Caco-2细胞模型中头花蓼提取液对左氧氟沙星吸收的影响

目的探讨Caco-2细胞模型中头花蓼提取液对左氧氟沙星吸收的影响。方法取直肠腺癌Caco-2细胞,培养至屏障模型形成。以0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0 mg/mL的头花蓼提取液和5,10,20,40,80,160,320,640µmol/mL左氧氟沙星溶液分别作用Caco-2细胞24 h,采用细胞增殖检测法检测细胞活力。以筛选出的上述2种药液最大安全浓度分别及同时作用于Caco-2细胞1 h,采用超高效液相色谱串联质谱法检测细胞中头花蓼提取液所含没食子酸、原儿茶酸及左氧氟沙星的含量。结果头花蓼提取液和左氧氟沙星的最大安全浓度分别为1 mg/mL和160µmol/mL。两药合用时左氧氟沙星的细胞摄取量为(3.903±0.394)µg/g,显著少于其单用时的(5.895±0.663)µg/g(P<0.01);两药合用时没食子酸和原儿茶酸细胞摄取量分别为(0.076±0.015)µg/g和(0.060±0.008)µg/g,分别少于两药单用时的(0.094±0.022)µg/g和(0.074±0.018)µg/g,但无显著差异(P>0.05)。结论头花蓼提取液能显著减少左氧氟沙星在Caco-2细胞中的吸收,而左氧氟沙星对头花蓼提取液的吸收无显著影响。

UPLC-MS/MS同时测定云实皮中8种成分的含量

建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定云实皮药材中8种成分的含量,并结合化学模式识别方法对不同产地的云实皮药材进行质量评价。采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量1μL;质谱采用电喷雾离子源,负离子模式多反应监测进行定量分析;对多批次云实皮含量测定结果进行聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),评价其质量差异性。8种成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为96.85%~103.4%,RSD为0.52%~2.8%。定量测定结果显示各批次样品间存在一定差异,HCA和PCA 2种方法均把样品分为3类。该方法简便、灵敏、准确、高效,可用于云实皮药材的质量评价。

微透析结合UPLC-MS/MS研究黑骨藤中3个指标成分在大鼠体内的药代动力学

建立黑骨藤微透析样品的UPLC-MS/MS含量测定方法,并用于研究黑骨藤中3种活性成分在大鼠体内的药代动力学过程。采用浓度差法(增、减量法)考察灌流液流速、浓度对回收率的影响,分别收集不同时间点的血液微透析样品,通过UPLC-MS/MS分别测定3种指标性成分的浓度,体内实际药物浓度用体内回收率进行校正,并用WinNonlin 8.2软件进行数据处理,计算相关药代动力学参数。体外回收率研究中,增量法和减量法测得回收率与流速成反比,与浓度无关。3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸、5-O-咖啡酰基奎宁酸的药代动力学参数AUC_(0-t)分别为(23911.23±5679.67)、(16688.43±3448.45)、(9677.02±1606.74)min·μg·L^(-1),C_(max)分别为(170.66±58.02)、(121.61±48.14)、(69.69±18.23)μg·L^(-1)。建立的UPLC-MS/MS检测方法具有特异、快速、灵敏度高、定量准确的优点,能够同时测定微透析样品中3-O-咖啡酰基奎宁酸等3个指标成分的浓度,适用于黑骨藤在正常大鼠体内这3个指标成分的药代动力学研究。