去甲斑蝥素对人多发性骨髓瘤细胞株U266生长调控的影响及其机制的研究

目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对多发性骨髓瘤细胞株的增殖及其凋亡的影响及其可能的机制。方法四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethyl-2 thiahiazoyi)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,MTT]检测5、20、40、80、160μmol/L的NCTD对U266细胞增殖的影响;用流式细胞术检测不同浓度NCTD对细胞周期及细胞凋亡的影响,并应用半定量反转录聚合酶链反应检测survivin基因表达的变化。结果在20～160μmol/L的浓度内,NCTD对U266细胞的增殖有抑制,抑制与NCTD的浓度呈剂量依赖关系(P<0.05)。不同浓度的NCTD能诱导多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡,使细胞明显阻滞于G_2/M期;在NCTD作用下,U266细胞survivin及其机制可能与诱导凋亡、细胞周期阻滞有关。结论 NCTD能抑制U266细胞的增殖,并诱导其凋亡的机制可能与抑制survivin的表达及G_2/M期阻滞有关。

与白血病骨髓间充质干细胞共培养后K562细胞增殖与凋亡的变化

目的比较K562细胞与人白血病骨髓间充质干细胞（LMSC）共培养前后增殖和凋亡的变化。方法采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）分析法检测SCG和CCG组K562细胞光密度（OD）值,比较不同培养条件下K562细胞的增殖情况。采用流式细胞仪检测与LMSC共培养后K562细胞周期变化,Annexin V/聚酰亚胺（PI）荧光标记法检测血清饥饿后与LMSC共培养后K562细胞凋亡的变化。结果与LMSC共培养后,K562细胞的增殖受到明显抑制,CCG组OD值明显低于SCG组。流式细胞仪检测细胞周期发现,与LMSC共培养后,G0~G1期细胞比例明显增高,S期细胞比例明显下降,且G2~M期细胞比例也呈上升趋势;CCG＋0%FBS组K562细胞凋亡较SCG＋10%FBS组明显增多,较SCG＋0%FBS明显降低,LMSC有抵抗白血病细胞凋亡的作用。结论 LMSC通过阻滞G0~G1期K562细胞周期而发挥抑制增殖的作用,并能抑制血清饥饿诱导的K562细胞凋亡。

白血病骨髓间充质干细胞对K562细胞凋亡的影响

目的采用血清饥饿法诱导K562细胞凋亡,比较K562细胞与人白血病骨髓间充质干细胞(LMSC)共培养前后,K562细胞凋亡的变化,并进一步探讨其可能涉及到的信号转导通路(PI3K/Akt/Bad),为临床靶向治疗白血病提供依据。方法采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)荧光标记法检测血清饥饿后和与LMSC共培养后K562细胞凋亡的变化。蛋白印迹法检测与LMSC共培养后及加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002后,K562细胞中Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的变化。结果 10%胎牛血清(FBS)培养时,K562细胞凋亡率为(4.87±0.09)%,FBS饥饿培养24h后,K562细胞凋亡率为(10.14±0.50)%,较10%FBS培养明显升高(P<0.05)。与LMSC共培养后,K562细胞凋亡率为(7.15±0.06)%,细胞凋亡率较FBS饥饿培养下降(P<0.05)。进一步蛋白印迹法检测发现,K562细胞在单独悬浮培养条件下,即有Akt、p-Akt、Bad、p-Bad蛋白的表达;与LMSC共培养后,p-Akt、p-Bad的表达量显著升高(P<0.05),在共培养体系中加入PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt、p-Bad的表达量明显下降(P<0.05);而3组间Akt、Bad蛋白的表达量未见明显变化(P>0.05)。结论①LMSC能够抑制血清饥饿诱导的K562细胞凋亡。②其涉及到的信号转导通路可能为PI3K/Akt/Bad。③PI3K/Akt/Bad可作为白血病靶向治疗的新的作用靶点。

甘露聚糖肽联合奈达铂治疗肺癌性胸腔积液的疗效观察

胸腔积液是肺癌晚期常见的并发症，严重影响患者的生活质量和生存时间，控制胸腔积液对提高患者生存质量极为重要。2010年5月至2013年10月，我们采用甘露聚糖肽联合奈达铂胸腔内灌注治疗肺癌恶性胸腔积液取得良好疗效，现报告如下。

奈达铂与奥沙利铂热灌注治疗恶性腹腔积液的对比研究

目的 探讨奈达铂与奥沙利铂热灌注治疗恶性腹腔积液的临床效果.方法 将92例恶性腹腔积液患者随机分为两组,每组46例.对照组给予奥沙利铂热灌注治疗,观察组给予奈达铂热灌注治疗,对比两组治疗效果、不良反应发生情况、生活质量评分情况.结果 观察组治疗总有效率为71.1%,明显高于对照组的45.7%,不良反应发生率为17.4%,低于对照组的45.7%,差异显著（p〈0.05）;治疗后,观察组生活质量评分明显高于对照组,差异显著（p〈0.05）.结论 奈达铂热灌注治疗恶性腹腔积液的疗效确切,可有效控制积液水平,不良反应少,安全性高,对改善患者生活质量具有重要意义,优于奥沙利铂热灌注治疗.

