低频重复经颅磁刺激对BTBR T^(+)Itpr3^(tf)/J小鼠孤独症样行为的影响

目的探讨低频重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对BTBR T+Itpr3tf/J(BTBR)孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)模型鼠的作用及可能机制。方法 雄性BTBR小鼠和雄性B6小鼠分别随机分配到孤独症模型+1 Hz rTMS治疗组(BTBR+1 Hz组)、BTBR组、B6+1 Hz组、对照组(B6组),每组7只。6周大开始对BTBR+1 Hz组及B6+1 Hz组进行rTMS,对BTBR组及B6组进行假刺激,治疗周期(共12 d)结束次日起进行三箱社交、理毛、埋珠、旷场、悬尾及强迫游泳实验。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脑皮质及海马中白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-18(interleukin-18,IL-18)、白介素-23(interleukin-23,IL-23)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)水平。结果 BTBR组社交时间少,理毛时间及皮质IL-1β、IL-18、TNF-α和海马IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α、IFN-γ较B6组有统计学差异(P<0.05)。rTMS治疗后,BTBR+1 Hz组小鼠在三箱社交实验中社交偏好测试和社交新奇偏好测试处在陌生小鼠侧室时间比新物体[(237.60±40.80) s vs.(184.10±23.94) s, P=0.019]或熟悉小鼠[(196.80±61.17) s vs.(260.50±48.59) s, P=0.013]侧室时间更长,BTBR+1 Hz组与BTBR组相比,理毛实验中的理毛时间缩短[(33.35±7.74) s vs.(81.95±38.71) s, P=0.001],皮质IL-1β、IL-18和TNF-α降低(P<0.05),以及海马IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α和IFN-γ降低(P<0.05)。此外,所有BTBR小鼠埋珠数量较B6小鼠增多(P<0.01),1 Hz rTMS可以显著降低小鼠皮质IL-23、IFN-γ及海马IL-23水平(P<0.05)。结论 1 Hz rTMS可以改善BTBR小鼠的社交缺陷,减少刻板行为;其作用可能是通过降低皮质及海马异常增高的炎症反应实现的。

急性基底动脉闭塞血管内治疗患者炎症指标与预后的关联性研究

目的明确血液中常见炎症指标与急性基底动脉闭塞(BAO)患者血管内治疗(EVT)临床预后的关联。方法回顾性分析2018年1月至2021年6月于西安交通大学第二附属医院、南京大学医学院附属金陵医院及南京医科大学附属脑科医院前瞻性取栓数据库确诊为急性BAO所致脑梗死并于预计闭塞时间24 h内接受EVT的142例患者。不良预后定义为90 d mRS 3~6分。单因素分析预后良好与预后不良两组患者的一般资料、既往病史、实验室检查结果等差异。多因素Logistics回归分析炎症指标及炎性细胞比率对BAO后EVT患者预后的影响。结果与预后良好组相比,预后不良组的中性粒细胞计数[(9.3±3.9)×10^(9)/L vs.(7.1±4.0)×10^(9)/L,P=0.003)]、中性粒细胞与淋巴细胞比率(NLR)[9.9(5.7,16.0)vs.4.7(2.3,10.6),P<0.001]、血小板与淋巴细胞比率(PLR)[202.4(130.6~317.9)vs.147.4(10^(9).4~199.8),P=0.004]水平较高,淋巴细胞计数[1.0(0.7,1.4)×10^(9)/L vs.1.3(0.9,1.7)×10^(9)/L,P=0.009]较低。多因素回归分析结果显示,NLR(OR=1.216,95%CI:1.026~1.442)、PLR(OR=1.008,95%CI:1.001~1.015)是术后症状性出血的独立危险因素,NLR(OR=1.100,95%CI:1.015~1.192)和中性粒细胞计数(OR=1.137,95%CI:1.013~1.276)是90 d不良功能预后的独立危险因素。结论术前NLR、PLR或可预测急性BAO患者EVT术后症状性出血,NLR和中性粒细胞计数是术后90 d不良功能预后的独立危险因素。

