R1、TAS1R3、ERK1、ERK2、mTOR、Beclin 1和MAP1LC3B)表达的影响。【结果】从江香猪睾丸间质细胞在培养72~96 h增殖最快,于培养96 h时达对数生长期。10 mmol/L是L-谷氨酸刺激睾丸间质细胞味觉受体T1R1/T1R3的有效浓度。经10 mmol/L的L-谷氨酸刺激后,睾丸间质细胞的mTOR、ERK1和ERK2基因相对表达量极显著高于对照组(P<0.01,下同),而Beclin 1基因相对表达量极显著低于对照组,MAP1LC3B基因相对表达量显著低于对照组(P<0.05,下同);ERK1/2和p-S6K1蛋白相对表达量显著高于对照组,而Beclin 1蛋白相对表达量显著低于对照组。单丹磺尸酰胺(MDC)染色结果显示,经10 mmol/L的L-谷氨酸刺激后,睾丸间质细胞内的酸性自噬泡荧光强度明显低于对照组,表明胞内自噬受抑制。【结论】10 mmol/L的L-谷氨酸可激活从江香猪睾丸间质细胞T1R1/T1R3,且自噬相关基因TAS1R1、TAS1R3、ERK1、ERK2和mTOR及相关蛋白T1R1、T1R3、ERK1/2、p-S6K1和p-mTOR表达升高,而Beclin 1和MAP1LC3B基因及Beclin 1蛋白表达降低,故推测谷氨酸可通过激活味觉受体T1R1/T1R3参与雄性生殖自噬的负调控。

实施生态鸡短平快养殖项目的注意事项

文章结合脱贫攻坚和乡村振兴生产实践,从项目资金使用范围和投向、农户选择、鸡苗采购、鸡苗发放时间、养殖环境消毒、保健药配备、商品鸡销售方面阐述了实施生态鸡“短、平、快”养殖项目的注意事项。

T1R1和T1R3在从江香猪附睾发育中的表达模式

为研究味觉受体第一家族亚型1(T1R1)和3(T1R3)在从江香猪附睾发育过程中的表达模式,探讨味觉受体在哺乳动物雄性生殖机能中可能发挥的作用及潜在医学价值,本试验以从江香猪附睾组织为研究对象,分析附睾发育4个关键时期:初情前(15 d)、初情时(30 d)、初情后(60 d)和性成熟期(180 d)T1R1与T1R3的差异表达。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学(IHC)和Western blot检测两个味觉受体在不同日龄从江香猪附睾组织中转录、翻译水平的变化及其分布情况。RT-qPCR结果表明:TAS1R1与TAS1R3 mRNA在从江香猪附睾初情前(15 d)至性成熟期(180 d)表达量逐渐增加,且任意两个时期间差异极显著(P<0.01)。Western blot结果显示,T1R1/T1R3蛋白在180 d表达量最高,在15 d表达量最低,两者之间差异显著(P<0.05),平均表达丰度依次为180 d>30 d>60 d>15 d。IHC结果显示,T1R1和T1R3蛋白在各日龄组从江香猪附睾组织均有分布,其中T1R1蛋白主要在上皮细胞膜上,尤其是基细胞和窄细胞;而T1R3蛋白主要在微绒毛、环状空泡和精子呈强阳性表达。综上,本研究发现不同日龄从江香猪附睾的T1R1/T1R3表达从15 d逐渐增加,至性成熟达到峰值,这一表达变化与附睾上皮基细胞和窄细胞及微绒毛的T1R1/T1R3的差异表达有关,这些特殊的表达模式与附睾生理功能存在时间关联,故推测T1R1和T1R3参与附睾内精子成熟和储存的调节过程。

从江香猪生精上皮周期及睾丸发育的形态学分析

试验旨在探究初情期前后生精上皮周期差异及睾丸发育过程中的形态学变化。通过测定15、30、60和90 d睾丸相关指数,结合睾丸组织形态学特征,判断香猪初情期,划分从江香猪生精上皮周期。结果显示,30 d的睾丸指数较15 d极显著升高(P<0.01),睾丸重、长轴及短轴的增长率分别为298.05%、66.42%和65.45%,60和90 d两个阶段睾丸重增长率相对稳定。形态学观察表明,从江香猪30 d时生精小管出现游离精子,完成第一次生精并进入初情期;与15 d相比,30 d生精小管面积和生精上皮厚度极显著增加(P<0.01),增长率分别为136.12%和40.19%,在60和90 d均处于稳定增长状态。睾丸细胞数统计显示,日龄增加不影响支持细胞(setoli cells,SC)数量(P>0.05),而30 d生殖细胞数(germ cells,GC)较15 d极显著增加(P<0.01)。相关分析结果发现,生殖细胞数量增加与生精小管面积增大、生精上皮厚度变化之间呈明显正相关(r=0.994;0.96)。根据生殖细胞组合形式差异,将初情期前后生精上皮分为3和8个阶段。初情期前生殖细胞以第一次减数分裂前期为主,A、B型精原细胞、SC、初级精母细胞(primary spermatocyte,Ps)、前细线期(preleptotene,PI)、细线期(leptotene,L)等生殖细胞在初情期前后生精上皮中均存在,而圆形精子(round spermatids,R)、延伸精子(elongating spermatid,E)、精子细胞(spermatozoa,S)仅存在于初情期后的生精上皮。本研究结果表明,从江香猪30 d初情,睾丸发育以生殖细胞和生精小管面积的迅速增加为主,该结果对从江香猪早熟性状挖掘、种猪选育及开发利用等有重要的指导意义。

