高三尖杉酯碱对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用。方法取对数生长期K562、Kasum-1细胞进行研究,分别用0、10、20、50 ng/ml的HHT处理。采用MTT检测相对细胞活力,计算24、48、72 h时细胞IC50,采用克隆形成实验检测检测细胞克隆数量,采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平,采用蛋白质印迹法检测Ras/Raf/MEK通路蛋白和凋亡相关蛋白相对水平。结果24、48、72 h时HHT对K562细胞IC50分别为80.69、65.28、50.76 ng/ml,HHT对Kasum-1细胞IC50分别为85.16、70.11、51.14 ng/ml。培养24、48、72 h时,10、20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于10 ng/ml,50 ng/ml HHT细胞存活率均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于0 ng/ml HHT;20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于10 ng/ml HHT、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HHT可抑制Ras/Raf/MEK通路活性,抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡。

恶性淋巴瘤nm23、CD44表达及其预后意义

目的 探讨 nm2 3、CD4 4在正常淋巴组织和不同恶性程度淋巴瘤中的表达及其预后意义。方法 采用免疫组化 Envision法检测 10 7例恶性淋巴瘤患者组织标本中 nm2 3、CD4 4蛋白的表达水平 ,以染色阳性细胞数应用四级半定量法评估阳性强度并分为高、低表达组。结果 ( 1)在正常淋巴组织中 nm2 3、CD4 4呈低水平表达。 ( 2 )随淋巴瘤恶性程度的提高 ,nm2 3和 CD4 4表达均增强 ( P<0 .0 1)。 ( 3) CR率在 nm2 3低表达组为 74 .5 % ,高表达组为 4 5 .2 % ;CD4 4低表达组为 6 7.2 % ,高表达组为 4 2 .9% ,差异均有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;两者均低表达组为 75 .6 % ,两者均高表达组为 4 0 .9% ,差异有显著性 ( P<0 .0 1)。 ( 4 ) nm2 3低表达组 1、3、5年生存率均高于高表达组 ( P<0 .0 1) ;CD4 4低表达组生存率也高于高表达组 ( P<0 .0 5 ) ;而两者均低表达组、一者高表达组及两者均高表达组间1、3、5年生存率呈下降趋势 ( P<0 .0 1)。结论 nm2 3、CD4 4表达水平不仅可反映淋巴瘤的恶性程度 。

一个可能的与人端粒结合因子相互作用蛋白Tara的分离和克隆

目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,并构建 p EGFP- C2真核表达载体 ;核苷酸测序和 Western blot验证目的基因序列和表达载体。结果 :从 TRF1免疫沉淀复合物中分离出了 Tara蛋白 ;人 c DNA文库中 PCR扩增所得产物为 1.7kb,与 Tara基因 CDS序列同源性为 99.9% ;GFP/ Tara融合蛋白约 10 0 k D,Tara在间期 He La细胞中弥散表达于胞浆 ,而有丝分裂细胞则定位于整个细胞。结论 :Tara是一个可能的 TRF1相互作用蛋白 ,其作用机制需进一步实验研究。

P38MAPK对变应性鼻炎患者外周血单核细胞IL-6及TNF-α的表达调控

目的探讨p38MAPK信号转导通路对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)中细胞因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的调控作用及p38MAPK与IL-6、TNF-α之间的相关性。方法变应性鼻炎(AR组)及正常者(正常组)各20例,分别从每位受试者的外周血中分离出单核细胞并分成3组培养。第1组为空白对照,第2组加入P38MAPK激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(phorbol12-myristate13-acetate,PMA),第3组同时加入PMA和P38MAPK特异性抑制剂SB203580,将单核细胞进行培养,westernblot法检测核蛋白P38MAPK的表达,RT-PCR法检测IL-6和TNF-α的表达,ELISA法检测上清液中的IL-6和TNF-α蛋白含量。结果加入PMA培养的AR组T单核细胞P38MAPK蛋白表达、IL-6和TNF-αmRNA的表达及培养上清液中的IL-6和TNF-α蛋白表达与空白对照组比较均明显增加(均p<0.01);且与加入PMA培养的正常T淋巴细胞组比较上述指标也均明显增加(均p<0.01);而同时加入PMA和SB203580培养的AR组单核巴细胞的上述指标与加入PMA培养的AR组比较明显降低,但与AR空白对照组比较仍有增加(均p<0.01)。单核细胞P38MAPK蛋白表达与IL-6和TNF-α的mRNA表达均存在正相关(均p<0.01),与培养上清液中的IL-6和TNF-α蛋白含量也均存在正相关(均p<0.01)。结论p38MAPK信号转导途径参与调节AR的单核细胞活化及IL-6、TNF-α的基因表达。