血栓弹力图评价抗血小板药物疗效对颅内外动脉支架术后再狭窄的影响

目的分析血栓弹力图仪（TEG）检测颅内外动脉支架置人术（PTAS）后患者服用阿司匹林和氯吡格雷后血小板聚集的抑制率，了解其疗效对PTAS术后支架内再狭窄（ISR）的影响。方法收集颅内外动脉TAS术后因缺血性中风复发或者术后6～12个月常规行脑动脉数字减影血管造影（DSA）随访且行TEG检测的49例患者（64处病变血管）的临床资料。根据DsA结果分为ISR组和对照组（无ISk），比较两组间的各种血管病危险因素、血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平、花生四烯酸（AA）途径和腺苷二磷酸（ADP）受体途径诱导血小板抑制率间的差异，探讨影响ISR形成的因素。结果（1）卒中复发组与无复发组比较：复发组（男：女=1：5）与无复发组（男：女=39：4）组间性别组成的差异有统计学意义（P〈0．01）；复发组血清hs—CRP水平显著高于无复发组[（8．9±11．0）VS（2．9±4．1）mg／L，P〈0．05]；而其余各变量间差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）ISR兰且与对照组比较：ISR组患病年龄显著小于对照组[（58．0±12．8）VS（64．6±9．8）岁；P〈0．051；两组间糖尿病患者的比例差异具有统计学意义（P〈0．05）；ISR-C-R颅内外支架再狭窄比例（6／14VS8／14）与对照组（7／50VS43／50）间的差异有统计学意义（P〈0．05）；IS咄血清hs—CRP浓度显著高于对照组[（6．1±7．6）VS（2．1±2．1）mg／L，P=0．028]；ISR组AA和ADP平均抑制率分别为（58．0±43．8）％和（28．1±26．1）％，显著低于对照组的（83．4±23．1）％和（52．8±29．5）％（均P〈0．01）。（3）Logistic~归分析显示，在校正了其他因素的影响后，仅ADP抑制率（氯吡格雷疗效）与ISR的形成呈负相关（HR=0．959；95％C10．921～0．998；P：0．039）。结论氯吡格雷抗血小板聚集的疗效与ISR的形成呈负相关，即氯吡咯雷抵抗在ISR的形成中起非常重要的作用。

颅内外大动脉无狭窄患者发生后循环梗死的血管反应性评估

目的通过对患者大脑中动脉血管反应性(CVR)与椎动脉CVR的比较,评估颅内外大动脉无狭窄但发生后循环梗死(PCI)患者CVR,探讨前后循环血流动力学变化在预测PCI发生中的作用。方法选择PCI患者27例(PCI组),选择同期健康体检者25例(对照组)。采用经颅多普勒超声结合CO2吸入试验检测所有入选患者的大脑中动脉CVR和椎动脉CVR。结果与对照组比较,PCI组左侧和右侧大脑中动脉CVR明显下降[(25.96±15.90)%vs(34.63±8.60)%,(26.40±14.54)%vs(34.49±9.08)%,P<0.05];PCI组椎动脉CVR较对照组有下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。多变量线性回归分析显示,糖尿病是大脑中动脉CVR受损的独立危险因素(β=-0.116,P=0.035)。结论大脑中动脉CVR下降,而非椎动脉CVR下降,可作为颅内外大动脉无狭窄患者发生PCI预测指标。对于颅内外大动脉无明显狭窄的患者,糖尿病是大脑中动脉CVR降低的独立危险因素。