从江香猪附睾3β-HSD的年龄依赖性表达模式

选取从江香猪附睾组织作为试验对象,运用免疫组织化学检测结合Western blot分析3β-羟基甾脱氢酶(3β-HSD)在初情期前、初情期、初情期后、性成熟期4个发育时期从江香猪附睾中的表达情况,探究3β-HSD在哺乳动物附睾中发挥的生理作用.免疫组织化学检测显示,从江香猪附睾3β-HSD在4个发育时期均有分布,其表达主要集中在附睾管上皮周围的平滑肌和管腔微绒毛上.Western blot分析显示,初情期3β-HSD的表达量极显著高于初情期前、初情期后、性成熟期(P<0.01),而初情期前、初情期后、性成熟期的表达量两两之间并无统计学差异(P>0.05).以上结果表明,3β-HSD主要定位于从江香猪附睾平滑肌和微绒毛上,且呈年龄依赖性表达,初情期的表达量最高,推测3β-HSD参与了初情期附睾功能的调节.

贵阳市散养奶牛牛奶中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为了解贵阳市散养奶牛牛奶中沙门氏菌的污染及耐药情况,采集散养奶牛牛奶样本26份,运用细菌分离培养技术对样本进行细菌分离;PCR鉴定后测序;细菌药敏试验。结果:共分离鉴定沙门氏菌3株,分离率为11.5%(3/26);3株沙门氏菌对庆大霉素(GEN)、卡那霉素(KAN)、阿莫西林(AMC)等耐药,对四环素(TET)、环丙沙星(CIP)、恩诺沙星(ENR)等较为敏感。

鲜味受体TAS1R1/TAS1R3对从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬及脂质代谢的调控研究

实验旨在研究鲜味受体(Taste Receptor Family 1 Subunit 1/Taste Receptor Family 1 Subunit 3,TAS1R1/TAS1R3)对从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬及脂质代谢的影响,为发掘从江香猪肉质优良性状的形成机制提供思路。实验通过构建TAS1R3 shRNA干扰载体,并转染至从江香猪前体脂肪细胞以干扰TAS1R1/TAS1R3的表达水平;通过添加低浓度(2.5 mmol/L)、中浓度(5 mmol/L)、高浓度(10 mmol/L)L-谷氨酸作用于细胞不同时间以激活鲜味受体TAS1R1/TAS1R3,用qRT-PCR检测自噬相关基因以及脂质代谢相关基因的表达水平。结果表明:构建的干扰载体可有效干扰细胞内TAS1R1/TAS1R3的mRNA表达水平(P<0.01);哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达水平下降(P<0.01),自噬关键因子微管相关蛋白1轻链3B (MAP1LC3B)和Beclin 1表达水平上升(P<0.01);脂质代谢相关基因神经肽Y (NPY)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)表达水平均下降(P<0.01),脂蛋白脂肪酶(LPL)表达水平上升(P<0.01);10 mmol/L L-谷氨酸处理细胞6 h后,细胞内TAS1R1/TAS1R3的mRNA表达水平升高(P <0.01),mTOR表达水平上调(P<0.05),MAP1LC3B和Beclin1的表达水平下降(P<0.01),NPY、ACACA的表达水平升高(P<0.05),LPL表达水平下降(P<0.01)。本研究表明TAS1R1/TAS1R3调节从江香猪肌内前体脂肪细胞自噬和脂质代谢过程,但这两个过程是否相关仍需后续研究。

荔波县生态畜牧产业助推乡村振兴

贵州省荔波县养殖业资源丰富、生态畜牧业发展前景广阔。全县有耕地面积32.5万亩,年产粮食作物5.38万吨,年产可利用农作物秸秆10万多吨;有天然草地面积130多万亩,天然牧草种类繁多,各类草场年鲜草产量91万多吨。这些得天独厚的条件,将让荔波县生态畜牧产业发展插上腾飞的翅膀。近年来,荔波县规模养殖场持续增加,生态畜牧产业品牌实力得到明显提升。

从江香猪公猪的生长发育规律及生长曲线拟合

为了解从江香猪公猪的生长发育规律,采用Logistic模型和Gompertz模型拟合了从江香猪公猪的生长曲线,分析其生长发育规律,比较了实际生长值与两种模型的估计值。结果表明:从江香猪公猪的绝对生长量和相对生长量分别在45日龄和90日龄出现了两个增重高峰;两种模型均能较好地拟合从江香猪公猪的生长过程,但综合拟合度(R^2)和残差平方和(RSE)得出Logistic模型比Gompertz模型更适合从江香猪公猪生长曲线拟合;Logistic模型生长曲线方程为W_t=35.460(1+18.476e^(-0.027)~t)^(-1),最大理论体重为35.460 kg,理论拐点体重为17.730 kg,理论拐点日龄为108日龄,最大日增重为0.239 kg。说明Logistic模型能更好地预测从江香猪生长发育情况。