形态动力学联合减数分裂纺锤体观测在卵裂期胚胎筛选中的应用

目的利用胚胎形态动力学联合卵母细胞减数分裂纺锤体(MS)观测,探索预测胚胎发育潜能的卵裂期胚胎筛选方法。方法回顾性分析2020年8月至2022年6月在苏州市立医院生殖与遗传中心行卵胞浆内单精子注射(ICSI),同时行卵母细胞MS观测和胚胎实时观测培养的46个周期患者的临床资料。根据卵母细胞MS形态、胚胎是否存在异常分裂方式,以及胚胎形态学差异对卵母细胞及卵裂期胚胎进行分类研究,分析胚胎形态动力学参数及MS形态预测胚胎发育潜能的价值,建立预测囊胚形成的早期胚胎分层筛选模型,并利用受试者工作特征(ROC)曲线探讨该模型的预测价值。结果MS正常组的囊胚形成率显著高于MS异常组(63.6%vs.46.9%,P<0.05);直接分裂(DC)1组的囊胚形成率显著低于DC2组和无DC组(5.0%vs.46.7%、63.9%,P<0.05);D3形态学优质胚胎的囊胚形成率显著高于D3形态学非优质胚胎(79.4%vs.24.6%,P<0.05)。采用多元Logistic回归分析发现,在D3形态学优质胚胎中,3细胞到5细胞的发育时间(cc3)、5细胞到8细胞的发育时间(s3)和MS形态对囊胚形成有预测价值(P<0.05);在D3形态学非优质胚胎中,卵裂球数目对囊胚形成有预测价值(P<0.05)。以此建立了D3胚胎分层筛选模型,共11级(A~K级),A级最优,K级最劣。该筛选模型对囊胚形成的ROC曲线显示,曲线下面积为0.857[95%CI(0.816,0.899),P=0.000]。结论采用胚胎形态动力学参数联合MS形态分析建立的D3胚胎分层筛选模型,对胚胎发育潜能具有较好的预测能力。

番茄U6启动子的克隆及CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立

【目的】从番茄中克隆高效转录的SlU6启动子,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,并在番茄中建立CRISPR/Cas9系统,为番茄功能基因组学和分子育种研究提供技术基础。【方法】采用PCR方法从‘中蔬四号’番茄品种中克隆4种SlU6启动子,利用Transfer PCR方法分别对4个启动子进行两种不同长度的截短,分别构建8个截短的SlU6启动子驱动GUS的植物融合表达载体。利用农杆菌瞬时转化法分别转染番茄叶片,通过GUS染色筛选出在番茄叶片中转录活性较高的SlU6-2启动子。采用DNA重组技术构建以SlU6-2为启动子驱动sg RNA,以番茄白粉病相关基因MLO1和EDR1为靶序列的CRISPR/Cas9基因组编辑载体。载体构建成功后,采用PEG法转化番茄原生质体,提取基因组DNA,采用酶切/PCR法分析内源基因突变情况;采用测序法分析内源基因突变的类型。利用突变位点频率分布图来验证番茄内源启动子在番茄CRISPR/Cas9系统中的有效性。【结果】经过两轮PCR,共获得4种8个不同长度的番茄U6启动子,其长度分别是452、202、448、206、433、190、448和218 bp,启动子序列比对分析发现番茄U6启动子与拟南芥U6启动子一样,也含有比较保守的两个元件,USE和TATA框。成功构建了8个SlU6启动子分别驱动GUS的植物融合表达载体。番茄叶片染色结果显示转化后的番茄叶片均被染成蓝色,表明克隆的番茄8个SlU6启动子均具有转录活性。选择SlU6-2P4为启动子驱动sg RNA,成功构建番茄白粉病相关基因MLO1和EDR1为靶序列的CRISPR/Cas9基因组编辑载体,验证结果表明番茄内源启动子SlU6-2P4能有效地驱动sg RNA的转录,并成功实现对番茄内源基因的编辑。内源基因突变的类型都为碱基替换,突变热点仅存在于内源基因靶序列区。【结论】成功克隆了4种在番茄叶片中高效转录的SlU6启动子;基于SlU6-2启动子的CRISPR/Cas9基因组编辑载体,在番茄中成功实现对内源基因的编辑。