肾功能与急性缺血性卒中早期神经功能恶化和短期功能预后的关联研究

目的探讨肾功能水平与急性缺血性脑卒中患者早期神经功能恶化(END)和短期神经功能预后之间的相关性。方法连续纳入2017年9月至2019年9月南京医科大学附属脑科医院脑血管病救治中心收治的急性缺血性脑卒中患者403例。END定义为入院72 h内NIHSS得分增加≥2分。采用单因素Logistic回归、多因素Logistic回归和倾向性评分匹配(PSM)方法评估肾功能与END和短期功能预后之间的相关性。结果在研究纳入的403例患者中,89例(22.1%)发生了END。多因素Logistic分析和PSM结果显示,与肾小球滤过率(eGFR)≥90 ml/(min·1.73 m^(2))患者相比,eGFR<60 ml/(min·1.73 m^(2))患者有较高的END风险(多因素Logistic:OR=3.58,95%CI:1.55~8.31,P=0.003;PSM分析:OR=3.62,95%CI:1.18~11.13,P=0.025)。慢性肾脏疾病(CKD)患者的END风险比无CKD患者增高约2倍(多因素Logistic:OR=3.05,95%CI:1.35~6.88,P=0.007;PSM分析:OR=3.04,95%CI:1.02~9.10,P=0.046)。共388例患者完成3个月随访,其中预后不良72例(18.6%),预后良好316例(81.4%)。多因素回归分析与PSM结果显示,eGFR 60~89 ml/(min·1.73 m^(2))患者(多因素Logistic:OR=2.37,95%CI:1.07~5.22,P=0.033;PSM分析:OR=4.39,95%CI:1.45~13.28,P=0.009)和eGFR<60 ml/(min·1.73 m^(2))患者(多因素Logistic:OR=3.69,95%CI:1.23~11.07,P=0.020;PSM分析:OR=4.80,95%CI:1.02~22.61,P=0.047)的短期不良功能预后的风险显著高于eGFR≥90 ml/(min·1.73 m^(2))的患者。结论较低的基线eGFR与急性缺血性卒中患者的END和短期功能预后不良独立相关。

窖蛋白1对大鼠星形胶质细胞糖氧剥夺损伤的影响

目的探讨糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)对体外培养的大鼠星形胶质细胞窖蛋白1(caveolin-1,Cav-1)的影响。方法原代培养出生24h内SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,分为对照组和OGD组(给予星形胶质细胞6h的OGD和24h的再灌注损伤,建立OGD损伤模型)。用多重免疫荧光的方法检测星形胶质细胞Cav-1表达,实时荧光定量PCR和Western blot的方法检测星形胶质细胞Cav-1表达的变化。根据小干扰RNA(siRNA)的原理,将Cav-1siRNA转染星形胶质细胞,采用CCK-8的方法检测星形胶质细胞活力。结果大鼠大脑皮质星形胶质细胞Cav-1普遍表达。与对照组比较,OGD组星形胶质细胞Cav-1mRNA和蛋白表达量下降(P<0.05)。siRNA转染后,与对照组比较,OGD组星形胶质细胞活力下降(P<0.05)。结论 SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞Cav-1表达的下调,导致OGD后细胞损伤加重,提示Cav-1对星形胶质细胞具有保护作用。

黄芩苷对球囊拉伤后颈动脉粥样硬化的影响及其作用机制

目的探讨黄芩苷对新西兰大白兔颈动脉粥样硬化(AS)的影响及潜在的分子机制。方法健康雄性新西兰大白兔30只,随机分为5组:空白对照组(NC组)、安慰剂对照组(PC组)、阿托伐他汀治疗组(AT组)、黄芩苷预防组(BP组)和黄芩苷治疗组(BT组),每组6只。后4组均在高脂饮食后,进行右侧颈动脉球囊拉伤,构建AS模型。在第2周末和第10周末测定各组血脂水平。第10周末处死大白兔,采用实时荧光定量PCR及Western blot检测各组5-脂氧合酶(5-LO)、5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)和白三烯B4受体(BLTR)基因及蛋白水平表达变化,HE染色测量颈动脉内膜变化情况。结果与NC组比较,PC组TC、TG、LDL-C、5-LO、FLAP和BLTR mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05)。AT组、BP组和BT组较PC组TC、TG、LDL-C水平、内膜与中膜厚度比值(1.76±0.97,1.04±0.11,1.83±0.17 vs 2.54±0.18)及5-LO、FLAP和BLTR mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论黄芩苷可以通过调脂、抑制5-LO炎症途径,发挥抗AS的作用。