人端粒结合因子在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位与周期性表达的研究

目的 :研究人端粒结合因子 1(telomere repeatbinding factor 1,TRF1)在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位以及在细胞周期中的表达。方法 :应用分子克隆技术扩增 TRF1基因全长 (TRF1FL )和 N、C端缺失突变体(TRF1ΔNC)序列 ,并克隆入 p EGFP- C2真核表达载体 ,表达绿色荧光 (GFP)融合蛋白 ;将含目的基因质粒转染端粒酶阳性 Hela细胞和端粒酶阴性 WI38- 2 RA细胞 ,Western Blot验证目的蛋白分子量 ,荧光显微镜观察 TRF1在间期细胞和染色体的定位 ;利用药物阻断 He La细胞于不同周期 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,半定量 Western Blot检测 TRF1在不同细胞周期中的表达。结果 :TRF1FL、TRF1ΔNC序列长度分别为 1.3kb和 0 .9kb;GFP融合TRF1FL、TRF1ΔNC分子量大小分别为 80 k D和 6 0 k D。TRF1FL在间期细胞胞核内呈点状表达 ,在染色体则表达于染色体未端 ,TRF1ΔNC在细胞核内呈弥散性表达 ;TRF1在端粒酶阴性细胞中与早幼粒细胞白血病小体(promyelocytic leukemia body,PML )共定位 ,在端粒阳性细胞中则没有共定位。TRF1在 He La细胞中以 M期表达量最高 ,G1/ S表达最低 ,M期表达量是 G1/ S期的 3.9倍 (t=12 .92 ,P<0 .0 1)。结论 :TRF1在端粒酶阳性和阴性细胞中有不同的定位模式 ,在 He L a细胞中

急性巨核细胞白血病的免疫表型分析

目的探讨性巨核细胞白血病（ＡＭＫＬ）的免疫表型特点及意义。方法利用多种单克隆抗体对５例急性巨核心白血病患者的白血病细胞进行标记，应用间接免疫荧光技术或流式细胞术检测各单抗的表达率。２例通过电镜观察血小板过氧化物酶的表达。结果４／５例表达巨核系单抗，所有病例均不表达淋巴系相关单抗，但３例有髓系单抗的表达。ＨＬＡ－Ｄｒ、ＣＤ３４、ＣＤ３８也表达于不同的病例。结论ＡＭＫＬ可能起源于较早期的干细胞，具有“系列非专一性”的表型特点，这反映了白血病细胞的分化成熟水平。

恶性淋巴瘤nm23、CD44的表达及恶性度与疗效的关系

[目的]探讨nm23,CD44在不同恶性程度淋巴瘤中的表达规律及其与临床疗效的关系。[方法]应用免疫组化Envision法检测恶性淋巴瘤患者病变组织nm23_H1、CD44_V6蛋白的表达 ,根据染色阳性细胞数采用四级半定量法评估阳性反应强度并分为低表达和高表达两组。淋巴瘤的病理分类和恶性度分级按REAL标准。[结果](1)在正常淋巴组织中nm23、CD44呈低水平表达。(2)nm23在霍奇金病(HD)中表达低于非霍奇金淋巴瘤(NHL) ,差异有显著性(P<0.05) ;而CD44在两者间表达无显著性差异(P>0.05) ;在NHL中随REAL恶性度的提高 ,nm23和CD44表达均增强 ,差异有显著性(P<0.001)。(3)nm23低表达组CR率74.5 % ,高表达组45.3% ;CD44低表达组CR率67.2 % ,高表达组46.4% ,差异均有显著性(P<0.05)。[结论]nm23、CD44在正常淋巴组织和恶性淋巴瘤中具有不同的表达规律 ,其表达的强度可反映淋巴瘤的恶性程度 ;

下鼻甲骨折外移术治疗慢性肥厚性鼻炎

本文总结我科2004年6月N2007年10月所进行的46例下鼻甲部分切除术及50例下鼻甲骨折外移术治疗慢性肥厚性鼻炎患者的临床资料，术后随访6个月～1年，现报道如下。

鼻中隔矫正术后鼻腔硅胶管填塞的临床观察

目的探讨鼻中隔矫正术后鼻腔填塞硅胶管对术后反应的影响。方法对60例鼻中隔偏曲患者,分为观察组和对照组。手术结束时,观察组30例用硅胶管填塞鼻腔,对照组30例用凡士林纱条填塞鼻腔。观察比较两组患者的术后反应。结果硅胶管鼻腔填塞较凡士林纱条鼻腔填塞的术后不良反应明显减轻。结论硅胶管是鼻中隔矫正术后较为理想的鼻腔填塞物。

鼻咽癌的临床特点及误诊

鼻咽癌在中国的广东、广西、湖南等省的发病率较高,其中广东省最高。由于本病早期临床特征的不显著性和其部位的隐蔽性,故临床上易造成误诊。识别鼻咽癌的早期临床特点对早期治疗和预后非常重要。本院2004年2月～2007年12月鼻咽癌患者13例误诊,现将有关情况报道如下。

腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊结石合并胆总管结石与传统开腹手术临床对比分析

目的探讨腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊结石合并胆总管结石的安全性和有效性。方法对30例确诊的胆囊结石合并胆总管结石患者,分别通过微创手术和开腹手术进行治疗,比较两组患者的术中情况及术后恢复情况。结果所有患者均痊愈出院,腹腔镜组无中转开放手术患者。微创组患者术中失血量(76.3±12.4)ml,首次肠胃排气时间(2.1±1.2)小时,术后住院天数(7.5±2.9)天,均优于开腹组,差异有统计学意义。手术时间微创组(135.2±12.9)分钟,长于开腹组,差异无统计学意义。术后并发症情况:开腹组术后发生胆漏1例,残余结石1例,术后并发症发生率13.33%,微创组术后发生胰腺炎1例,胆道感染1例,术后并发症发生率为13.33%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。开腹组术后3天外周血免疫球蛋白IgG(13.93±1.98)g/L,PCT(215.32±145.21)mg/dL;微创组术后3天外周血免疫球蛋白IgG(9.23±2.87)g/L,PCT(76.8±23.7)mg/d,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论微创组患者术中失血量、首次肠胃排气时间、术后住院天数等方面均优于开腹组,差异有统计学意义。研究结果表明,腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊结石合并胆总管结石具有创伤小、围手术期安全性高、术后肠道恢复快、机体免疫反应轻、可以缩短住院时间的特点,具有临床实践推广价值。

对冲性双额叶脑损伤致中央型脑疝的诊治体会

目的 探讨对冲性双额叶脑损伤致中央型脑疝的临床特点、手术救治时机及方法. 方法 回顾性分析本院2005年1月至2011年12月,手术救治的对冲性双额叶脑挫伤致中央型脑疝的临床资料.本组男32例,女11例；年龄19～70岁,平均41岁.入院立即手术19例,观察后急诊手术24例.所有手术均采用开颅去骨瓣减压,其中26例为双侧去骨瓣减压,17例为单侧去骨瓣减压. 结果 恢复良好32例,遗留有癫痫2例,智力障碍3例,重残4例,死亡2例. 结论 重视中央型脑疝前期或间脑期临床表现,结合影像学特征性表现,及早应用开颅去骨瓣减压,可降低双额叶脑挫伤致中央型脑疝患者的死亡率和致残率,提高双额叶脑挫伤的治愈率.

Hs-CRP和CRP在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的临床研究

目的:观察血浆超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)和C-反应蛋白水平(CRP)与成人和儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的关系。方法:选取确诊的成人和儿童OSAHS患者各30例,分别在手术前1天和手术后1月对所有患者行清晨空腹抽取静脉血,检测血浆hs-CRP和CRP的水平,并对hs-CRP和CRP的变化情况进行术前、术后的观察。结果:成人组患者hs-CRP和CRP检测指标术后较术前明显降低,儿童组中严重患儿hs-CRP和CRP检测指标术后较术前明显降低,中度患者手术前后变化不明显。结论:hs-CRP和CRP可作为判断阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征愈后的指标。

异基因造血干细胞移植研究进展

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是治疗血液系统恶性肿瘤的重要手段,为恶性血液病患者的根治带来了希望。近年来,随着allo-HSCT研究不断推进,allo-HSCT的临床结局取得了长足的进步。allo-HSCT需根据患者个体差异选择适当的预处理方案和移植供者,防治allo-HSCT移植物抗宿主病(GVHD)和降低移植后疾病复发,将allo-HSCT与靶向治疗及免疫疗法相结合,可提高血液系统恶性肿瘤患者的临床疗效。本文就血液系统恶性肿瘤患者allo-HSCT预处理方案、供者选择、GVHD预防和移植后复发等问题作一述评。

鼻内窥镜下微波治疗常年性变应性鼻炎

目的 :探讨鼻内窥镜下微波治疗常年性变应性鼻炎的疗效。方法 :鼻内窥镜下对 36例常年性变应性鼻炎患者用微波治疗。结果 :随访 1年 ,显效 2 8例 ,有效 5例 ,无效 3例 ,总有效率 91.7%。结论 :鼻内窥镜下微波热凝治疗常年性变应性鼻炎损伤小 ,疗效高 。

非霍奇金淋巴瘤患者nm23蛋白检测的预后价值

[目的]探讨nm23基因蛋白在非霍奇金淋巴瘤中表达的临床预后价值。[方法]应用免疫组化EnVision法。[结果]nm23在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达强度与其恶性程度有关 ,呈正相关 (P<0.001)。nm23低水平表达组患者完全缓解率和1、3、5年生存率均明显高于高表达组 (P<0.01)。[结论]nm23表达水平反映了非霍奇金淋巴瘤的恶性程度 。

鼻内窥镜手术中处理病变中鼻甲的意义

目的 :研究功能性鼻内窥镜手术 (FESS)中对病变中鼻甲的处理。方法 :在 40例慢性鼻窦炎患者FESS中 ,对病变中鼻甲适当处理 ,并术后观察中鼻甲、筛窦术腔及上颌窦口开放情况。结果 :术后 6个月中鼻甲恢复正常 31例 ,发生粘连 9例 ;上颌窦口开放 33例 ,狭窄 7例 ,病变中鼻甲大多恢复正常。结论 :在FESS中 ,适当处理病变中鼻甲 。

高校图书馆的个性化服务研究

图书馆服务方式的转变，给高校图书馆的读者服务工作提出了新的要求。必须尊重读者的个性差异，开展多样化、多层次、高质量的个性化服务，才能适应时代的发展要求。