偏振光显微镜分析人卵透明带与胚胎发育潜能的关系

目的:探讨IVF胚胎的发育潜能。方法:共对49个周期的267个卵子在ICSI前用偏振光显微镜下摄像进行透明带厚度(ZPT)和密度(ZPD)分析。结果:①年龄<37岁组与≥37岁组卵子比较,组间各层ZPD、ZPT及全层ZPT均无显著差异;②优质胚胎组卵子全层ZPT(15.96±2.21μm)显著低于劣质胚胎组(16.89±2.34μm),P<0.05;③妊娠组卵子内层ZPD(2.02±0.47nm)和全层ZPT(15.97±2.45μm)均低于未妊娠组(2.24±0.57nm)和未妊娠组(17.09±2.46μm),差异有统计学意义,P<0.05。结论:偏振光显微镜能够检测透明带厚度和密度,卵子透明带结构与胚胎质量及妊娠率有相关性,与年龄无关,偏振光显微镜测定卵子透明带结构可预测卵子及胚胎的发育潜能。

老年冠心病患者血清转铁蛋白水平与心电图QRS波时限及心功能分级的关系

目的观察老年冠心病患者血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平与心电图QRS波时限及心功能分级的关系。方法选取老年冠心病患者160例作为研究对象,根据临床表现进行纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级:Ⅰ级组42例,Ⅱ级组39例,Ⅲ级组41例,Ⅳ级组38例;选择同期60例健康体检者为对照组。分别检测所有研究对象血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平、血脂水平和QRS波时限;分析血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平与QRS波时限、心功能分级的相关性。结果与对照组比较,心功能Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.05),三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平差异无统计学意义(P>0.05),心功能Ⅳ级组TC水平明显高于心功能Ⅰ级组(P<0.05)。与对照组比较,心功能Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平均明显升高(P<0.05);心功能Ⅳ级组血清铁水平明显高于心功能Ⅰ级组(P<0.05);心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组血清铁蛋白水平均明显高于心功能Ⅰ级组,心功能Ⅳ级组血清铁蛋白水平均明显高于心功能Ⅱ、Ⅲ级组(P<0.05);心功能Ⅳ级组血清转铁蛋白水平>心功能Ⅲ级组>心功能Ⅱ级组>心功能Ⅰ级组(均P<0.05)。血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平与冠心病患者心电图QRS波时限呈正相关(r=0.325、0.475、0.853,均P<0.05),与冠心病患者心功能分级呈正相关(r=0.365、0.435、0.725,均P<0.05)。结论老年冠心病患者血清铁、铁蛋白、转铁蛋白水平显著升高,与心电图QRS波时限、心功能分级呈正相关,可能参与冠心病发生发展。

体表碎裂QRS波预测老年急性心肌梗死患者PCI后冠脉血流恢复及治疗结局

目的探讨体表碎裂QRS波(fQRS)对预测老年急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入(PCI)后冠脉血流恢复及治疗结局的价值。方法回顾性分析2016年10月至2019年10月完成手术治疗及获得随访的100例行PCI的老年急性心肌梗死患者的临床资料,患者入院后均给予12导联体表心电图检查,根据患者入院后3 d内心电图中有无fQRS,将其分为36例fQRS阳性组及64例fQRS阴性组。利用冠脉心肌梗死溶栓试验(TIMI)评估患者术后冠脉血流恢复情况;记录并对比术后再发心绞痛、再住院、心源性死亡等治疗不良结局情况;分析fQRS对预测老年急性心肌梗死患者PCI后冠脉血流恢复及治疗结局的价值。结果fQRS阳性组TIMI 0~1级高于fQRS阴性组,TIMI 2~3级低于fQRS阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);fQRS阳性组治疗不良结局发生率高于fQRS阴性组,差异有统计学意义(P<0.01)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,fQRS用于预测老年急性心肌梗死患者PCI后冠脉血流恢复、治疗结局的曲线下面积分别为0.844、0.751,预测价值较好。结论fQRS检测操作简单、费用低廉、容易获取,其对老年急性心肌梗死患者PCI后冠脉血流恢复及治疗结局具有较高的预测价值,可为未来老年急性心肌梗死的诊治提供重要参考依据。