急性脑梗死合并脑白质疏松症患者血清CP、MBP、MCP-1与病情严重程度和预后的关系

目的:探究急性脑梗死(ACI)合并脑白质疏松症(LA)患者血清C肽(CP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平与病情严重程度和预后关系。方法:选取南京鼓楼医院集团宿迁医院于2021年3月至2023年3月期间收治的ACI合并LA患者117例作为观察组,根据根据LA严重程度分为重度组39例、中度组40例和轻度组38例。另选取同期体检健康人120例纳入对照组。检测血清CP、MBP、MCP-1水平。对ACI合并LA患者行6个月的随访。多因素Logistic回归分析ACI合并LA患者预后不良的影响因素。受试者特征曲线(ROC)分析血清CP、MBP和MCP-1对ACI合并LA患者预后的预测价值。结果:与对照组相比,观察组MBP、MCP-1更高,CP更低(P<0.05)。重度组血清CP显著低于轻度组和中度组,MBP、MCP-1水平显著高于轻度组和中度组;中度组血清CP显著低于轻度组,MBP、MCP-1水平显著高于轻度组(均P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组CP更低,MBP、MCP-1更高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示NIHSS评分升高、MBP升高、MCP-1升高是ACI合并LA患者预后不良的独立危险因素,CP升高是保护因素(P<0.05)。ROC分析结果显示CP、MBP和MCP-1联合预测ACI合并LA患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.916,高于CP、MBP和MCP-1单独预测。结论:ACI合并LA患者血清CP较健康群体更低,血清MBP、MCP-1水平较健康群体更高,且CP、MBP和MCP-1与患者病情程度存在密切联系。血清CP、MBP和MCP-1联合检测对ACI合并LA患者预后有较高预测价值。

导致丘脑性痴呆的内侧小脑幕硬脑膜动静脉瘘伴静脉窦血栓形成:4例挑战性诊断

目的探讨内侧小脑幕硬脑膜动静脉瘘(tentorial dural arteriovenous fistula,TDAVF)致丘脑性痴呆的影像学特征及诊断。方法回顾性收集2022年8至2023年9月在南京脑科医院确诊的4例内侧TDAVF患者的临床及影像学资料,并进行总结分析。结果4例患者均为男性,平均年龄67岁。认知功能减退时间从13 d到2个月不等,平均约1个月。简易精神状态检查量表评分平均13分,蒙特利尔认知评估量表评分平均15分,1例患者不能完成测试。MRI均表现为双侧丘脑肿胀,弥散加权成像和磁敏感加权成像(3例)示散在微出血灶,增强扫描示双侧丘脑呈斑片样或团块状强化。磁共振血管成像示直窦区异常血管影(4例),磁共振静脉成像示直窦不显影(4例)。磁共振波谱成像示神经元肿胀损伤(3例),胆碱峰无增高。动脉自旋标记灌注成像示病灶低灌注降低改变。数字减影血管造影均证实为TDAVF,且伴有直窦血栓形成。2例患者行栓塞术,术后记忆损害显著改善,1例行手术夹闭,另1例转至外院治疗。结论内侧TDAVF患者可表现为丘脑性痴呆。影像学检查显示典型双侧丘脑肿胀伴微出血,直窦不显影,以及早显的血管影。这些特征将有利于TDAVF的早期诊断。

