副溶血弧菌VP-5的分离鉴定及其与鲈鱼免疫信号通路相互关系研究

本文以染病鲈鱼为试验材料,对其肝脏的致病菌进行分离、纯化、鉴定,并分析了致病菌与鲈鱼免疫信号通路的相互关系。结果表明,经分离、纯化,从染病鲈鱼肝脏中得到一株菌株VP-5。VP-5呈球杆状、弧形,有单鞭毛,运动活跃,为革兰氏阴性菌,对酪氨酸、葡萄糖、甘露醇等反应阳性,对蔗糖、阿拉伯糖和棉子糖等反应阴性,其16S rRNA和TDH1基因序列与副溶血弧菌的亲缘关系非常接近。经综合鉴定,致病菌VP-5为副溶血弧菌。鲈鱼受到副溶血弧菌VP-5感染后,免疫信号通路基因CD63、CXCR4、IL-8在鲈鱼肝脏组织中12 h和24 h时的相对表达量与无菌生理盐水对照组(CK)相比差异显著(P<0.05);在表皮组织中24 h和36 h时的相对表达量与无菌生理盐水对照组(CK)相比差异显著(P<0.05)。证实鲈鱼肝脏组织免疫信号通路基因的表达与副溶血弧菌VP-5的感染正相关,相对于表皮组织反应更快。鲈鱼的免疫信号通路基因CD63、CXCR4、IL-8积极反应于致病菌,这些基因的快速表达会引发鲈鱼自身免疫应答,增强鲈鱼抵抗致病菌的能力。

彩叶桂盆栽管理技术

从品种选择、扦插育苗、上盆、栽后管理等方面进行介绍彩叶桂盆栽管理技术,以期为彩叶桂盆栽提供技术参考。

南洋臀纹粉蚧生物学特性及LAMP检测

【目的】明确南洋臀纹粉蚧Planococcus lilacinus生物学特性及实现对该虫的可视化检测。【方法】室内观察记录南洋臀纹粉蚧不同发育阶段的形态特征和历期及雌成虫的繁殖能力;以南洋臀纹粉蚧28S rDNA序列为靶标,设计其特异性的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物组用于建立相应的可视化检测方法,并进行特异性、灵敏度及稳定性验证。【结果】南洋臀纹粉蚧雌雄虫具有不同的世代生活史,卵初产时即可见虫体轮廓,并具1对暗红色单眼;1龄若虫行动活泼,雌雄难辨;2龄若虫体缘出现白色细蜡棒,雌雄体型出现分化;3龄若虫仅存在雌虫,形似雌成虫;蛹仅存在雄虫,分为预蛹期和蛹期;雌成虫体表覆盖厚实的白色蜡粉,体缘18对粗蜡棒突出明显;雄成虫有一对透明发达的前翅,腹部末端具1对白色长蜡丝。该虫卵历期(1.37±0.26)h,雌成虫历期(32.67±4.82)d,各龄若虫、蛹和雄成虫历期均不超过(7.65±0.82)d;两性生殖的单雌产卵量和卵孵化率分别为(531.92±69.98)粒和96.02%±1.35%,孤雌生殖的单雌产卵量和卵孵化率分别为(403.50±71.11)粒和88.41%±3.03%。建立的LAMP可视化检测方法能有效扩增南洋臀纹粉蚧DNA,最佳反应温度和时间及最低检测浓度分别为66℃、55 min和100 fg/μL,反应产物呈绿色阳性,检出率达91.67%~100.00%,但无法扩增其他7种近缘种属粉蚧DNA,反应产物呈橙黄色阴性。【结论】南洋臀纹粉蚧雌雄二型,生长发育快,繁殖力强,急需作好其检测与监测工作;该虫的LAMP可视化检测方法便捷高效、特异性强、灵敏度高且稳定性好,有望用于非专业鉴定人员对该虫的现场快速、准确识别。

