续断种子方对少精子症模型小鼠精子发生的影响

目的:研究续断种子方促进少精子症模型小鼠精子发生的机制。方法:45只雄性小鼠随机选取10只作为对照组,另外35只腹腔注射环磷酰胺建立少精子症模型,造模成功后按照随机数字表法分为对照组、续断种子方组、维生素E组各10只。续断种子方组和维生素E组分别按人体等效剂量给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予生理盐水灌胃,8周后各组小鼠全部处死,用放免法检测睾酮水平;取一侧附睾做精子分析,另一侧睾丸切片行HE染色,计数生精上皮层次和间质细胞,TUNEL法检测生精细胞凋亡。结果:与对照组比较,模型组睾丸相对质量、精子质量、睾酮明显降低,生精细胞凋亡增多;与模型组比较,续断种子方组睾丸质量、精子质量、睾酮明显升高,生精细胞凋亡减少,差异有统计学意义。结论:续断种子方可通过改善精子发生的睾丸微环境,使间质细胞增多,分泌高水平睾酮,从而抑制生精上皮细胞凋亡,改善生精上皮环境,促进精子发生。

补肾活血类中药对少弱精子症模型生殖激素水平干预研究的系统评价

目的:系统评价补肾活血类中药对少弱精子症模型生殖激素水平的干预作用。方法:检索中国知网、重庆维普中文科技期刊数据库、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase和Cochrane Library,筛选补肾活血类中药干预少弱精子症模型的实验研究,制作资料提取表并实施资料提取,采用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具对纳入文献的研究方法学偏倚风险进行评估,并用RevMan5.3软件对结局指标进行Meta分析。结果:共纳入10个研究,研究对象为SD大鼠、KM小鼠和BALB/c小鼠,均为随机对照实验。Meta分析结果显示,与模型组比较,补肾活血类中药可在一定程度上降低卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)(SMD=0.14,95%CI[-0.13,0.41],P<0.00001)、黄体生成素(luteinizing hor-mone,LH)(SMD=-0.32,95%CI[-0.57,-0.08],P<0.00001)含量,提高睾酮(testosterone,T)(SMD=0.85,95%CI[0.61,1.08],P<0.00001)、雌二醇(estradiol,E2)(SMD=0.63,95%CI[0.07,1.20],P=0.003)、催乳素(prolactin,PRL)(SMD=0.36,95%CI[-0.27,0.99],P=0.006)含量。亚组分析结果显示,相较于模型组:补肾活血类中药低剂量组0.05~0.7 g/(kg·d)、中剂量组1~1.7 g/(kg·d)、高剂量组2~6 g/(kg·d)均可提高T含量,且差异均有统计学意义(P<0.05);补肾活血类中药高、中剂量组均可降低FSH、LH含量,且差异均有统计学意义(P<0.05);补肾活血类中药高剂量组可降低E2、PRL含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血类中药能够有效改善生殖激素水平,且存在一定的量效关系。但是受纳入文献数量与质量要素的限制,以上结论尚待相关高质量研究的验证。

从“疏肝和营”角度应用柴胡桂枝汤治疗早泄病的探析

精神心理因素是导致早泄的常见因素,故采取情志疗法是治疗早泄的重要手段。柴胡桂枝汤首载于《伤寒论》,由小柴胡汤与桂枝汤两方合半而成,具有疏肝和营之功效。刘渡舟教授指出柴胡桂枝汤可用于治疗神经官能证(中医称为“肝气不疏”)。临床上运用柴胡桂枝汤治疗早泄取得了较好的疗效。针对早泄病的病因病机,借用柴胡桂枝汤“疏肝和营”功效,进一步探讨其治疗肝气郁结型早泄病的机理,发现其作用机制为疏肝郁调气机、和营卫调气血。