中性粒细胞/淋巴细胞比值预测急性缺血性卒中患者的出血性转化

目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio, NLR)对急性缺血性卒中(acute ischemic stroke, AIS)患者出血性转化(hemorrhagic transformation, HT)的预测价值。方法连续纳入2015年12月至2020年12月期间南京医科大学附属南京脑科医院脑血管病救治中心收住的未进行静脉溶栓和机械血栓切除的AIS患者。收集患者临床、影像学和实验室检查资料。HT定义为AIS患者首次影像学检查未发现出血征象,但住院后影像学复查发现颅内出血。应用多变量logistic回归分析确定NLR与HT的独立相关性,应用受试者工作特征曲线分析NLR对HT的预测价值。结果共纳入805例AIS患者,中位年龄67岁(四分位数间距63~71岁),中位美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS)评分4分(四分位数间距2~9分),中位NLR为3.84(四分位数间距2.66~5.30),72例(8.9%)患者发生HT。HT组与无HT组年龄、基线收缩压、基线NIHSS评分、发病至入院时间、发病至采血时间、发病至影像学复查时间、NLR以及心房颤动、既往卒中和短暂性脑缺血发作史和卒中病因学分型的患者比例差异有统计学意义(P均<0.05)。多变量logistic回归分析显示,校正混杂因素后,NLR是AIS患者发生HT的独立危险因素(优势比1.355,95%置信区间1.099~1.672;P=0.005)。受试者工作特征曲线分析显示,NLR预测HT的曲线下面积为0.852,最佳截断值为4.75,其预测HT的敏感性和特异性分别为83.3%和71.8%。结论高NLR是AIS患者住院期间发生HT的独立危险因素,且对HT风险具有较好的预测价值。

脑小血管病患者的血管周围间隙扩大及其临床意义

目的探讨脑小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）患者血管周围间隙扩大（enlarged perivascular space，EPVS）及其临床意义。方法收集2011年10月至2012年2月在南京军区南京总医院住院的CSVD患者174例和非CSVD患者86例。所有患者均行头颅MRj检查（包括弥散加权成像和液体翻转衰减恢复序列），分析两组患者EPVS数量和解剖学分布，应用受试者工作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲线探讨其解剖学分布的诊断临界值。结果多变量logistic回归分析显示，基底节区EPVs（优势比1．491，95％可信区间1．165—1．909；P=0．002）和半卵圆中心EPVS（优势比1．279，95％可信区间1．022～1．601；P=0．032）与CSVD独立相关。CSVD患者基底节区和半卵圆中心EPVS均显著多于非CSVD患者（P均=0．001），其相应的CSVD诊断临界点分别为4个和6个，ROC曲线下面积以及诊断敏感性和特异性分别是0．859、72．4％、93．0％和0．808、65．5％、95．3％。结论EPVS有助于CSVD的诊断，采用EPVS诊断CSVD时需区分解剖学部位，并确立相应的诊断临界值。

急性缺血性脑血管病患者微出血分布模式与Essen卒中风险评分的相关性

目的 探讨急性缺血性脑血管病患者微出血（cerebral microbleed,CMB）分布模式与Essen卒中风险评分（Essen Stroke Risk Score,ESRS）的相关性.方法 病例选自南京卒中注册数据库,前瞻性连续纳入2011年4月至2011年12月期间住院治疗的急性脑梗死或短暂性脑缺血发作患者.对所有患者进行常规MRI序列和磁敏感加权成像扫描,登记基线资料并进行ESRS评分,分析ESRS评分与CMB分布部位之间的相关性.结果 共纳入急性脑梗死或短暂性脑缺血发作患者177例,其中CMB阳性77例（43.50％）,单纯脑叶CMB 16例,深部/幕停下CMB 61例.CMB阴性组、单纯脑叶组与深部/幕下CMB组之间年龄（F=5.420,P=0.005）、高血压（x2=13.069,P=0.00l）、卒中史（x2=7.696,P=0.021）、肌酐（F=4.127,P=0.018）、纤维蛋白原（F=3.863,P=0.023）以及ESRS评分（Z =21.008,P=0.000）存在显著性差异.多变量logistic回归分析显示,ESRS评分可独立预测深部/幕下CMB[优势比（odd ratio,OR）1.745,95％可信区间（confidence interval,CI）1.341 ～2.272;P=0.000],但与单纯脑叶CMB无显著独立相关性（OR1.050,95％ CI 0.692～1.591;P =0.819）.此外,血清纤维蛋白原水平与单纯脑叶CMB独立相关（OR2.374,95％ CI1.047 ～5.383;P=0.038）.结论 ESRS评分是急性缺血性脑血管病患者深部/幕下CMB发生的独立预测因素,而血清纤维蛋白原水平与脑叶CMB的发生独立相关.