榕管蓟马危害与寄主叶片结构及营养物质的关系

为明确榕管蓟马危害与寄主叶片结构及营养物质的关系,田间测定榕管蓟马对6种盆栽榕树的危害,室内检测它们的叶片切面结构和蛋白质及氨基酸等主要营养物质含量,并探讨两者间的相关性。结果表明:榕管蓟马对6种盆栽榕树的危害存在差异,分4个层次,第1层次的垂叶榕属高感品种,第2层次的花叶垂叶榕属易感品种,第3层次的榕树属低抗品种,第4层次的金叶榕、斑叶橡胶榕和黑叶橡胶榕均属高抗品种。6种盆栽榕树的叶片切面结构和主要营养物质含量存在显著差异,各检测指标值因品种不同有所改变,除上表皮厚度、栅栏组织细胞宽度之外的所有叶片切面结构指标和除甲硫氨酸之外的所有主要营养物质含量指标,均与榕管蓟马的危害指标存在显著或极显著的相关性;栅栏、海绵组织厚度越厚,栅海比越小,蛋白质、精氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和缬草氨酸的含量越低,其叶片抗蓟马危害的能力越强,这些指标是最主要的影响因子。上述结果表明:榕管蓟马危害与盆栽榕树品种有关,它们的叶片切面结构和主要营养物质含量均可影响榕管蓟马对寄主植物的锉吸危害。

榕管蓟马最嗜颜色筛选及粘虫色板田间诱集效果研究

为明确榕管蓟马Gynairothrips uzeli Zimmerman最嗜颜色及粘虫色板田间诱集效果,以垂叶榕种植基地为试验点,比较榕管蓟马对10种颜色的嗜好差异,测定粘虫板颜色与悬挂高度、颜色与悬挂密度对榕管蓟马的互作效应,查验3种偏嗜颜色-悬挂高度-悬挂密度组合粘虫板的田间诱集效果。结果表明:榕管蓟马最嗜颜色为黄色,其次为紫色和青色,对其他7种颜色的嗜好较弱;粘虫板颜色、悬挂高度和悬挂密度均极显著影响榕管蓟马诱集,颜色与悬挂高度、颜色与悬挂密度对榕管蓟马诱集存在显著的互作效应;黄、青、紫等3种偏嗜颜色粘虫板的悬挂高度均以色板底端高出垂叶榕顶部10 cm为佳,适宜悬挂密度则分别为4片/100 m2、5片/100 m2和5片/100 m2;3种偏嗜颜色-悬挂高度-悬挂密度组合中,黄色组合粘虫色板对榕管蓟马的田间诱集效果最好。

蓟马锉吸胁迫对垂叶榕叶片表面超微结构及其蛋白质和氨基酸含量的影响

为明确蓟马锉吸胁迫对垂叶榕Ficus benjamina Linn.叶片的表面超微结构及蛋白质和氨基酸含量的影响,以蓟马危害垂叶榕不同等级叶片为对象,应用扫描电镜观察了其表面超微结构变化,通过氨基酸自动分析仪等检测了氨基酸及蛋白质含量。结果表明:垂叶榕叶片受蓟马锉吸为害后,表面超微结构发生明显改变,蜡质层破裂,表皮细胞损伤,气孔功能渐失,影响叶片功能与整体观感。蓟马锉吸胁迫因子对垂叶榕叶片蛋白质含量产生了极显著影响(P<0.01),各危害等级处理叶片两两间蛋白质含量的差异性不同。与0级叶片相比,锉吸叶片中蛋白质含量均出现了不同程度的下降,其中,1级叶片中下降最快,随后蛋白质含量下降明显变缓,甚至在危害最重的4级叶片中,蛋白质含量出现了小幅提高。氨基酸中有蓟马必需氨基酸(essential amino acid,EAA)9种和非必需氨基酸(non-essential amino acid,NEAA)8种。在同一危害等级叶片中,17种氨基酸的含量存在明显差异,可划分为3个层级,但它们含量排序相对稳定;在不同危害等级叶片中,各种氨基酸的含量随叶片危害等级的提高而变化,两者紧密关联。TAA(总氨基酸total amino acids),EAA和NEAA含量均随蓟马危害等级的提高而呈现不同幅度的下降,2级和3级叶片中的降幅明显;17种氨基酸的含量则有不同程度的变化,大部分随危害叶片等级的提高而下降,2级叶片中降幅最大,Arg,Lys和Met3种EAA与Asp,Cys,Ser和Tyr4种NEAA则不同,在某些等级叶片中出现一定幅度的提高。本研究可为定量描述蓟马对垂叶榕叶片功能效益损失提供参考。