广东传统金属工艺在首饰设计中的独特应用

广东拥有丰富的传统金属工艺,这些传统工艺在首饰设计领域中具有巨大的潜力和价值。通过对广东代表性的非遗金属工艺进行解读及案例分析,深入研究广东传统金属工艺在首饰设计中的创新应用和独特特色,有助于设计师、学者和行业从事者更好地了解广东传统金属工艺的潜力以及如何在首饰设计中实现其独特应用,有利于促进广东传统金属工艺的传承和发展,为首饰设计领域的未来发展提供新的灵感和方向。

缬沙坦分散片与雷公藤多甙在治疗78例糖尿病肾病蛋白尿中的效果分析

目的:探讨缬沙坦分散片联合雷公藤多甙治疗糖尿病患者肾病蛋白尿的疗效。方法:将糖尿病伴肾病蛋白尿的患者随机分成两组,对照组和观察组各98例。对照组服用缬沙坦分散片,观察组加载服用雷公藤多甙。比较两组患者的疗效差异,检测疗前及疗后24 h尿蛋白、尿白蛋白排泄率、尿β2微球蛋白含量。结果:治疗4周后,观察组疗效显著优于对照组差异有统计学意义(P<0.05);治疗4周后,两组患者的24 h尿蛋白、尿白蛋白排泄率、尿β2微球蛋白与疗前相比,均有不同程度的改善,差异具统计学意义(P<0.05);观察组各个指标的改善情况显著优于对照组,P<0.05。结论:缬沙坦联合雷公藤多苷能有效治疗糖尿病肾病,改善蛋白尿症状。

出现酷似急性心肌梗死心电图表现的颅脑损伤1例报告

临床上脑性假性心肌梗死的心电图表常见于中老年患者,且无明显的心电图动态演变过程.现报告1例患者如下.

原发性胆汁性肝硬化的治疗进展

原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,P B C)是一种以胆汁淤积为特点的慢性自身免疫性胆汁淤积性肝病,最终发展为肝硬化,门静脉高压及肝功能衰竭.临床无症状患者主要依靠肝功能碱性磷酸酶(alkaline phosphatase)异常及血清抗线粒体抗体(antimitochondrial antibody)阳性来诊断.熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid)是目前唯一被食品和药品管理局推荐用药,但并不是所有的患者均有效,因此布地奈德、贝特类、6-α乙基鹅去氧胆酸(obeticholic acid)、免疫抑制剂、肝移植等应该被考虑用于PBC的治疗.

基于PCR方法对载体pBluescript Ⅱ SK(＋)及pCAMB Ⅰ A1300的定点突变

运用PCR定点突变技术对载体p BluescriptⅡSK(+)以及植物表达载体p CAMBⅠA1300多克隆位点内相关的酶切位点进行改造,为运用CRISPR/Cas9基因编辑载体在构建敲除体系时提供更多便捷可用的酶切位点。通过酶切鉴定以及测序表明,成功将p BluescriptⅡSK(+)载体多克隆位点内XhoⅠ、EcoRⅤ、SmaⅠ、SacⅡ4个酶切位点,分别改造为NheⅠ、MfeⅠ、NsiⅠ、PacⅠ;将p CAMBⅠA1300植物表达载体多克隆位点内的SacⅠ、SalⅠ以2个酶切位点分别改造为NsiⅠ、PacⅠ,为今后构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体及对植物功能基因进行精准定位研究奠定一定的理论基础。

轻微型肝性脑病诊断的研究进展

轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)是指无明显临床症状和神经系统检查异常,但用精细的智力测验或神经电生理检查可发现异常.因其损害患者的工作、驾驶、记忆、认知等功能,且容易发展为显性肝性脑病,与非MHE患者相比病死率较高,因此需要积极筛查并干预MHE患者,提高肝硬化患者的生活质量,减少交通事故发生并减轻社会医疗负担.目前MHE的诊断方法主要包括精神量表(纸-笔测验、计算机测验及二者联合)、神经电生理检查、影像学检查.目前临床上对于MHE的诊断仍是一个挑战,需要进一步完善诊断标准和增强诊断的准确性.