基于Nrf2/HO-1通路的加味大黄虫庶虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的保护作用及与核因子NF-E2相关性因子(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的关系。方法:60只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分成假手术组、模型组、迈之灵组及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组。采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型。造模完成后,加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组分别给予浓度为0.6、1.2、2.4 g/ml的大黄蟅虫丸生药水冲剂灌胃,假手术组和模型组予以等量的生理盐水灌胃,迈之灵组则予54 mg/kg迈之灵片,以上各组灌胃体积均为1 ml/100 g,1次/d,持续8周。给药8周后全部处死以上各组大鼠,取出左侧附睾检测精子质量及观察局部显微超微结构的变化;Annexin V-FITC法检测左侧附睾生精细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测左侧附睾组织中Nrf2、HO-1的表达。结果:模型组中左侧附睾组织内发生明显病理损伤,各级生精细胞和精子数量重度减少,细胞结构部分破坏,溶酶体、线粒体、内质网、细胞核、细胞膜等部分亚细胞结构消失,而加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组中左侧附睾组织的病理损伤具有一定程度的改善。与模型组相比,加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组大鼠左侧附睾的精子浓度及活率显著增高(P<0.05)。与迈之灵组比较,加味大黄蟅虫颗粒高剂量组精子浓度及活率显著升高(P<0.05)。模型组中左侧附睾生精细胞凋亡率显著高于假手术组(P<0.05),加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组中生精细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05)。免疫组织化学法显示,模型组大鼠左侧附睾组织中Nrf2/HO-1棕黄色阳性表达呈散在排列,且细胞辉度低;而加味大黄蟅虫颗粒高剂量组、迈之灵组中棕黄色阳性表达的细胞辉度明显提升。结论:加味大黄蟅虫颗粒可以有效修复精索静脉曲张大鼠附睾组织的病理损伤,提高Nrf2/HO-1的蛋白表达,进而拮抗生精细胞的凋亡,为精子的发育成熟提供有利条件。

加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠的影响

目的探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠睾丸局部微环境及生精细胞凋亡基因表达的影响。方法采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型,按随机数字表法将60只SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、迈之灵组(迈之灵片54 mg/kg)及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组(生药水冲剂5.4、10.8、21.6 g/kg),每组10只,造模完成后4周开始给药,连续8周。运用精子计数板和彩色精子质量分析系统检测大鼠精液质量;透射电镜观察各组大鼠睾丸局部超微结构病理变化;Annexin V-FITC检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况;荧光定量PCR检测各组大鼠睾丸组织中凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9的表达。结果模型组睾丸组织多见未成熟的生精细胞,出现空泡变性,而加味大黄蟅虫颗粒组管腔内见大量成熟生精细胞,浆内可见大量的线粒体、高尔基体及精子。相较于模型组,加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组大鼠精子密度、活率增高(P<0.01),凋亡率降低(P<0.05,P<0.01),凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型诱导的大鼠睾丸组织损伤具有保护作用,从而改善睾丸局部微环境,为精子的发育成熟提供有利条件,这可能与其有效调控生精细胞凋亡基因表达有关。

加味大黄[庶虫]虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠精子线粒体结构的影响

目的:探索加味大黄[庶虫]虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠精子线粒体结构的影响。方法:40只雄性大鼠随机选出10只作为假手术组,剩余30按照Turner方法制造左侧精索静脉曲张模型大鼠,造模完成后,按照随机数字表法分为加味大黄[庶虫]虫颗粒组、模型组、迈之灵组,每组各10只。加味大黄[庶虫]虫颗粒组给予加味大黄[庶虫]虫颗粒灌胃;迈之灵组予迈之灵片,假手术组和模型组分别予等剂量0.9%生理盐水灌胃。8周后处死所有大鼠,取出左侧睾丸组织,完成精液质量分析、睾丸组织病理检测。结果:灌胃8周后,加味大黄[庶虫]虫颗粒组精子浓度、总活率、前向运动精子、精子直线速度(VSL)、精子曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、精子头侧摆幅度(ALH),明显高于模型组(P<0.05)。模型组睾丸组织病理报告生精小管管腔空化,各级生精细胞破坏严重,精子膜结构破坏,精子线粒体肿胀、溶解。而加味大黄[庶虫]虫颗粒组中睾丸组织的病理损伤得到不同程度的改善,精子线粒体结构完整,形态大小规则。结论:加味大黄[庶虫]虫颗粒在一定程度上修复精索静脉曲张大鼠睾丸组织的病理损伤,进而起到保护精子线粒体结构与功能的作用,为精子的发育、活动提供稳定的能量代谢环境,有助提高精子活力及增加受精能力。

