PEDV、TGEV和PoRV三重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种快速、敏感的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)三重PCR检测方法,根据GenBank登录的PEDV S基因、TGEV M基因和PoRV VP7基因参考序列,设计3对特异性引物,以克隆的质粒为模板,进行反应条件的优化以及特异性、敏感性试验。结果采用所建立的方法能够扩增出PEDV、TGEV和PoRV特异性片段,且不能检出PCV2、CSFV、PRRSV;对PEDV、TGEV和PoRV质粒模板的最低检测量分别为1×10~2拷贝/μL、1×100拷贝μL、1×10~3拷贝/μL;对10~2份临床病料进行检测,结果 PEDV、TGEV和PoRV的检出率分别为37.25%、1.96%和6.86%,与单项PCR检测结果进行比较,符合率均为100%。结果表明,所建立的三重PCR检测方法可为猪病毒性腹泻病的快速诊断及流行病学调查提供技术支持。

贵州省某野生动物园动物肠道寄生虫调查及其形态学观察

为了解贵州省某野生动物园内野生动物肠道寄生虫的感染情况,笔者采用饱和盐水漂浮法和沉淀法对该野生动物园的25种野生动物粪便进行了寄生虫卵的形态观察,并区分种类,统计了其感染率。结果显示,共检出4类寄生虫卵,分别为:线虫卵、球虫卵、绦虫卵和吸虫卵,总感染率为52%(13/25),以线虫、球虫感染较为突出。此次调查,为该野生动物园制定驱虫方案提供了科学依据,为贵州省野生动物寄生虫感染情况提供了基础数据。

贵州省某猪场体表脓肿病原菌的分离鉴定及药敏分析

为探明贵州省某猪场引起猪体表脓肿的原因,本研究对该猪场脓肿部位的脓汁进行细菌分离培养,并对分离所得的细菌进行革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验、16S rDNA序列分子分析及动物感染试验。结果显示,从脓汁中成功分离到了3株菌落形态不一的菌株,分别为金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、停乳链球菌类马亚种,根据分离地点和时间将其分别命名为GZGP2018-1、GZGP2018-2和GZGP2018-3;GZGP2018-1菌株与NCBI上金黄色葡萄球菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-2菌株与NCBI上化脓隐秘杆菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-3菌株与NCBI上停乳链球菌类马亚种的同源性高达100%;3株分离菌株对头孢拉定、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶和氟苯尼考较敏感,对青霉素类药物和红霉素耐药;3株分离菌株对试验小鼠均具有致死性。本研究为该猪场猪体表脓肿的发病原因、实验室诊断方法及日常防控提供了理论参考。

鸭肠炎病毒感染对鸭肠道菌群多样性的影响

为揭示鸭肠炎病毒(DEV)感染对鸭肠道菌群多样性的影响,本研究采用16S rRNA基因高通量测序和Illumina Hiseq 2500高通量测序技术对DEV感染后鸭肠道菌群多样性和丰度进行分析。结果显示:与对照组比较,感染组鸭肠道菌群Alpha多样性指数均呈先升高后降低趋势,尤其是在DEV感染96 h和120 h后,鸭肠道菌群Beta多样性(Weighted Unifrac指数)距离越远,相似度越低;DEV感染后鸭肠道优势菌群主要分布于厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门和梭杆菌门,梭菌纲、丙型变形菌纲、拟杆菌纲和梭杆菌纲,梭菌目、肠杆菌目、拟杆菌目和梭杆菌目,肠杆菌科、消化链球菌科、拟杆菌科和梭杆菌科,大肠杆菌志贺菌亚属、拟杆菌属、梭菌属和Turicibacter属,尤其是产气荚膜梭菌和坏死梭杆菌呈先下降后升高趋势,这可能与DEV感染所导致的肠道病变存在一定的关联性。本研究结果为DEV致病机理及其所致疾病的防控研究奠定了基础。