去甲斑蝥素抗骨髓瘤作用及其机制研究

目的探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)抗骨髓瘤作用及其相关机制。方法 MTT法检测NCTD对人骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖的抑制作用,并观察其对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测核因子-κB(NF-κB)p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB抑制因子IkBα、磷酸化IkBα(p-IkBα)、IkB激酶α(IKKα)以及Survivin、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,分光光度法检测Caspase-3活性,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达。结果 NCTD抑制RPMI 8226细胞增殖,促进其凋亡;其剂量为20、40 mg/kg时对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为29.8%、53.5%。NCTD抑制胞核NF-κB p65、p-NF-κB p65以及胞浆p-IkBα、IKKα的表达,增加胞浆IkBα的表达,对胞浆NF-κB p65的表达无显著影响。NCTD还抑制Survivin、Bcl-2蛋白的表达,促进Bax的表达和RPMI 8226细胞Caspase-3的活化,Caspase-3抑制剂能部分拮抗NCTD引起的RPMI 8226细胞凋亡(P<0.05)。结论 NCTD对RPMI 8226细胞有抗增殖和促凋亡作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。

去甲斑蝥素通过NF—κB／IκBα途径增强阿霉素的抗骨髓瘤效应

目的研究去甲斑蝥素（NCTD）联合阿霉素（ADR）对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法以U266细胞为研究对象，采用NCTD（10μmol／L）和ADR（0．25μmol／L）单独或联合处理细胞，MTT法观察细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测核因子-κBP65（NF—κBP65）、磷酸化NF—κBP65（p-NF—κBP65）、NF—κB抑制因子IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、survivin、Bcl-2和Bax蛋白水平，免疫组化法测定血管内皮细胞生长因子（VEGF）水平。结果①NCTD能增强ADR的细胞毒和诱导凋亡作用，二者具有协同作用；②与ADR单药组比较，联合用药组胞核NF—κBP65和胞质P—IκBα的表达量分别由2．08±0．29和0．39±0．07降至0．48±0．08和0．02±0．01，胞质NF—κBP65和IκBα表达无变化；③联合用药组与ADR单药比较，survivin和Bcl-2的表达水平分别由0．31±0．05和0．23±0．05降至0．03±0．02和0．05±0．02，而Bax的表达由0．46±0．06升至0．62±0．08；④ADR组和联合用药组VEGF的阳性率分别为（44．6±4．4）％和（27．0±2．1）％，NCTD增强ADR对VEGF表达的抑制作用。结论NCTD通过抑制NF—κB／IκBα途径，调节下游信号分子survivin、Bel-2、Bax和VEGF的表达，增强ADR的抗骨髓瘤效应。

铂类药物腹腔热灌注化疗治疗恶性腹腔积液的现状与进展

恶性腹腔积液是恶性肿瘤引起液体在腹腔内异常潴留，常见于卵巢、结肠、胃、胰腺、乳腺、肺等部位的肿瘤。T3、T4期的胃癌患者大约有60％在根治术后会出现腹膜转移，10％-20％的患者在根治性切除时已有腹膜转移，8％～15％的结、直肠癌患者诊断时已经发生了腹膜转移。据统计以恶性腹腔积液起病的患者有20％没找到原发灶。

奈达铂与草酸铂腹腔热灌注治疗卵巢癌的效果比较

目的 观察奈达铂和草酸铂在腹腔热灌注治疗卵巢癌的效果和不良反应.方法 选取卵巢癌合并腹腔积液和术后及术后复发的患者57例,随机分为观察组32例和对照组25例.分别应用奈达铂和草酸铂热灌注治疗,即将奈达铂或草酸铂用体腔热灌注机加热到42～ 43℃,以一定速度灌注入腹腔.观察灌注治疗后的效果和不良反应.结果 两组近期效果比较：全部病例随访6个月以上,观察组腹水控制率为90.6％,其中CR 34.4％ （11/32）,PR 56.2％ （18/32）;对照组腹水控制率为68.0％,其中CR 16.0％ （4/25）,PR 52.0％（13/25）,观察组与对照组比较差异有统计学意义（x^2=39.36,P＜0.05）.观察组严重不良反应轻于对照组.结论 奈达铂用于腹腔热灌注治疗卵巢癌较草酸铂具有效果好,不良反应少的优点,可提高患者化疗的依从性和完成化疗周期.