益气活血类中药对精索静脉曲张动物模型生精细胞凋亡干预作用实验研究的Meta分析

目的:系统评价益气活血类中药对精索静脉曲张动物模型生精细胞凋亡的干预作用。方法:检索中国知网、重庆维普中文科技期刊数据库、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase和Cochrane Library,筛选益气活血类中药干预精索静脉曲张动物模型的实验研究。采用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具对纳入文献的研究方法学偏倚风险进行评估,并用RevMan 5.3软件对结局指标进行Meta分析。结果:共纳入15项研究,研究对象为SD大鼠或Wistar大鼠,均为随机对照实验。Meta分析结果显示,与模型组比较,益气活血类中药可提高精子密度[SMD=2.63,95%CI(1.95,3.32),P<0.000 01]、精子活率[SMD=2.38,95%CI(1.87,2.88),P<0.000 01]、精子活力[SMD=2.88,95%CI(2.38,3.38),P<0.000 01]、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)[SMD=1.29,95%CI(1.02,1.57),P<0.000 01]表达水平,降低凋亡因子(Fas)[SMD=-0.90,95%CI(-1.26,-0.54),P<0.000 01]、凋亡因子配体(FasL)[SMD=-2.74,95%CI(-3.55,-1.94),P<0.000 01]、凋亡指数(AI)[SMD=-1.53,95%CI(-1.88,-1.19),P<0.000 01]含量,改善模型动物Johnson评分[SMD=0.46,95%CI(-1.35,2.26),P=0.01]。与模型组比较,益气活血类中药高剂量组(1.4~2.4 g/mL)、中剂量组(1.0~1.2 g/mL)、低剂量组(0.5~0.7 g/mL)均可提高精子密度、精子活率、精子活力,降低FasL含量,差异均有统计学意义(P<0.05);益气活血类中药中、高剂量组可上调Bcl-2表达水平,降低Fas、FasL表达水平,下调AI,改善Johnson评分,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血类中药能够有效提高精索静脉曲张大鼠模型的精子密度、精子活率、精子活力、Bcl-2表达水平,并降低Fas、FasL、AI,改善Johnson评分,且存在一定的量效关系。然而受纳入文献质量与数量因素的影响,以上论断有待相关高质量研究予以进一步验证。

王权胜应用大黄[庶虫]虫丸治疗青少年精索静脉曲张经验

基于《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治第六》,探讨大黄[庶虫]虫丸治疗青少年精索静脉曲张的方症适应、药证相对与临床疗效,认为其主要病因为“五劳虚极”“七伤”,以虚劳干血为病机,进一步得出治疗虚劳干血型青少年精索静脉曲张当祛瘀补虚并重,用之以通为补、缓中补虚、攻补兼施的大黄[庶虫]虫丸。基于王权胜教授前期研究与临床经验证实大黄[庶虫]虫丸可有效改善青少年精索静脉曲张患者生育能力。附验案两则。

经方大黄䗪虫丸在男科中的临证应用

精液液化异常、精索静脉曲张、慢性前列腺炎是男科常见的疾患,3种疾病虽各具特点,但病因病机却基本相同,因“虚”、因“瘀”或二者相互夹杂影响都会导致其的发生。故总的治疗原则为“缓中补虚、活血化瘀”,在临证中发现诸“虚”会影响疾病走向,虚久致瘀,瘀久致虚,造成病势缠绵反复,运用大黄■虫丸治疗男科类疾病,病情控制稳定不易反复,效果尚可,通过3则男科疾病的治疗,介绍大黄■虫丸在男科应用的临床经验。

基于Nrf2/HO-1通路研究续断种子方对少精子症模型大鼠睾丸氧化应激的效应

目的 探讨续断种子方对少精子症模型大鼠睾丸组织的保护作用机制及对生精细胞Nrf2/HO-1通路的影响。方法 从45只SPF级雄性SD大鼠中随机选取15只为模型组,剩下的随机分为空白组、左卡尼汀口服液组、续断种子方组各10只。除空白组大鼠外,其余组别的大鼠皆注射环磷酰胺建立少精子症模型。成功造模后,模型组及空白组大鼠予0.9%生理盐水灌胃,续断种子方组使用续断种子方免煎颗粒[9g生药量/(kg·d),浓度为1g/mL]溶于生理盐水中灌胃,左卡尼汀口服液组使用左卡尼汀口服液[75mg/(kg·d),浓度为5mg/mL]溶于生理盐水中灌胃,每日1次。给药8周后,将各组大鼠断颈处死,取出双侧睾丸、附睾,检测附睾精子质量,睾丸组织HE染色,光镜下观察形态学变化,电镜下观察超微结构的改变,荧光定量PCR检测睾丸组织中Nrf2/HO-1通路基因的表达,免疫组化法检验睾丸组织Nrf2及HO-1蛋白的表达。结果 续断种子方组能显著保护睾丸组织结构,明显提升少精子症模型大鼠附睾精子浓度和精子活动率(P<0.01)。相较于模型组,续断种子方组Nrf2、HO-1基因表达含量明显升高(P<0.01),免疫组化法蛋白表达显示续断种子方组睾丸组织Nrf2、HO-1棕黄色阳性表达的细胞明显增多,且灰度明显较高。结论 续断种子方能有效修复少精子症模型大鼠睾丸组织氧化应激损伤,保护睾丸组织结构,减少精原细胞凋亡,营造有益于精子发生的微环境,从而为精子的发生发育创造有利条件,这可能与调控Nrf2/HO-1通路的表达相关。