海藻寡糖对琯溪蜜柚保鲜品质的影响

以琯溪蜜柚为材料,用不同质量浓度的海藻寡糖浸泡处理采收后的果实,并在6±1℃冷库贮藏,在不同贮藏时间后,测定琯溪蜜柚的好果率、总糖、有机酸、木质素、可溶性固形物和维生素C等指标.结果表明,琯溪蜜柚在6±1℃冷库中贮藏120 d,海藻寡糖涂膜处理组的好果率均高于对照组,160和120 mg·L-1海藻寡糖处理组的好果率分别为94%和90%,而对照组的好果率为67%.经海藻寡糖处理后,可减少果实总糖、有机酸、木质素、可溶性固形物和维生素C的损耗,提高果实贮藏后的硬度,延长蜜柚的保鲜期和货架期,具有良好的保鲜效果.

墨兰品种健叶与感染胶孢炭疽菌病叶的表面结构及氨基酸含量比较

【目的】明确墨兰品种健叶与感染胶孢炭疽菌病叶的叶片表面结构及氨基酸含量的变化,为墨兰品种抗病性利用提供理论依据。【方法】以中感墨兰品种太平洋为样本,利用扫描电镜观察感染胶孢炭疽菌墨兰叶片表面超微结构的变化;以不同感病水平墨兰品种金华山(低感品种)、太平洋(中感品种)和万代福(高感品种)为样本,利用氨基酸自动分析仪检测感病墨兰叶片除色氨酸外其余17种氨基酸含量的变化。【结果】中感墨兰品种太平洋感染胶孢炭疽菌后,叶片表面超微结构发生明显改变,蜡质层破裂,表皮细胞受损,气孔功能渐失,严重影响叶片功能与整体观感。3种不同感病水平的墨兰品种感染胶孢炭疽菌后,氨基酸种类未发生改变,但总氨基酸含量均明显提高,其中以低感墨兰品种金华山提高最多,高感墨兰品种万代福提高最少,3个品种间差异显著;各种氨基酸在不同感病水平墨兰品种间的变化量差异显著,甲硫氨酸(Met)在高感墨兰品种中变化量最大,胱氨酸(Cys)在中感墨兰品种中变化量最大,天门冬氨酸(Asp)、组氨酸(His)和赖氨酸(Lys)在高感与低感墨兰品种中变化量较大,甘氨酸(Gly)和苏氨酸(Thr)在中感与低感墨兰品种中变化量较大,其他10种氨基酸则均在低感墨兰品种中变化量最大;丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、苯丙氨酸(Phe)、缬草氨酸(Val)、丝氨酸(Ser)、精氨酸(Arg)和苏氨酸(Thr)7种氨基酸是影响墨兰品种感病强弱的主要氨基酸种类。【结论】胶孢炭疽菌侵染影响墨兰品种叶片表面结构和氨基酸含量,营养物质变化量与墨兰品种感病水平高低有关。

福建甜椒蓟马发生情况及蜡蚧轮枝菌对蓟马优势种的致病力

【目的】明确福建甜椒蓟马发生情况及蜡蚧轮枝菌对蓟马优势种的生防潜力。【方法】以主产地漳州的甜椒种植基地为观测点,调查3种甜椒品种上蓟马的种类和数量,测定蜡蚧轮枝菌LL-01对甜椒蓟马优势种的致病力。【结果】甜椒路帅品种和布兰妮品种上蓟马数量近似且均显著高于特雅斯品种;甜椒上有花蓟马、黄胸蓟马和棕榈蓟马3种蓟马,其中花蓟马的相对丰度高达91.31%~94.93%。菌株LL-01侵染花蓟马7 d后的LC_(50)达3.47×10^(5)孢子·mL^(−1),1×10^(7)~1×10^(8)孢子·mL^(−1)处理的累计致死率为78.16%~87.36%,LT_(50)为3.73~4.24 d。【结论】蓟马对不同甜椒品种的嗜好性不同,花蓟马为优势种;蜡蚧轮枝菌LL-01对花蓟马的致病力强,可用于该虫的生物防治。