番茄不同截短U3启动子的克隆及功能分析

从中蔬四号番茄品种中克隆能在番茄叶片中高效转录的SlU3启动子,为今后利用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行分子育种奠定了基础。采用2轮PCR的方法,第1轮PCR从中蔬四号番茄品种中克隆了3种SlU3启动子,再采用Transfer PCR方法分别对3个启动子进行截短,共得到6个不同长度的启动子,并分别构建6个截短的SlU3启动子驱动GUS融合植物表达载体,利用农杆菌转化法分别转染番茄叶片。运用DNAMAN软件对已克隆的SlU3和拟南芥AtU3启动子序列具有转录功能的必要元件进行序列分析;经过2轮PCR,首先从中蔬四号番茄品种中克隆了3种SlU3-1P、SlU3-3P、SlU3-4P启动子,其长度分别是1 156,1 114,1 147 bp,再采用Transfer PCR方法分别对3个启动子进行截短,共得到6个不同长度的启动子,其长度依次是489,318,450,248,457,248 bp,并分别构建6个截短SlU3启动子驱动GUS融合植物表达载体,启动子序列比对分析发现,番茄U3启动子与拟南芥U3启动子一样,也含有比较保守的2个元件,USE和TATA框,2个元件之间的位置比较固定。利用农杆菌转化法分别转染番茄叶片,结果显示,成功侵染后的番茄叶片均被染成蓝色,表明已克隆的6种不同截短番茄SlU3启动子均具有转录活性。成功克隆了6种在番茄叶片中高效转录的SlU3启动子,为构建番茄CRISPR/Cas9基因编辑载体提供更多高效的内源启动子。

Nogo蛋白在心血管疾病中的研究进展

Nogo家族是由Reticulon 4基因编码的蛋白质产物,主要包括Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C,研究证实其具有抑制神经轴突再生的作用。近年研究发现Nogo蛋白在心血管调控、细胞凋亡、抑制肿瘤生长等方面也具有重要作用。现就Nogo蛋白在心血管系统中的研究进展做一简要综述。

探讨拓展训练在大学体育教育中的运用

拓展训练是一种新型的教育方式,源自于西方,很早就作为培养成员的综合素质,增强队员间的团结的训练方法,被我国很多大公司采用。随着拓展训练的体系日益完善,项目多样,且大多向简单,易操作,参与度高等方面发展。作为新的学习模式,拓展训练也逐渐的引入到我国的大学体育教育体系中。它的引进打破了中国多年来的传统的教育模式,转换了学生与老师在教学上的主客体的地位,增加了学生学习的积极性,促进了我国教育改革的发展。虽然现阶段,还处于试验阶段,但是可以预见的是拓展训练在大学体育教育中的运用拥有光明的前景。

不确定性预期对我国居民消费与储蓄行为的影响

本文运用不确定性预期分析,揭示我国消费降低的原因在于未来收入不确定、未来支出不确定与未来流动性不确定,并说明了不确定性对利率政策效果的影响,最后提出了相应的解决方案。

《国际商务谈判》教学改革研究

调查研究发现,《国际商务谈判》的现行教学方法存在不少问题,必须进一步对《国际商务谈判》课程的教学目标、教学内容、教学方法、教材选用进行改革,并完善配套措施,才能切实提高该门课程的教学质量,实现该门课程的教学目标。

四川省交通基础设施建设对区域经济增长的影响研究

文章首先从投资乘数原理、区位可达性和生产要素流动等视角,分析交通基础设施建设对区域经济增长的影响机制。然后以协整理论为基础,选取四川省交通基础设施建设和四川省国内生产总值为变量,采用Granger因果检验法检验二者之间的因果关系,结果支持前述影响路径。为此应进一步强化四川省交通基础设施建设对经济增长的提升作用,并促成四川省交通设施建设与经济增长的良性互动。

跨国公司在华研发本地化带来的机遇与挑战

本文较为深刻地阐述了中国加入WTO后,跨国公司在华的研发本地化战略带来了巨大的机遇与挑战,并且,本文还对此提出了相应的应对措施,以期增加跨国公司研发本地化的溢出效益,减少它的不良影响.

基尼系数的缺陷与启示

文章根据分析和统计资料,论述了基尼系数存在的两大缺陷,其一是不能揭示内部收入不平等特征;其二是不能刻画收入差距扩大的路径。基于这两大缺陷,文章提出三点启示:首先应使用多种测度收入分配的指标全面考察收入分配状况,其次要考察社会各阶层收入比例的动态变化,最后是控制基尼系数的变化路径,提高社会总福利水平。