日粮精粗比对思南杂交肉牛育肥及屠宰性能的影响

为思南杂交肉牛的提质增效及增产增收提供技术支撑,选择12头12月龄左右的西×思×安杂交肉牛随机分4组,分别饲喂精粗比为3∶7(A组)、4∶6(B组)、5∶5(C组)、6∶4(D组)的日粮,经135 d育肥后进行屠宰性能测定,探明适合思南杂交肉牛的最适日粮精粗比。结果表明:总采食量、采食率、日采食量、眼肌面积、背膘厚指标均以精粗比为5∶5的日粮处理最高,均显著高于日粮精粗比为3∶7和4∶6的处理;精粗比为5∶5的平均增重、平均日增重及屠宰性能各指标均显著高于其他处理;精粗比为5∶5的料肉比显著低于精粗比为3∶7和4∶6的处理;其肉色评分、滴水损失率、蒸煮损失率及剪切力均最低;优质以上牛肉占比最高,达68.35%。日粮精粗比按5∶5组配最适于思南杂交肉牛的生长。

贵州中华蜜蜂养殖存在的问题及发展建议

为保障贵州中华蜜蜂养殖业健康可持续发展,通过对遵义市、安顺市、黔东南州等地区蜂场实地调研发现,多地存在盲目引种,导致贵州中华蜜蜂严重种间杂交、蜂群群势下降、采集能力降低、攻击力增强。提出贵州中华蜜蜂种质保护和利用措施,通过加强蜂农养蜂技术培训,杜绝外地引种,同时建立地方品种繁育基地,最终建立净化的贵州中华蜜蜂种群。

影响动物疫病防治的因素及对策探讨

我国是一个人口大国,对于肉类食品有着很高的市场需求,随着社会经济的快速发展,人们的日常生活水平得到了显著的提高,对于肉类食品的消耗也变得越来越多,因此,肉类食品安全的问题得到了社会各界的广泛关注。要保证肉类食品安全性,就必须加强我国的动物疫病防治工作。对动物疫病的防治工作进行研究,对影响动物疫病防治的因素进行分析,针对这些因素提出相应的防治手段和措施。

猪流行性腹泻病毒与链球菌混合感染的诊断

随着我国养殖业的规模化、集约化发展,猪病毒性腹泻已成为威胁我国养猪业发展的主要原因之一.猪病毒性腹泻的病因十分复杂,主要的病原有猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PoRV）和猪嵴病毒（PKV）.这4种病毒均能引起猪的肠道传染病,感染后主要表现为严重腹泻、呕吐、脱水和仔猪的高死亡率,各种年龄的猪均易感染,其中对哺乳仔猪的危害最为严重,发病率可达100%[1].这4种病原所致腹泻其临床症状和病理变化极其相似.此外,当前猪腹泻也多存在细菌感染,如大肠杆菌、链球菌、沙门氏菌和猪丹毒等感染所致,且存在混合感染的情况,单从临床上鉴别诊断较难,给养殖户专业技术人员用药增加难度 [2].

猪流行性腹泻研究进展

文章通过对猪流行性腹泻的发展史、病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防治进行概述,为猪流行性腹泻的科学防控提供参考。

贵州省PEDV与PoRV分子流行病学调查

为探明贵州省近几年引起猪病毒性腹泻两个主要病原PEDV与PoRV的变异情况,本研究对贵州省贵阳市、遵义市、安顺市、黔东南洲等5个地（州市）26个规模化养猪场采集了213份疑似腹泻的粪便样品,采用实验室建立的PEDV、TGEV和PoRV三重RT-PCR检出PEDV阳性的病料12份和PoRV阳性病料4份。根据GenBank登录的PEDV和PoRV基因序列,分别设计PEDV M基因和PoRV VP7基因特异性引物,扩增目的基因、克隆、测序和遗传进化分析。结果显示：成功克隆了12株PEDV M基因（681 bp）和4株PoRV的VP7基因（981 bp）,M基因核苷酸及推导的氨基酸同源性分别在98.1%～100%和98.2%～100%之间,与国内外参考毒株核苷酸及氨基酸同源性分别在97.4%～100%和97.3%～100%之间;VP7基因核苷酸及推导的氨基酸同源性分别为95.5%～99.7%和96.9%～99.7%,与国内外参考毒株核苷酸及氨基酸同源性分别为71.9%～95.1%和72.7%～99.1%。贵州省PEDV地方流行株与疫苗株CV777、Attenuated DR13亲缘关系较远,PoRV地方流行株与G4型毒株Gottfried、HeN4等属于同一群。结果表明,本研究从分子流行病学角度证实了贵州省PEDV和PoRV流行与变异情况,为贵州省PEDV和PoRV合理的防控措施提供参考依据。