出口盆栽榕树根结线虫病的发生与防控药剂选择

以出口盆栽榕树种植示范基地为观测点,剖析检测根结线虫病的病原种类、为害症状、发病规律和传播控制,选择测定阿维菌素、毒死蜱、益舒宝和克百威对基质和根系根结线虫的防控效果,评价根结线虫对这4种药剂的敏感性。结果表明:对出口盆栽榕树造成为害的主要是南方根结线虫。阿维菌素原浆、毒死蜱乳油对盆栽榕树基质和根系根结线虫的防控效果均较理想,极显著优于两颗粒剂益舒宝和克百威。基质根结线虫对阿维菌素和毒死蜱敏感,LD50分别为0.215 4 mg/L和0.215 5 mg/L,无明显差异。根系根结线虫对阿维菌素的LD50为8.64 80 mg/L,是毒死蜱的3.10倍;克百威的LD50为2.127 9 g/盆,是益舒宝的1.35倍;各处理抗性个体出现频率会有不同,要尽可能轮换或交替使用。

大花蕙兰与墨兰种间杂交种子无菌播种繁殖技术研究

建立杂交兰无菌播种和再生体系,获得一定数量的杂交后代群体,为新品种的选育提供基础材料。以大花蕙兰‘肯尼’为母本和墨兰‘太平洋’进行种间远缘杂交,取其成熟种子进行无菌播种,探讨不同基本培养基、植物生长调节剂和添加物对其种子萌发、根状茎增殖与分化及壮苗生根等的影响。结果表明:种子萌发最适配方为:1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭1.0 g/L;根状茎增殖与分化培养基最适配方为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,培养70天分化成苗率达88.6%。适宜的壮苗生根培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+香蕉泥90 g/L+活性炭2.0 g/L。室外闭瓶炼苗30~40天,再开盖炼苗3~5天后,以发酵的树皮加碎石子为基质,60天左右种苗成活率达98.62%。

柚AUX/IAA基因族的基因注释分析

以De novo转录组学方法分析柚Citrus grandis Osbeck cv.生长素/吲哚乙酸蛋白(auxin/indoleacetic acids protein,AUX/IAA)基因家族的基因。以特早熟龙柚(变异型)和琯溪蜜柚(参照型)嫩果和叶片为材料,经过RNA提取、反转录、测序、组装得到Unigene序列。Unigene序列在Nr、Swiss-Prot、KEGG和COG四大数据库中进行比对,获得AUX/IAA家族基因注释结果。采用数字基因表达标签(digital gene expression tag,DGE)技术,对样本中基因转录丰度以RPKM值表示,比较处理组和对照组的RPKM值,以倍性变化≥2确定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。从特早熟龙柚和琯溪蜜柚嫩果和叶片中,总共注释到17个AUX/IAA基因家族基因,它们都在特早熟龙柚和琯溪蜜柚嫩果和叶片中表达。其中在龙柚嫩果(FE)和蜜柚嫩果(FL)中有1个差异表达基因(序号:035781);在龙柚叶片(LE)和蜜柚叶片(LL)中有1个差异表达基因(序号:001808)。注释到的17个AUX/IAA基因家族基因各有14个在克莱门特柚Citrus clementina和中国甜橙Citrus sinensis报道过。

农残快速检测试剂在水果中的运用

农产品化学农药残留给人们健康带来的危害已引起社会广泛关注。在目前常用的化学农药中,有机磷和氨基甲酸脂类占比例最大。基于有机磷农药能抑制胆碱酯酶酶促反应的机理,本文提出了一种快速检测水果中有机磷农药残留的方法,实验表明该方法操作简便,测定所需时间短,灵敏度高。

盆栽榕树害螨为害情况及其田间防控药剂测定

以福建漳州盆栽榕树种植示范基地为观测和试验点,调查分析害螨的为害症状、发生种类和优势种动态时间格局,测定7种药剂对害螨的田间防治效果。结果表明:盆栽榕树种植区的害螨种类有4个科6个属6种,优势种为桔全爪螨;优势种种群动态时间格局分为5类,依次经历发展期、第1高峰期、衰退期、第2高峰期和越冬期。7种药剂对害螨均有一定的防治效果,无药害,15%哒螨灵乳油和73%克螨特乳油对害螨具有较好的速效性,药后1 d防效超过73.00%;11%乙螨唑悬浮剂、24%螺虫乙酯悬浮剂、24%螺螨酯悬浮剂和73%克螨特乳油能持续控制害螨为害,药后30 d防效均在90.00%以上。