缺血预处理脑血管内皮细胞分泌的外泌体对氧葡萄糖剥夺神经元的保护作用

目的:探讨缺血预处理(ischemic preconditioning, IPC)脑血管内皮细胞bEnd.3分泌的外泌体(exosome, Exo)对氧葡萄糖剥夺(oxygen and glucose deprivation, OGD)神经元的影响。方法:将bEnd.3暴露于OGD 3 h模拟体内IPC,复氧48 h后提取条件培养液中的外泌体(IPC Exo),采用蛋白质印迹分析和透射电镜方法进行鉴定Exo。将IPC Exo与原代培养的小鼠大脑皮质神经元共同孵育24 h,共聚焦显微镜观察Exo能否被原代培养的小鼠大脑皮质神经元摄取。将原代培养的小鼠大脑皮质神经元分为对照组、OGD组、OGD+IPC Exo(5μg/ml、10 μg/ml、20 μg/ml)组以及Sham OGD组(常氧条件培养的bEnd.3分泌的Exo进行处理),采用CCK-8和细胞存活/死亡检测试剂盒检测细胞活力。结果:透射电镜观察显示,bEnd.3培养液提取物呈现Exo典型形态,即直径30-100 nm的双凹圆盘状囊泡。蛋白质印迹分析显示,bEnd.3培养液提取物高度表达Exo标志物Alix和Tsg101。共聚焦显微镜观察显示,Exo可被原代培养的小鼠大脑皮质神经元摄取,摄取的Exo广泛分布于胞质和突触。与OGD组比较,加入10 μg/ml和20 μg/ml IPC Exo可显著提高神经元活力( P<0.05),而加入Sham Exo则无神经保护作用。 结论:IPC脑血管内皮细胞释放的Exo对OGD神经元具有保护作用。

脑梗死合并新型冠状病毒感染患者早期神经功能恶化的影响因素分析

目的探究影响脑梗死合并新型冠状病毒感染(COVID-19)患者早期神经功能恶化的相关因素。方法回顾性分析2022年12月15日至2023年1月15日在南京医科大学附属脑科医院收治的脑梗死合并COVID-19患者的临床资料,根据早期神经功能是否恶化分为进展组和非进展组,比较两组之间临床特征的差异。结果本研究共纳入56例符合入组标准的患者,其中进展组16例,非进展组40例。进展组年龄[(74.31±12.04)岁]高于非进展组[(67.18±8.15)岁](P<0.05),既往有冠心病史和糖尿病史的比例较非进展组更高(均P<0.05)。在实验室检查指标中,进展组的单核细胞计数、C反应蛋白、糖化血红蛋白、乳酸脱氢酶、肌红蛋白、白蛋白、D-二聚体、纤维蛋白降解产物明显高于非进展组(均P<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示C反应蛋白是脑梗死合并COVID-19的独立危险因素(OR=1.084,95%CI:1.002~1.173,P<0.05),ROC曲线下面积为0.825(95%CI:0.709~0.941,P<0.001)。结论脑梗死合并COVID-19早期神经功能恶化更容易发生于年龄较大、合并多种基础疾病、凝血和炎症指标异常的患者中,C反应蛋白增高具有良好的预测能力。