基于心肌细胞能量代谢及钙稳态探讨附子作用机制

附子是中医临床常用的温阳药物,可用于治疗心阳虚证,但因其性味峻猛毒性剧烈而未广泛安全运用于临床,故探明其温心阳机制及其毒效关系可促进其安全有效用药。本文以阳气之温煦推动作用的相关机制为切入点,阐述了附子温心阳作用与改善能量代谢及调节钙稳态作用的关系,来探究附子温阳作用及其机制,以期为科学指导附子临床合理使用提供依据。

基于细胞线粒体能量代谢研究甘草次酸拮抗乌头碱的心肌毒性作用

目的从线粒体能量代谢角度研究甘草次酸对乌头碱的心肌细胞毒性拮抗作用。方法将大鼠心肌细胞H9c2细胞随机分为10组,即空白组、甘草次酸组、4个乌头碱组(乌头碱120、240、480、960μmol/L)、4个乌头碱配伍甘草次酸组(不同浓度乌头碱分别与60μmol/L甘草次酸配伍)。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同浓度给药组对H9c2细胞的影响;采用ELISA法测定各组细胞三磷酸腺苷(adenosine 5’-triphosphate,ATP)含量、ATP酶活性水平;采用活性氧探针(2,7-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位探针(5,5′6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide,JC-1)检测细胞内线粒体膜电位、钙离子荧光探针(rhod-2 acetoxymethyl ester,Rhod-2AM)检测细胞内钙离子浓度。结果与单用乌头碱比较,乌头碱配伍甘草次酸后心肌细胞的ATP含量、Ca^(2+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶、Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性升高,ROS含量减少,线粒体膜电位、线粒体内钙离子浓度降低(P<0.01或P<0.05)。结论甘草次酸可拮抗乌头碱的心肌细胞毒性,其机制可能是与保护心肌细胞线粒体、增强线粒体能量代谢、维持钙稳态有关。

人参白虎汤证发热大鼠模型的实验研究

目的采用大黄芒硝汤结合腹腔注射大肠杆菌内毒素(Lipopolysaccharides,LPS)复制发热模型,并对其免疫功能进行评价,为研究人参白虎汤解热机理提供发热动物模型。方法将Wistar雄性大鼠随机分为灌胃0、1、3、5、7 d组,分别使用大黄芒硝汤给予0、1、3、5、7 d的灌胃,末次灌胃后腹腔注射LPS。观察并记录大鼠的粪便状态与体温变化情况,检测粪便含水量、脾脏指数,并对血液样本进行血细胞计数,评价不同天数的大黄芒硝灌胃所致腹泻及对经LPS诱导发热的大鼠的体温、粪便含水量、脾脏指数以及血细胞数目的影响。结果与灌胃0 d组比较,灌胃1、3、5、7 d组大鼠粪便含水量升高;且血液中白细胞和中性粒细胞数增多,淋巴细胞数降低;另外脾脏指数也有所降低。其中灌胃5 d组的白细胞与中性粒细胞数与灌胃0、1、3、7 d组相比有显著增多,且灌胃5 d组模型升温最早,体温极值最大。结论灌胃苦寒性泻下中药大黄芒硝汤再结合腹腔注射化学药物LPS可成功建立符合人参白虎汤证的体虚高热模型,模型大鼠的体温、粪便含水量及免疫功能与大黄芒硝的灌胃天数密切相关;其中以灌胃5 d组所建立的腹泻发热大鼠模型为佳,该模型可用于人参白虎汤解热机理的研究。

金花茶与银杏叶的降脂作用研究

目的:研究金花茶、银杏叶单用及配伍对高脂饲料诱导的高脂模型大鼠体质量、脂肪指数、血脂水平以及肝脏的影响。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、金花茶组(给药剂量为0.053 g/kg)、银杏叶组(给药剂量为0.013 g/kg)、银杏叶+金花茶组(给药剂量为0.066 g/kg),空白组予以普通饲料喂养,其余各组均予以高脂饲料喂养40 d。饲养10 d后开始药物干预,灌胃体积均为1.0 ml/100 g,空白组与模型组给予同体积纯化水,给药时间为30 d。考察不同时期大鼠体质量与血脂水平的变化,检测大鼠脂肪指数、肝脏脂肪变性情况。结果:灌胃给予受试样品30 d,金花茶、银杏叶、金花茶+银杏叶均能控制高脂模型大鼠的体质量与脂肪指数,降低血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,还可不同程度地改善大鼠肝脏的脂肪变性,其中以银杏叶+金花茶组效果最佳。结论:金花茶与银杏叶单用及合用均有降脂和改善、预防脂肪肝的作用,且综合各项指标的检测结果,二者配合使用的降脂功效最优。