三种果蜡在芦柑保鲜的应用研究

比较室温条件下果蜡Castke873、Citrus clear和"仙亮"对芦柑保鲜作用的差异,结果表明:Citrus clear的保鲜效果最好。Citrus Clear处理的果实在贮藏期间果实外观良好,基本保持原有风味;而Castke873和"仙亮"则出现果皮失水、褐变现象,果实风味变差;Castke873处理的果实腐烂最多,达13个。生理指标分析表明3种果蜡对总糖的影响较小,但均能在一定程度上降低失重率和可滴定总酸含量的消耗,减缓维生素C含量的下降,其中以Citrus clear的效果最好。

柚(Citrus grandis Osbeck cv.)MADS box基因的表达分析

以De novo转录组学方法分析柚(Citrus grandis Osbeck cv.)MADS box基因家族的基因.以特早熟龙柚(变异型)和琯溪蜜柚(参照型)嫩果(不超过5天)和新叶为材料,经过RNA提取、反转录、测序、组装得到Unigene序列.Unigene序列在Nr、Swiss-Prot、KEGG和COG四大数据库中进行比对,获得MADS box转录因子家族基因注释结果.采用数字基因表达标签(digital gene expression tag,DGE)技术,对样本中基因转录丰度以RPKM值表示,比较处理组和对照组的RPKM值,以倍性变化≥2确定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs).从特早熟龙柚和琯溪蜜柚嫩果和叶片中,总共注释到28个MADS box基因家族基因.在龙柚嫩果(FE)和蜜柚嫩果(FL)中表达的有25个,其中有6个属于差异表达基因.在龙柚叶片(LE)和蜜柚叶片(LL)中表达的有27个,其中有7个属于差异表达基因.注释到的28个MADS box基因家族基因在克莱门特柚(Citrus clementina)和中国甜橙(Citrus sinensis)报道过的分别有18个和20个,其中有5个基因既在中国甜橙和克莱门特柚都没有报道过,也没有发现在其它Citrus物种报道过.

“Carnauba Citrus”果蜡与“仙亮”果蜡对芦柑保鲜效应的比较

研究了室温条件下澳大利亚果蜡"Carnauba Citrus"与美国"仙亮"果蜡对芦柑保鲜效应的差异,结果表明:2种果蜡均能减少芦柑维生素C和总酸的损耗,降低果实的失重率,但对总可溶性固形物和总糖的影响都不明显;除此之外,"Carnauba Citrus"比"仙亮"更能保持果实外观品质及风味,可有效延长保鲜时间。

漳州地区榕树蓟马为害及田间防控药剂药效评判

以漳州地区盆栽榕树种植示范基地为观测点,调查了榕树蓟马的为害情况,评判了6种药剂对榕树蓟马的田间防治效果。结果表明:盆栽榕树易受榕树蓟马危害,锉吸嫩叶、幼芽和当年生的老叶,造成盆栽榕树生长受阻。6%乙基多杀菌素悬浮剂防治效果最好,可长时间将虫口密度抑制在较低的水平,是防治榕树蓟马的首选药剂;52.25%毒死蜱.氯氰菊酯乳油和20%丁硫克百威乳油的速效性和总体防治效果均较好,也是防治榕树蓟马较好的药剂;3%啶虫咪乳油和48%毒死蜱乳油可作为防治榕树蓟马辅助药剂;4%阿维菌素乳油在田间应酌情考虑少用。6种药剂均未对盆栽榕树产生药害。

玛丽番茄栽培技术

玛丽番茄是小番茄中的一个优良品种,是台湾农友种苗公司近年育成之良种。2007年漳州引进了玛丽番茄,通过两年的栽培观察,总结其在漳州秋季栽培的技术要点。

东方百合组织培养研究现状

阐述东方百合的组织培养技术,包括不同部位的外植体组培,以及激素、射线处理对组培的影响。